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  过氧化体增殖物激活型受体-α(PPAR-α)在细胞分化、发育、代谢(碳水化合物、脂质、蛋白)和肿瘤发生中起着重要作用,PPAR-α是一种核受体蛋白,做为转录因子调控基因表达,其可以与其它许多共调节物如P300,TRIP3相互作用调控着下游基因的表达。美国Signosis提供的PPAR-α免疫共沉淀试剂盒包括带Myc标签的PPAR-α表达载体,其可用于分析PPAR-α和PPAR-α相关蛋白之间的相互作用。   A. 优点:   PPAR-α免疫共沉淀试剂盒具有下列优势:   · 蛋白相互作用的功能性检测方法——可用于RXR与其它蛋白的相互作用。   · 噪音低——WB检测时非特异信号非常低。   · 结果一致性高——磁珠易于通过磁架分离,少而快的洗涤无样品丢失。   · 快速——蛋白用抗Myc磁珠沉淀,无需预分离步骤,缩短孵育时间。   · 简便——试剂盒包含全部试剂组份。   B. 原理:   Myc标签的PPAR-α表达载体用于转染靶细胞。转染后,PPAR-α表达Myc抗原决定部位标签,与反应蛋白结合。PPAR-α复合物与相应蛋白可以快速高效的与抗Myc抗体免疫共沉淀,共沉淀复合物通过磁力架进一步与未结合的蛋白分开,洗涤后,复合物高效彻底的从磁珠上洗脱下来,用SDS-PAGE分离以进一步WB分析。磁珠上固相的Myc抗体在低PH洗脱条件下通过阻止轻链和重链的解离提供更好的WB检测。

  纤溶酶原激活抑制因子(PAI-1)是抑制纤溶酶原激活剂蛋白家族成员之一。PAI-1是47 kDa分子量的单链糖蛋白。PAI-1是tPA和血液中其它纤溶酶原激活剂的主要抑制剂。PAI-1主要是由内皮细胞产生,脂肪组织也合成。在胰岛素抵抗患者中可观察到血浆PAI-1水平升高的脂肪组织产生的PAI-1。PAI-1水平升高显示与一些动脉粥样硬化的风险因素相关。胰岛素和前胰岛素与PAI-1水平相关。胰岛素抵抗综合症状和糖尿病患者有增加PAI-1水平的倾向。减肥和降低甘油三酯和/或胆固醇的治疗也显示可降低PAI-1水平。   A. 优点:   · 性价比高——高质量,低价格   · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量   · 特异性强——优选高度特异的针对人PAI-1的配对抗体   · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   PAI-1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人PAI-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人PAI-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品PAI-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。PAI-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。

  肿瘤坏死因子-α (TNFα),是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子,负责细胞内的多种信号事件,引起坏死或凋亡。 TNFα对实体瘤生长、进展和转移的关键性血管形成也很重要。此外,TNFα同肥胖症联系在一起,在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高,也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。在肥胖鼠和人脂肪组织中TNFα过渡表达。TNFα抑制胰岛素信号,至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚的是肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-α的生理刺激物是什么,IRS-1在细胞TNF-α处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。更好理解TNF-α和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。   A. 优点:   · 性价比高——高质量,低价格   · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量   · 特异性强——优选高度特异的针对鼠TNFa的配对抗体   · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   鼠TNFα试剂为固相酶免法。方法采用羊抗鼠TNF-α抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗鼠TNFα抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品鼠TNFα夹在捕获抗体和标记抗体之间,与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。鼠TNFα的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。

  胎盘生长因子(PIGF)是与VEGF序列高度相似的双链的糖蛋白。 PIGF主要转录本有二个选择性的接合方式:PIGF-1和PIGF-2。 一些组织表达PIGF,例如甲状腺、肺和胎盘。 PIGF能诱导体内血管形成,刺激内皮细胞迁移和增殖。PlGF受体包含fms样的酪氨酸激酶(flt-1)产物。   A. 优点:   · 性价比高---高质量,低价格。   · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。   · 特异性强---优选高度特异的针对人PIGF-1的配对抗体。   · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   PIGF-1试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人PIGF-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人PIGF-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品PIGF-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。PIGF-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。

