肌钙蛋白是三种蛋白——肌钙蛋白T、I和C的复合体，其结合到横纹肌的细丝(肌动蛋白)上，通过钙结合量调控肌肉收缩。肌细胞(心脏或骨骼肌)受损时，游离肌钙蛋白亚单位与肌钙蛋白复合体一起释放入血液。肌钙蛋白亚单位I有三种同型异构体; 二种在骨骼肌，一种在心肌。 由于组织特异性，心脏肌钙蛋白I(cTnI) 对急诊室(ED)就诊的胸口痛患者的鉴别诊断具有实用价值，是诊断急性心肌梗塞(AMI)首选的生物标志物。心脏TnI与CK-MB一样有类似的释放方式(疼痛发作后4-6个小时，梗塞后大约12个到24个小时达到高峰)。然而cTnI在相当长的时期(6-10天) 依然维持高水平，因而对心脏损害的诊断提供一个较长的窗口期。武汉中帜生物科技有限公司cTnI酶免法可快速，敏感和可靠的定量检测心脏特异肌钙蛋白。试剂的灵敏度为1.0 ng/ml，不与人心脏肌钙蛋白T或骨骼肌钙蛋白T或I交叉。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对cTnI的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B.技术原理 　　肌钙蛋白I 试剂为固相酶免法。方法采用针对cTnI不同抗原决定簇的三种鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体，辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗cTnI单克抗体做检测抗体，待测样品中的cTnI可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后，洗去未结合的标记抗体。加入HRP底物TMB产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。cTnI的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450nm处测定吸光值进行定量。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对cTnI的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B.技术原理 　　肌钙蛋白I 试剂为固相酶免法。方法采用针对cTnI不同抗原决定簇的三种鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体，辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗cTnI单克抗体做检测抗体，待测样品中的cTnI可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后，洗去未结合的标记抗体。加入HRP底物TMB产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。cTnI的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450nm处测定吸光值进行定量。

　　microRNAs (miRNAs)在基因表达的调控方面具有重要性。哺乳动物30%的基因由miRNAs调控。 到目前为止，人的染色体上确定有500多种 miRNAs，其中许多miRNA只相差一个或者几个核苷酸。 成熟miRNAs的表达是组织特异的。miRNAs丰度可相差几个数量级。 更重要的是miRNA表达的错误调控涉及到人的不可治愈症。 系统检测miRNA表达显示一些不可治愈症存在独有的特征。人miRNA芯片检测试剂IV可检测100种miRNA。 　　A. 优点: 　　美国Signosis公司基于其自有的T7-OLA(oligo Ligation Assay)专利技术提供的miRNA芯片具有以下优点 　　· 分辨力强---能分辨所有同源的miRNA ，所有同源的let7可清楚分辨 　　· 线性扩增---捕获的miRNAs被T7转录扩增，没有PCR扩增引入的偏差 　　· 勿需预纯化---总RNA可以直接进行分析， 勿需预分离 　　· 操作简单---步骤简单、流畅 　　B. 原理 　　miRNA在三个方面与信使核糖核酸不同： (1) miRNAs是相当小的分子，丰度差异较大 (2)成熟miRNAs与其前体pre-miRNA和primiRNA共存，只是长度不同(3)许多miRNAs序列非常接近，例如同源分子，只是一个或几个核苷酸不同。所以，常规芯片技术不能直接用于分析这些分子。一些miRNA芯片产品市面上也可买到，但这些产品或者繁琐需预分离microRNA，或者缺乏分辨力不能区分同源之间的差异，或者对低丰度的miRNAs不够敏感。 　　对每一个miRNA分子，有二条引物(oligo)来识别，每条引物只识别miRNA一半的序列。其中的一条引物中含有标示序列(Tag)，另外一条引物含有T7启动子序列。只有序列完全匹配的时候，两个引物才能和miRNA杂交，形成RNA/DNA的杂合体。即使只有一个核苷酸不匹配都会造成杂交或者随后连接的失败。这也是T7-OLA技术的产品可分辨同源miRNA的原因。为了增加分子的稳定性，该DNA/RNA杂合体被延伸了一段序列(加入的另一对寡核苷酸与上述引物在T7和Tag部位互补)。含有生物素(biotin，B)的短序列通过互补结合到其中的一条引物上。通过结合有亲和素(Streptavidin)的磁珠分离出杂合体。然后，两引物在T4连接酶的作用下，被连接成一条DNA片断。随后经过线性扩增(转录)，含有生物素的UTP整合到RNA序列中。把转录好的RNA序列和预先准备好的含有不同miRNA序列的膜，进行杂交。最后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素进行反应，加入发光底物测定。 　　美国Signosis公司miRNA芯片II试剂测定72个最有影响的miRNAs及其同源的表达。 步骤简单、流畅，包括三步： (1) 含有miRNA的样品与提供的引物混合，形成RNA/DNA(miRNA/oligo)的杂合体(2)选出杂合体，除去游离的寡核苷酸，在miRNA引导下两引物连接成一个DNA片断(3)通过T7转录，扩增连接的DNA片断

