人绒毛膜促性腺激素(hCG)通常是孕期胎盘产生的糖蛋白激素。 完整的hCG分子结构上由二个非共价连接的多肽亚单位--alpha和beta链亚单位组成。 完整hCG和hCG alpha的测定在血液和尿液的结果是类似的,但是beta亚单位则不同。 在正常孕期4-6个月母体血清,完整hCG分子的水平从20,000 mIU/ml到50,000 mIU/ml (1 ng = 15 mIU)。 相反,不管是游离的a-还是游离的ß - hCG平均水平是1% hCG的一半。 hCG和游离亚单位看来作为非滋养细胞肿瘤的血清学标志物用处不大, 不过,绒毛膜癌患者ß-hCG水平的绝对增加与正常怀孕者有明显地区别。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---高度优选特异的针对ß-hCG的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 游离ß-hCG试剂为固相酶免法。 方法采用抗ß-hCG抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗ß-hCG抗体做检测抗体, 待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,ß-hCG夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。ß-hCG的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
小干扰RNA(siRNAs)是双链RNA分子,长度在20-25个核苷酸。2001年时表明合成的siRNAs能够诱导RNAi进入哺乳动物细胞,siRNAs引起了生物医学和药物研发的极大关注,从而被广泛应用于沉默基因表达。监测siRNA的运送和表达对保证敲除成功是非常重要的。Northern blot是分析这些分子常用的方法,但该方法不够敏感,操作相对繁琐。美国Signosis开发了一种高敏的siRNA微孔板检测方法,比Northern Blot敏感100倍,此外该方法只是简单的孵育,如同ELISA,更重要的是可以同时分析大量样本。根据客户提供的特定的siRNA序列,美国Signosis会设计一套oligos,然后提供给客户相应的检测试剂。 A.优点: 美国Signosis基于其自有专利技术的siRNA微孔板检测试剂具有下列优点: ·操作简单---做siRNA检测象做ELISA,整个试验步骤只是孵育和洗涤。 ·灵敏度高---较siRNA Northern blotting分析敏感100倍。 ·定量分析---特定siRNA的表达可以定量分析。 B.原理: 基于自有专利siRNA微孔板检测中,一个siRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接,其中一个连接oligo与捕获oligo和待测的siRNA部分杂交,另一个连接oligo与检测oligo和待测的siRNA另一部分杂交,杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固着在微孔板上,再由辣根酶标记的链酶亲和素和发光底物检测。
成纤维细胞生长因子(FGF) - 2,亦称碱性FGF (FGFb),是体内血管形成的强刺激剂,还是体外许多类型细胞扩散、迁移、分化和生存的一种多效性的调节剂,包括内皮细胞、平滑肌细胞和基质细胞。 它能够诱导体内和体外血管生成反应。 碱性和酸性FGFs,是结构上相关的细胞因子,属于肝素结合家族, 广泛表达在胚胎发育和正常创伤愈合期间。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人FGFb的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. B. 原理: FGFb试剂为固相酶免法。 方法采用鼠抗人FGFb抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的鼠抗人FGFb抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品FGFb夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。FGFb的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一种集落刺激因子激素。 它是由一些不同的组织产生,刺激骨髓产生粒细胞和干细胞并刺激骨髓释放它们入血。 它也刺激前体嗜中性细胞和成熟嗜中性细胞以及单核细胞的生存、增殖、分化和活动。 G-CSF以一种抗炎方式影响单核细胞的功能。 G-CSF对单核细胞的刺激导致LPS诱导的IL-1、TNF-a、IL-12和IL-18的减少。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人G-CSF的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: G-CSF试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人G-CSF抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人G-CSF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品G-CSF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。G-CSF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
基因表达是在单个细胞水平进行调控,需要有多种方法分析单个细胞如干细胞、神经元、发育组织、激光捕获切片的基因表达方式。SYBR Green 是最广泛应用的双链DNA特异染料,是实时PCR报告染料。Signosis公司研发了一种单个细胞的SYBR Green实时RT-PCR试剂,不需要RNA制备,而是直接用细胞裂解物。该试剂盒是一种敏感、定量、价廉的方法,用以实时监测PCR反应。除了CLTM细胞裂解液试剂盒包括cDNA合成和PCR扩增的所有试剂。 A. 优点: 美国Signosis公司直接用细胞裂解液的RT-PCR试剂具有以下优点: ·便利---从细胞裂解、反转录直到PCR,试剂盒包含了所有试剂。 ·无需RNA制备---细胞裂解液可直接用于反转录。 ·功能强大---该试剂可获得全长的cDNA。 ·实时---分析可以实时监测 B. 原理: 缓冲液已优化适于进行细胞裂解物制备和RT-PCR。