  白介素 12 (IL-12)是有许多重要作用的白介素,包括NK细胞和T淋巴细胞的激活,初始T细胞分化为Th1细胞, T细胞生长和功能化, T细胞和自然杀伤细胞(NK) 产生干扰素r(IFN-r) 和坏死因素-a (TNF-a),IL-4介导的对IFN- r的抑制。IL-12 通过增加IFN- r的产生,反过来增加IP-10的产生,在抗血管生成活性中起重要作用。 IL-12是在对抗原刺激应答时由树状细胞、巨噬细胞和人B-淋巴母细胞系细胞自然产生。   A. 优点:   · 性价比高---高质量,低价格。   · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。   · 特异性强---优选高度特异的针对人IL-12的配对抗体。   · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统.   B. 原理:   IL-12试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗人IL-12抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-12抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品IL-12夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。IL-12的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。

  白介素-6 (IL-6)是调控免疫反应、造血、急性相反应和炎症的一种多功能细胞因子。IL-6产生的下调涉及到几种疾病过程的病理学。在几种疾病观察了它的水平,包括风湿性关节炎(RA)。IL-6以促炎和抗炎细胞因子发挥作用,由T细胞和巨噬细胞分泌刺激免疫反应。另外,IL-6象TNFa一样也许是介入胰岛素抵抗的另一种脂肪细胞分泌产物。IL-6是许多细胞分泌的细胞因子,包括脂肪细胞和脂肪基质细胞。IL-6的分泌在肥胖者的脂肪细胞是增加的,作为一种循环激素或胰岛素活动的局部调节剂也许有其重要性。IL-6涉及肥胖者胰岛素抵抗的发展。象TNF,IL-6抑制LPL表达,但是不同于TNF,IL-6不刺激脂肪分解。   A. 优点:   · 性价比高——高质量,低价格   · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量   · 特异性强——优选高度特异的针对人IL-6的配对抗体   · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   IL-6试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人IL-6抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-6抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品IL-6夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。IL-6的浓度与待测样品的颜色呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。   A. 优点:   · 性价比高——高质量,低价格   · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量   · 特异性强——优选高度特异的针对人IL-6的配对抗体   · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   IL-6试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人IL-6抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-6抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品IL-6夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。IL-6的浓度与待测样品的颜色呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。

  miRNAs是非编码的小RNA分子,调控着30%哺乳动物基因的表达,其中一些分子是干细胞特异的。miRNA表达的芯片分析方法显示干细胞上存在一组独特的miRNAs。美国Signosis公司开发了一系列miRNA微孔板检测试剂来分析这些分子。   A.优点:   美国Signosis基于其自有专利技术的miRNA微孔板检测试剂具有下列优点:   ·操作简单---做miRNA试验象做ELISA试验,无需用酶转换miRNA成cDNA,检测步骤只是孵育和洗涤。   ·灵敏度高---较miRNA Northern blotting分析敏感100倍。   ·分辨力强---在分辨同源miRNA 时,较Northern blot有更高的分辨力。   ·差别定量---二个或二个以上特定miRNA表达的差异可定量分析。   B.原理:   基于自有专利miRNA微孔板检测中,一个miRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接,一个连接oligo与捕获oligo和待测的miRNA部分杂交,另一个连接oligo与检测oligo和待测的miRNA另一部分杂交,杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固者在微孔板上,再由辣根酶标记链酶亲和素和发光底物检测,这种杂交体结构对miRNA分子序列非常敏感,一个核苷酸的差异即会阻止杂交体的形成,从而可分辨同源miRNA,而Northern blot则很难鉴别同源miRNA,此外该方法的敏感性较Northern blot高。