　　基因表达进行反转录时常常需要RNA制备。美国Signosis公司CLTM细胞裂解液无需RNA制备可直接用细胞裂解液进行反转录，因此少量的细胞可进行RT-PCR分析。Signosis公司提供的优化RT-PCR试剂，用于CLTM细胞裂解液进行细胞裂解后的RT-PCR，其包括CLTM细胞裂解液和所有cDNA合成和PCR扩增的试剂。 　　A. 优点： 　　美国Signosis公司直接用细胞裂解液的RT-PCR试剂具有以下优点： 　　·便利---从细胞裂解、反转录直到PCR，试剂盒包含了所有试剂。 　　·无需RNA制备---细胞裂解液可直接用于反转录。 　　·功能强大---该试剂可获得全长的cDNA 　　B. 原理： 　　缓冲液已优化适于进行细胞裂解物制备和RT-PCR。

　　在胚胎发育的过程中，干细胞可以分化形成所有的胚胎组织。在成人有机体，干细胞和祖细胞作为身体的修复系统，重新补充专业细胞，以维持再生器官正常转交，例如血液、皮肤或者小肠组织。 最近研究提出干细胞的维护和分化是由microRNAs (miRNA)调控的。miRNA是一段小的非编码RNA分子(大约20个核苷酸长)，对基因的表达调控和细胞分化起着重要的作用。研究发现干细胞的正常维持和分化是受到miRNA严格调控的。在干细胞中，miRNA的表达水平也不一样。例如，在神经线性分化的过程中，脑组织特异性的miR-124a和miR-9的表达差别很大。据报导miRNA也调控癌症干细胞。干细胞miRNA芯片是专门检测干细胞维持和分化相关的69种miRNA表达水平，可以用于人源，小鼠，以及大鼠的样品。对干细胞miRNA表达的研究可以帮助了解干细胞的调控机制。 　　A. 优点: 　　美国Signosis公司基于其自有的T7-OLA(oligo Ligation Assay)专利技术提供的miRNA芯片具有以下优点 　　· 分辨力强---能分辨所有同源的miRNA ，所有同源的let7可清楚分辨 　　· 线性扩增---捕获的miRNAs被T7转录扩增，没有PCR扩增引入的偏差 　　· 勿需预纯化---总RNA可以直接进行分析， 勿需预分离 　　· 操作简单---步骤简单、流畅 　　B.原理 　　miRNA在三个方面与信使核糖核酸不同(1) miRNAs是相当小的分子，丰度差异较大 (2)成熟miRNAs与其前体pre-miRNA和primiRNA共存，只是长度不同(3)许多miRNAs序列非常接近，例如同源分子，只是一个或几个核苷酸不同。 所以，常规芯片技术不能直接用于分析这些分子。 一些miRNA芯片产品市面上也可买到，但这些产品或者繁琐需预分离microRNA，或者缺乏分辨力不能区分同源之间的差异，或者对低丰度的miRNAs不够敏感。 　　对每一个miRNA分子，有二条引物(oligo)来识别，每个引物只识别miRNA一半的序列。其中的一个引物中含有标示序列(Tag)，另外一个引物含有T7启动子序列。只有序列完全匹配的时候，两个引物才能和miRNA杂交，形成RNA/DNA的杂合体。即使只有一个核苷酸不匹配都会造成杂交或者随后连接的失败。这也是T7-OLA技术的产品可分辨同源miRNA的原因。为了增加分子的稳定性，该DNA/RNA杂合体被延伸了一段序列(加入的另一对寡核苷酸与上述引物在T7和Tag部位互补)。含有生物素(biotin，B)的短序列通过互补结合到其中的一个引物上。通过结合有亲和素(Streptavidin)的磁珠分离出杂合体。然后，两个引物在T4连接酶的作用下，被连接成一个DNA片断。随后经过线性扩增(转录)，含有生物素的UTP整合到RNA序列中。把转录好的RNA序列和预先准备好的含有不同miRNA序列的膜，进行杂交。最后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素进行反应，加入发光底物测定。 　　美国Signosis公司miRNA芯片试剂测定69种干细胞相关的miRNAs及其同源的表达。 步骤简单、流畅，包括三步： (1) 含有miRNA的样品与提供的引物混合，形成RNA/DNA(miRNA/oligo)的杂合体(2)选出杂合体，除去游离的寡核苷酸，在miRNA引导下两个引物连接成一个DNA片断(3)通过T7转录，扩增连接的DNA片断。

