心脏病发作(或心肌梗塞)时,损伤的心脏组织释放心脏的酶如肌酸激酶(CK) 。 CK存在于心脏和骨骼肌以及肝脏和脑子。 CK-MB是仅存在心肌的CK亚型。 血液通常有低水平的CK-MB。 心肌受损时(如心脏病发作),CK-MB从受损的细胞漏出,引起血液水平的上升。 因而测定CK-MB增加时,可以诊断或证实近期心脏病的发作。急性心肌梗塞(AMI)后释放的CK-MB可早在症状起始的3-4个小时的血液中检测到,并且梗塞后大约65个小时维持高水平。据报道CK-MB水平在3小时后可诊断50%AMI,6小时后可诊断90%以上。在症状出现后6小时而没有诊断性心电图的急诊室患者,CK-MB的准确性在确证AMI是非常有用的。CK活性的测定主要用于诊断骨骼肌疾病,心肌梗塞,脑血管病,肌肉萎缩症,甲状腺机能不足,肺梗塞,以及监测病因和治疗。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对CK-MB的配对抗体 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 CK-MB试剂为固相酶免法。 方法采用抗CK-MB的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗CK-MB抗体做检测抗体, 待测样品中的CK-MB可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。CK-MB的浓度与待测样品的颜色呈深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
肿瘤坏死因子-a (TNFa),是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子,对细胞内的各种信号事件负责,引起坏死或凋亡。 TNFa对实体瘤生长、进展和转移关键性的血管形成也很重要。 此外, TNFa同肥胖症联系在一起。 它在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高,也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。 在肥胖鼠和人 脂肪组织中的TNFa过渡表达。 TNFa抑制胰岛素信号,至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-a的生理刺激物是什么,IRS-1在细胞TNF-a处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。 更好理解TNF-a和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人TNFa的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 人TNFa试剂为固相酶免法。 方法采用鼠抗人TNFa抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人TNFa检测抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品TNFa夹在捕获抗体和检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。TNFa的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
血管形成从无血管状态转变成有血管状态是生长维持的一个关键因素。 血管形成作为一种生物学的转换过程由促进和抑制血管形成的许多因素控制,包括血管内皮细胞生长因子(VEGF), 碱性成纤维细胞生长因子(FGFb),表皮生长因子(EGF)和促生长因子b(TGF-b)。 这些因子的作用机制是不同的,就象它们的来源和它们产生的刺激物一样。 血管形成的转换通常是促进和抑制血管形成因素之间的平衡结果。所以,描绘这些因素对了解血管形成至关重要。 美国Signosis 小鼠8种血管生成细胞因子复合酶免法平行检测试剂可同时检测8种血管形成细胞因子:TNFa、IGF-1、VEGF、IL-6、FGFb、TGFb、EGF和Leptin。板条每个孔包被有针对血管形成蛋白的特异抗体,一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。二个样品之间蛋白质的区别可以通过数据比较加以测定。 A. 优点: · 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种血管形成细胞因子 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA- 1022为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 板条每个孔包被有针对血管形成细胞因子的特异抗体,8个孔包被有8不同抗体,一个板条8个孔可测定8不同细胞因子。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应,血管形成细胞因子夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。450 nm处测定吸光值。 血管形成细胞因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比,待测样品 450 nm处测定吸光值进行定量。
NFkB 是一种广泛存在的转录因子,在细胞对各种刺激的反应中起着重要作用,这些刺激包括:压力、细胞因子、自由基、紫外线照射、氧化的LDL、细菌和病毒的抗原。NFkB的异常调节与炎症、自身免疫性疾病、脓毒性休克、病毒感染和不适当的免疫进展相关联。NFkB激活时,与其抑制剂IkB解离,从细胞质移到细胞核,在此与靶DNA 结合,正调节基因的转录,参与免疫和炎症反应、细胞调节以及凋亡。通过结合CLTM cDNA合成试剂 (该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液进行反转录), 美国Signosis公司研发了一种基于微孔板杂交阵列直接检测细胞裂解液中20多种NFkB调节基因表达。 A. 优点: 细胞裂解液中人NFkB调控的cDNA检测试剂具有以下优点: ·操作简单---无需RNA制备,直接用细胞裂解液合成cDNA。此外试验ELISA一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 与常规的需要总RNA进行反转录不同,美国Signosis开发了一种基于CLTM cDNA合成的微孔板阵列试剂。该试剂无需RNA制备,直接用用细胞裂解液通过反转录合成cDNA,然后用合成的cDNA探针进行微孔板阵列的杂交。通过预包被在微孔板上特异的寡核苷酸,靶基因被特异的捕获,捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,发光程度用微孔板发光检测仪表示为RLUs,基因表达水平直接与发光强度成正比。
