PPAR-α免疫共沉淀试剂盒

　　过氧化体增殖物激活型受体-α(PPAR-α)在细胞分化、发育、代谢(碳水化合物、脂质、蛋白)和肿瘤发生中起着重要作用，PPAR-α是一种核受体蛋白，做为转录因子调控基因表达，其可以与其它许多共调节物如P300，TRIP3相互作用调控着下游基因的表达。美国Signosis提供的PPAR-α免疫共沉淀试剂盒包括带Myc标签的PPAR-α表达载体，其可用于分析PPAR-α和PPAR-α相关蛋白之间的相互作用。 　　A. 优点： 　　PPAR-α免疫共沉淀试剂盒具有下列优势： 　　· 蛋白相互作用的功能性检测方法——可用于RXR与其它蛋白的相互作用。 　　· 噪音低——WB检测时非特异信号非常低。 　　· 结果一致性高——磁珠易于通过磁架分离，少而快的洗涤无样品丢失。 　　· 快速——蛋白用抗Myc磁珠沉淀，无需预分离步骤，缩短孵育时间。 　　· 简便——试剂盒包含全部试剂组份。 　　B. 原理： 　　Myc标签的PPAR-α表达载体用于转染靶细胞。转染后，PPAR-α表达Myc抗原决定部位标签，与反应蛋白结合。PPAR-α复合物与相应蛋白可以快速高效的与抗Myc抗体免疫共沉淀，共沉淀复合物通过磁力架进一步与未结合的蛋白分开，洗涤后，复合物高效彻底的从磁珠上洗脱下来，用SDS-PAGE分离以进一步WB分析。磁珠上固相的Myc抗体在低PH洗脱条件下通过阻止轻链和重链的解离提供更好的WB检测。