　　凋亡涉及一系列生化活动，这些活动导致特征性的细胞形态和死亡，包括细胞膜的变化，细胞收缩，核碎裂，染色质浓缩，染色体DNA断裂。在发育期和机体均衡期，把不要的细胞除去是非常重要的。过渡凋亡引起营养不足，如脑缺血损伤;而不充分的凋亡导致细胞增殖失控。MicroRNAs (miRNAs)是非编码的小RNA分子，调控30%哺乳动物基因的表达。许多miRNAs对凋亡细胞信号调控有影响，如miR-145，miR-216，miR-182，miR-96 miRNAs的过渡表达导致天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的活性下降。美国Signosis公司开发的miRNA芯片检测凋亡相关的52种miRNAs。检测这些miRNAs的表达有助于揭示凋亡的miRNAs调控机制。 　　A. 优点: 　　美国Signosis公司基于其自有的T7-OLA(oligo Ligation Assay)专利技术提供的miRNA芯片具有以下优点 　　· 分辨力强---能分辨所有同源的miRNA ，所有同源的let7可清楚分辨 　　· 线性扩增---捕获的miRNAs被T7启动子扩增，没有PCR扩增引入的偏差 　　· 勿需预纯化---总RNA可以直接进行分析， 勿需预分离 　　· 操作简单---步骤简单、流畅 　　B. 原理 　　miRNA在三个方面与信使核糖核酸不同：(1) miRNAs是相当小的分子，丰度差异较大(2)成熟miRNAs与其前体pre-miRNA和primiRNA共存，只是长度不同(3)许多miRNAs序列非常接近，例如同源分子，只是一个或几个核苷酸不同。所以，常规芯片技术不能直接用于分析这些分子。一些miRNA芯片产品市面上也可买到，但是这些产品或者繁琐需预分离microRNA，或者缺乏分辨力不能区分同源之间的差异，或者对低丰度的miRNAs不够敏感。 　　对每一个miRNA分子，有二条引物(oligo)来识别，每个引物只识别miRNA一半的序列。其中的一个引物中含有标示序列(Tag)，另外一个引物含有T7启动子序列。只有序列完全匹配的时候，两个引物才能和miRNA杂交，形成RNA/DNA的杂合体。即使只有一个核苷酸不匹配都会造成杂交或者随后连接的失败。这也是T7-OLA技术的产品可分辨同源miRNA的原因。为了增加分子的稳定性，该DNA/RNA杂合体被延伸了一段序列(加入的另一对寡核苷酸与上述引物在T7和Tag部位互补)。含有生物素(biotin，B)的短序列通过互补结合到其中的一个引物上。通过结合有亲和素(Streptavidin)的磁珠分离出杂合体。然后，两个引物在T4连接酶的作用下，被连接成一个DNA片断。随后，经过线性扩增(转录)，含有生物素的UTP整合到RNA序列中。把转录好的RNA序列和预先准备好的含有不同miRNA序列的膜，进行杂交。最后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素进行反应，加入发光底物测定。 　　美国Signosis公司miRNA芯片试剂测定52个凋亡相关的miRNAs及其同源的表达。 步骤简单、流畅，包括三步： (1) 含有miRNA的样品与提供的引物混合，形成RNA/DNA(miRNA/oligo)的杂合体(2)选出杂合体，除去游离的寡核苷酸，在miRNA下两个引物连接成一个DNA片断(3)通过T7转录，扩增连接的DNA片断。