  IL-6最初被认为是B细胞分化因子,现在认为是多功能的细胞因子,可调控免疫反应、造血、急性相反应和炎症。IL-6由激活的T细胞、巨噬细胞、上皮细胞、成纤维细胞和成骨细胞产生。IL-6产生的失调意味着一些疾病过程的病理,如自身免疫性疾病和慢性炎症性增殖性疾病。因此监测这些细胞因子的表达是分析这些疾病潜在分子机制的常用方法。美国Signosis研发了一种多生物素信号放大技术(MBSA),该技术比基于单生物素检测的方法敏感1000倍。应用MBSA,美国Signosis研发了人IL-6 mRNA微孔板定量检测试剂,该试剂可直接定量测定细胞裂解液和总RNA中IL-6基因的表达。   A.优点:   美国Signosis mRNA微孔板定量检测试剂具有下列优势:   · 准确定量---IL-6 mRNA应用体外RNA中的IL-6做参比。   · 敏感性高---可测定低至500个分子,并具有较宽的线性范围。   · 操作简单---总RNA直接用于板杂交,勿需酶转换mRNA成cDNA,方法步骤是“孵育和洗涤”。   B. 原理:   在MBSA中,多生物素加到一个聚合物上,其序列有标示互补序列可与连接序列杂交,连接序列含有靶序列和标示序列。各连接序列的标示序列相同,但会有不同靶序列与靶基因不同区杂交,因此是在二个层级上放大---多个区和多个生物素。mRNA微孔板定量检测试剂应用了MBSA技术,靶mRNA通过捕获oligo捕获到微孔板上,捕获的mRNA分子与许多连接序列杂交,从而靶定mRNA的不同区,多生物素随后与连接序列杂交,捕获的生物素分子用链酶亲和素辣根酶结合物与发光底物检测。

  STAT3蛋白在发育、免疫系统和炎症中起着重要作用。STAT3激活时,从细胞质转运到细胞核,与STAT3反应因子结合,调控基因表达,包括细胞生长、分化、转化和凋亡。STAT3功能失调与许多疾病相关。STAT3持续激活的形式在许多细胞系中可以检测到。美国Signosis 公司研发的STAT3滤板法检测试剂用于检测STAT3的DNA结合活性,可同时分析多个标本。   A. 优点:   美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的STAT3滤板法检测试剂,具有下列优势:   · 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速   · 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析   · 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少   · 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析   B. 原理   美国Signosis 公司研发的STAT3滤板法检测试剂,是基于微孔板检测STAT3活性的分析方法,预标记STAT3的DNA结合序列与核抽体物混合,形成STAT3-DNA复合物。过滤板用于保留结合的STAT3探针,除去游离的DNA探针。结合的预标记的STAT3探针随后从过滤板上洗脱、收集,与相应孔的杂交板杂交。捕获的STAT3探针进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。

心脏病发作(或心肌梗塞)时,损伤的心脏组织释放心脏的酶如肌酸激酶(CK) 。 CK存在于心脏和骨骼肌以及肝脏和脑子。 CK-MB是仅存在心肌的CK亚型。 血液通常有低水平的CK-MB。 心肌受损时(如心脏病发作),CK-MB从受损的细胞漏出,引起血液水平的上升。 因而测定CK-MB增加时,可以诊断或证实近期心脏病的发作。急性心肌梗塞(AMI)后释放的CK-MB可早在症状起始的3-4个小时的血液中检测到,并且梗塞后大约65个小时维持高水平。据报道CK-MB水平在3小时后可诊断50%AMI,6小时后可诊断90%以上。在症状出现后6小时而没有诊断性心电图的急诊室患者,CK-MB的准确性在确证AMI是非常有用的。CK活性的测定主要用于诊断骨骼肌疾病,心肌梗塞,脑血管病,肌肉萎缩症,甲状腺机能不足,肺梗塞,以及监测病因和治疗。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对CK-MB的配对抗体 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 CK-MB试剂为固相酶免法。 方法采用抗CK-MB的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗CK-MB抗体做检测抗体, 待测样品中的CK-MB可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。CK-MB的浓度与待测样品的颜色呈深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。