美国Signosis 提供的ELISA细胞裂解液,经过优化,可快速高效的制备细胞提取物,用于ELISA测试蛋白水平。 A. 优点: 美国Signosis CL(TM)细胞裂解液具有下列优势: 步骤简单——无需RNA制备细胞裂解后直接进行反转录。 细胞用量少——几个细胞足够制备用于PCR的cDNA。 B. 原理:
细胞因子是不同细胞类型产生的细胞外信号蛋白,其作用于靶细胞,调节靶细胞多种多样的细胞功能,如吸引特定类型的细胞到炎症部位,增加免疫细胞活性和生存期,抑制细胞反应。 炎症是对组织损伤的反应。 在急性和慢性炎症过程中,多种可溶性因子参与细胞浸润,细胞激活和炎症的全身反应。 细胞因子是炎症反应的主要方式。 多数细胞因子是以自分泌或旁分泌的方式作用于局部或全身的多功能分子。 细胞因子介入的广泛网络,具有协同性和对抗性相互作用,对各种靶细胞发挥着负性的和正性的调节作用。 所以,描述细胞因子的表达方式为洞察潜在的免疫机制提供可贵的视角。美国Signosis 大鼠炎症细胞因子复合酶免法平行检测试剂可定量测定8种细胞因子:TNFa, IL-6, IFNr, IL-1a, IL-1b, MCP-1, Rantes and MIP。 A. 优点: · 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种炎症生物标记物 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA- 1202为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 板条每个孔包被有针对炎症生物标记蛋白的特异抗体,8个孔包被有8不同抗体,一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应,炎症细胞因子夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。 炎症细胞因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比。待测样品 450 nm处测定吸光值进行定量。
SH2结构域是一段蛋白,与磷酸化酪氨酸蛋白结合。含有SH2结构域的蛋白在信号转导中发挥重要作用。人基因组上总计有120种SH2结构域。通过GST融合蛋白的方法识别与结构域结合的蛋白是剖析信号传导途径关键。Signosis现提供全基因组SH2结构域GST融合蛋白,可用于GST pull-down实验。 A. 优点: 以下蛋白可咨询提供不同的量,也可提供蛋白包被珠和GST融合蛋白表达载体 B. 原理 SH2结构域克隆后以GST融合蛋白表达,蛋白通过谷胱甘肽柱纯化。
AP1是一种由jun和Fos蛋白组成的二聚体蛋白复合物,在调控细胞死亡、增殖和转化中起着重要作用。AP1蛋白可由许多刺激物激活,这些刺激物包括TPA、血清、生长因子、oncoprotein、TNF和IL-1,以及各种环境压力,如UV照射。AP1激活时在靶基因启动子区与AP-DNA识别因子结合,调控基因表达。美国Signosis 公司研发的AP1滤板法检测试剂用于检测AP1的DNA结合活性,可同时分析多个标本。 A. 优点: 美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的AP1滤板法检测试剂,具有下列优势: · 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 · 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 · 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 · 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 B. 原理 美国Signosis 公司研发的AP1滤板法检测试剂,是基于微孔板检测AP1活性的分析方法,预标记AP1的DNA结合序列与核抽体物混合,形成AP1-DNA复合物。过滤板用于保留结合的AP1探针,除去游离的DNA探针。结合的预标记的AP1探针随后从过滤板上洗脱、收集,与相应孔的杂交板杂交。捕获的AP 1探针进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。
β-actin是一种高度保守的蛋白,以恒定水平遍布于所有哺乳动物细胞中,既使在许多情况下进行实验性的处理或技术操作也不影响,因此,测定β-actin一般用于防止实验差错的对照。美国Signosis提供的β-actin 酶免试剂可检测内源性β-actin的水平,用于人、小鼠、大鼠样本大部分酶免试验的对照。 A. 优点: β-actin Elisa 试剂具有下列优势: · 在蛋白水平上标化样本---可用于标化不同样本,包括各种诱导样本和蛋白水平的不同组织。 · 高效灵活---来自不同种类的样本,如人、小鼠和大鼠,可选择相应数量的检测孔同时分析。 · 特异性强---优选高度特异的针对CA125的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: β-actin酶免试剂为固相酶免法。该方法采用β-actin兔多克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗β-actin单抗做检测抗体,待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,β-actin夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。β-actin的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。