　　细胞因子是不同细胞类型产生的细胞外信号蛋白，其作用于靶细胞，调节靶细胞多种多样的细胞功能，如吸引特定类型的细胞到炎症部位，增加免疫细胞活性和生存期，抑制细胞反应。 炎症是对组织损伤的反应。 在急性和慢性炎症过程中，多种可溶性因子参与细胞浸润，细胞激活和炎症的全身反应。 细胞因子是炎症反应的主要方式。 多数细胞因子是以自分泌或旁分泌的方式作用于局部或全身的多功能分子。 细胞因子介入的广泛网络，具有协同性和对抗性相互作用，对各种靶细胞发挥着负性的和正性的调节作用。 所以，描述细胞因子的表达方式为洞察潜在的免疫机制提供可贵的视角。美国Signosis 鼠炎症细胞因子复合酶免法平行检测试剂可定量测定和描述8种细胞因子：TNFa, IFNr, G-CSF, GM-CSF, IL-1a, IL-8, IP-10, and Rantes 　　A. 优点: 　　· 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种炎症生物标记物 　　· 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 　　· 差别定量---不同于膜芯片方法，样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外， EA- 1052为做标准曲线提供标准品。 　　· 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法，勿需贵重仪器 　　· 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理 　　板条每个孔包被有针对炎症生物标记蛋白的特异抗体，8个孔包被有8不同抗体，一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应，炎症细胞因子夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后，洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。 炎症细胞因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比。待测样品 450 nm处测定吸光值进行定量。

　　哺乳动物miRNAs在组织中的丰度变化很大，例如，miR-133在骨骼肌中表达很高，在心脏中等 ，其它组织未检测到。要检测低表达的miRNA需要高灵敏的方法。美国Signosis高敏miRNA Northern Blot 试剂较常规基于生物素的化学发光检测的敏感10-100倍。 　　A.优点： 　　高敏miRNA Northern Blot 试剂具有下列优点： 　　·灵敏度高---较常规基于单生物素检测灵敏10-100倍。 　　·步骤简单---用总RNA点样杂交，HRP检测。 　　·无同位素---基于化学发光检测。 　　·探针预制---用生物素预标记和多生物素放大探针。 　　B.原理： 　　RNA样品经过凝胶电泳分离、转移至膜上。特定的miRNA的表达通过生物素标记探针---与miRNA互补的序列和标示序列进行检测，标示序列通过多生物素放大试剂检测。