STAT3蛋白在发育、免疫系统和炎症中起着重要作用。STAT3激活时,从细胞质转运到细胞核,与STAT3反应因子结合,调控基因表达,包括细胞生长、分化、转化和凋亡。STAT3功能失调与许多疾病相关。STAT3持续激活的形式在许多细胞系中可以检测到。美国Signosis 公司研发的STAT3滤板法检测试剂用于检测STAT3的DNA结合活性,可同时分析多个标本。 A. 优点: 美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的STAT3滤板法检测试剂,具有下列优势: · 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 · 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 · 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 · 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 B. 原理 美国Signosis 公司研发的STAT3滤板法检测试剂,是基于微孔板检测STAT3活性的分析方法,预标记STAT3的DNA结合序列与核抽体物混合,形成STAT3-DNA复合物。过滤板用于保留结合的STAT3探针,除去游离的DNA探针。结合的预标记的STAT3探针随后从过滤板上洗脱、收集,与相应孔的杂交板杂交。捕获的STAT3探针进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。
药物中毒主要是由药物代谢引起的。药物可以由药物代谢酶生物转化成为毒性或非毒性代谢物。许多蛋白家族如P450s、UDP-glucuronosyltransferases、sulfotransferases、阴离子转运蛋白和多种药物抗性蛋白参与药物代谢过程,催化内用药物的氧化。这些酶表达水平的变化是药物代谢个体差异的主要因素。美国Signosis公司的人药物毒性cDNA微孔板阵列检测试剂可检测22 种药物代谢相关基因的表达。 A.优点: 美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的药物毒性cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点: ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。
快速生长的肿瘤会出现缺氧区,大部分细胞对缺氧的反应是(1)产生VEGF和其它缺氧诱导的血管生成因子以促进增加血管生成,从而增加组织的氧合(2)从有氧的磷酸化到缺氧的糖酵解的代谢转换。缺氧诱导因子-1(HIF-1)是在缺氧反应过程中有重要作用的一种氧调控转录激动剂。HIF-1a亚单位是氧依赖性泛素化和蛋白酶体降解。细胞因子如白介素-1和肿瘤坏死因子-a刺激HIF-1依赖的基因表达。HIF-1增加促进血流及炎症的数种基因的表达,如血管生成因子(VEGF)。通过结合CL(TM )cDNA合成试剂 (该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液进行反转录), 美国Signosis公司研发了一种基于微孔板杂交阵列直接检测细胞裂解液中20多种HIF调节基因表达。 A. 优点: 细胞裂解液中人HIF调控的cDNA检测试剂具有以下优点: ·操作简单---无需RNA制备,直接用细胞裂解液合成cDNA。此外试验ELISA一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 与常规的需要总RNA进行反转录不同,美国Signosis开发了一种基于CL(TM )cDNA合成的微孔板阵列试剂。该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液通过反转录合成cDNA,然后用合成的cDNA探针进行微孔板阵列的杂交。通过预包被在微孔板上特异的寡核苷酸,靶基因被特异的捕获,捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,发光程度用微孔板发光检测仪表示为RLUs,基因表达水平直接与发光强度成正比。
C反应蛋白(CRP)具有结合和沉淀肺炎球菌C多聚糖的能力。CRP在肝脏合成,血清或血浆中水平较低,小于0.3 mg/dl 。CRP生理作用多样, 主要是宿主防御。 CRP是急性期蛋白,在针对多种疾病的非特异反应时血清或血浆水平上升,疾病包括由革兰氏阳性和革兰氏阴性的细菌感染,风湿性关节炎急性期,胃肠脓肿和胆管炎症。 CRP也存在于巴利综合症和多发性硬化症、某些病毒感染、结核病、急性传染性肝炎,坏死和炎症疾病,烧伤和手术创伤的患者中。 前瞻性调查显示急性心肌梗塞CRP水平上升与梗塞后的不良反应和梗塞大小之间呈正相关。血清中CRP水平升高不是特定疾病所特有的,是炎症过程有用的指示物。 血清或血浆中的CRP水平在组织损伤时的24到48小时内上升,急性期到达峰值(约1000倍),炎症或创伤恢复后减少。 人血清或血浆中CRP浓度的增加在降至正常水平之前可持续数天。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对C反应蛋白的配对抗体 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 技术原理 C反应蛋白试剂为固相酶免法。 方法采用针对C反应蛋白不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗C反应蛋白抗体做检测抗体, 待测样品中的C反应蛋白可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。C反应蛋白的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
嗜酸细胞趋化因子-3(Eotaxin-3),现在也称趋化因子 (C-C基序)配基26 (CCL26)或巨噬细胞炎性蛋白4-a(MIP-4-alpha),属于CC 趋化因子家族的细胞因子。 它吸引并激活嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和Th2型T淋巴细胞。 它由一些组织和IL-4细胞因子刺激的内皮细胞表达,组织包括心脏、肺和卵巢。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人Eotaxin-3的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: Eotaxin-3试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗人Eotaxin-3抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-2抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品Eotaxin-3夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。Eotaxin-3的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1),也称CCL2,是吸引单核细胞、记忆性T细胞和树状突细胞到组织损伤和感染部位有重要作用的炎症细胞因子。 MCP-1通过脂肪组织的炎症反应(巨噬细胞浸润)参与肥胖症和胰岛素抵抗。 另外, MPC1可在风湿性关节炎人群的关节中找到,以吸引巨噬细胞使炎症持续。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人MCP-1的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: MCP-1试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人MCP-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人MCP-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品MCP-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。MCP-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。