　　miRNA是小的非编码RNAs，通过选择性的与互补的mRNA序列结合控制着转录水平的基因表达。近30%哺乳动物基因受小RNA分子的调控，从而调节各种生物功能，包括发育、细胞分化、增殖、凋亡、维持stemness和impriting。Northern blot是分析各种miRNAs常用的方法，尽管最近出现了一些新的方法，如实时定量PCR和定量测定miRNAs的侵入者探针法，但Northern blot分析的灵敏度低、通量差仍是其主要不足，实时定量PCR和侵入者探针法需要cDNA转换。美国Signosis基于其自有的专利技术-miRNA微孔板检测无需将miRNA分子转换成cDNAs，检测步骤主要是孵育和洗涤，非常简单。 　　miR-133和miR-1在心脏和骨骼肌中优势表达。在心脏细胞的分化、增殖和凋亡中发挥重要作用。二者聚集在相同的染色体位点，在发育过程中，以一种组织特异的方式共同转录，但在肌肉增殖、分化和凋亡中有不同的功能。许多重要的靶已得以认识和明确，如成肌纤维母细胞增殖中miR-133的靶是血清反应因子(SRF)，mygenesis中miR-1的靶是histone deacetylase (HDAC4)，miR-133的靶是caspase-9，心肌细胞凋亡中miR-1的靶HSP60和HSP70，细胞外基质蛋白增加(纤维变性)中miR-133和miR-1的靶是结缔组织生长因子(CTGF)，更为重要的是miRNA表达的异常调节与病人患病的心脏相关联，因此具有做为心血管病诊断标记物和治疗靶点的巨大潜力。下图2所示miR-133和miR-1是Signosis的miRNA微孔板检测试剂分析检测结果。 　　A.优点： 　　美国Signosis基于其自有专利技术的miRNA微孔板检测试剂具有下列优点： 　　·操作简单---做miRNA试验象做ELISA试验，无需用酶转换miRNA成cDNA，检测步骤只是孵育和洗涤。 　　·灵敏度高---较miRNA Northern blotting分析敏感100倍。 　　·分辨力强---在分辨同源miRNA 时，较Northern blot有更高的分辨力。 　　·差别定量---二个或二个以上特定miRNA表达的差异可定量分析。 　　B.原理： 　　基于自有专利miRNA微孔板检测中，一个miRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接，一个连接oligo与捕获oligo和待测的miRNA部分杂交，另一个连接oligo与检测oligo和待测的miRNA另一部分杂交，杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固者在微孔板上，再由辣根酶标记链酶亲和素和发光底物检测，这种杂交体结构对miRNA分子序列非常敏感，一个核苷酸的差异即会阻止杂交体的形成，从而可分辨同源miRNA，而Northern blot则很难鉴别同源miRNA，此外该方法的敏感性较Northern blot高。

　　肌红蛋白是一种血红素蛋白，存在于心肌和骨骼肌，携带氧气。肌肉受损时，如心脏病发作，大量的肌红蛋白释放，造成血液水平迅速上升。肌红蛋白是上升超过正常水平的第一个标志物之一。肌红蛋白水平在心脏病发作后2-4个小时内超过基线水平，9-12个小时达到高峰，24-36个小时回到基线水平。在没有骨骼肌损伤或其它非心脏病引起的循环肌红蛋白增加时，其水平可用做早期心肌梗塞的标志。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对肌红蛋白的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理 　　肌红蛋白试剂为固相酶免法。方法采用抗肌红蛋白的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体，辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗肌红蛋白抗体做检测抗体，待测样品中的肌红蛋白可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后，洗去未结合的标记抗体。加入HRP底物TMB产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。肌红蛋白的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450nm处测定吸光值进行定量。

　　人或组织的miRNA的表达具有差异性。miRNA芯片可用来了解众多miRNA差异表达的水平。MiRNA表达、组织分布和芯片检定方法常常要用Northern Blot，以便直接观察miRNA表达的差异及成熟miRNA大小(以内参照RNU48 RNA做比较)。美国Signosis公司 miRNA Northern 印迹检测试剂是一种非放射性的、简单的、高灵敏的分析工具，试剂盒提供了Northern 印迹分析所需要的所有组分。更重要的是，该方法不需要放射性标记探针，可提供生物素预标记的多种不同探针。 　　A. 优点 　　和市场上同类产品相比， 该产品具有以下优点： 　　· 无同位素----基于化学发光检测 　　· 勿需制备探针---- 提供生物素预标记探针 　　· 试剂盒提供试验全部所需---提供凝胶，膜，RNA转移液，杂交液，检测液 　　· 实验步骤简单 ---操作简单流畅 　　B. 原理 　　RNA样品通过胶凝胶电泳分离并转移到膜上。 特定miRNA表达用生物素标记的探针检测。