环特生物，利用斑马鱼模型实验，为功能食品/保健食品企业提供产品功效评价、功能检测、毒理安全性评价、原料筛选验证及安全检测、微生物检测等服务，周期短、费用低、直观高效。助力企业做好研发、品控和推广。

食品/保健食品及原料 评价检测项目

功效评价检测

安全性评价-毒理评价检测

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环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

斑马鱼实验模型定制服务流程：

1、接受咨询，了解基本信息；

2、客户填写样品信息表；

3、提供报价单和项目建议书；

4、共同协商并签署合同；

5、寄送样品并支付首付款；

6、开展实验及时沟通；

7、完成实验提供电子版报告；

8、支付尾款；

9、寄送发票和纸质报告；

10、根据客户需要处理样品。

　　环特生物：斑马鱼生物科技，赋能大健康产业! 环特生物是全球的以“水中小白鼠”斑马鱼生物科技为核心的产品功效及安全性解决方案提供商，致力于通过活性成分筛选、功效及安全性评价，面向全球化妆品、保健食品、药品和食品企业提供产品和质控解决方案，持续创新斑马鱼技术，服务好大健康产业。

　　目前，环特生物已通过国家CNAS、CMA实验室认证及AAALAC国际认证，先后荣获德国纽伦堡国际发明金奖、国家高新技术企业、浙江省省级高新技术企业研究中心等荣誉，并与中国农科院质标所联合成立了“农业农村部农产品治疗标准研究中心生物评价实验室”。

　　公司技术研发团队由麻省理工学院博士后、国家万人计划李春启博士牵头作为全职首席科学家，多名海归、中科院、浙大、中国药科大学等国内高等院校毕业的博士和硕士生组成，技术顾问团队由中国中医科学院首席研究员、浙江大学教授等多位享受国务院特殊津贴和食品与大健康产业专家组成。

　　成立至今，公司累计完成项目超过5000个，建立长期合作的国内外企业、研发机构和高等院校超过200家。

【评价原理】

斑马鱼肾脏的肾小球具有与高等脊椎动物肾脏同样的细胞组成，同样的血液滤过、肾小管重吸收功能，一旦肾功能损伤或缺失，斑马鱼就会因无法调节渗透压而产生严重的水肿，同时可能导致肾小球滤过功能下降。

因此，我们可以用两种方法评价肾脏毒性：1. 肾性水肿发生率。由于斑马鱼通体透明，肾性水肿可以明显的被观察到。2. 肾小球滤过率。我们可以对斑马鱼注射一种荧光标记物，一段时间后，正常斑马鱼可将荧光标记物排出体外，而肾小球滤过功能损伤的斑马鱼则不能，通过荧光标记物排泄的情况可以反应斑马鱼肾脏的功能。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼表型进行观察评价，统计肾性水肿发生情况

【结果展示】

图1. 斑马鱼肾脏毒性表型图

可以看到，服用/注射供试品组的斑马鱼出现了明显的肾性水肿的表型。

图2. 斑马鱼肾小球滤过率典型图

可以看到，服用/注射供试品组的斑马鱼荧光强度明显强于正常对照组，标记物排泄明显减少，肾小球滤过率下降，肾脏功能受损。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼有明显的肾性水肿和肾小球滤过率明显下降，与正常对照组存在明显的差别。

2.本实验说明该供试品对斑马鱼有肾脏毒性。

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人源移植性肿瘤动物模型(PDX)已被广泛运用于肿瘤生长和转移机制研究，抗肿瘤药物筛选和新药评估等领域。近亲繁殖的同系小鼠和免疫缺陷型小鼠都是成熟的移植性肿瘤动物模型。 但小鼠PDX模型也存在不足，例如饲养成本高，组内样本数量少，实验周期长，肿瘤组织或肿瘤细胞用量大等；并且小鼠的皮毛阻碍了在体肿瘤细胞的成像与观察。

模式动物斑马鱼的优势：斑马鱼与人类基因同源性高达87%，其信号传导通路与人类基本近似；生殖能力强，生殖方式为体外受精，方便大量筛选；饲养成本低；个体小，幼鱼体长为1-2mm；透明，易于观察；遗传操作系统成熟，敲降，敲除，转基因技术都可实现。

斑马鱼在早期没有自体免疫，肿瘤异种移植的成功率高，且实验周期短，观察手段丰富，组内样本数量大。目前，斑马鱼肿瘤异种移植模型已经越来越多的被用于肿瘤发生、发展的机制研究以及抗肿瘤药物的筛选和评价。

案例一：Z-Avatar 胃癌斑马鱼PDX药敏检测案例

案例二：结肠癌细胞在zPDX模型中的增殖和转移能力变化

【评价原理】

正常人的皮肤颜色主要由黑色素决定，通常我们说的色斑、色沉也与黑色素有关。目前认可的黑色素形成途径主要为酪氨酸在酶催化下经过多巴氧化等过程，最终形成黑色素。由于斑马鱼拥有与人类相似的皮肤结构，黑色素的形成机理也与人类高度相似。而且斑马鱼的幼鱼身体透明，表皮的黑色素易于观察，因此可以用来观察产品的美白淡斑效果。

由于斑马鱼通体透明，斑马鱼的黑色素可以被明显地观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和美白淡斑产品组（美白淡斑产品熊果苷、曲酸等通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用一段时间美白淡斑产品后，我们对斑马鱼头部进行拍照，观察斑马鱼头部色素的变化情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼美白淡斑表型图

红色虚线区域为头部分析区域，区域内黑色部分为黑色素

可以看到，美白淡斑产品组的黑色素相比正常对照组明显减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用美白淡斑产品组的色素相比正常对照组明显减少。

2.本实验证实了熊果苷、曲酸美白产品具有美白淡斑功效。

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【评价原理】

静脉注射给予长春瑞滨造模斑马鱼免疫力低下模型。大剂量长春瑞滨骨髓抑制明显，导致血小板、红细胞及白细胞数目（中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞等）减少和贫血，最终导致免疫力低下人类与斑马鱼在免疫系统的细胞组成上极为相似，而且斑马鱼是目前所有同时具有特异性免疫和非特异性免疫动物个体中体积最小的，适合高通量评价调节免疫功效。斑马鱼静脉注射大剂量长春瑞滨后可造成免疫低下。

采用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，可在荧光显微镜在观察到免疫力低下的斑马鱼体内的中性粒细胞荧光强度明显减弱。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用免疫调节剂组。其中正常对照组未注射长春瑞滨，模型对照组与服用免疫调节剂组都注射了等量的长春瑞滨（长春瑞滨通过静脉注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用免疫调节剂组在注射长春瑞滨后摄入盐酸小檗胺等免疫调节剂。

服用一段时间免疫调节剂后，我们观察中性粒细胞荧光强度变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼中性粒细胞表型图

绿色荧光颗粒代表中性粒细胞

可以看到，免疫调节剂组中性粒细胞荧光强度与正常对照组相似，没有出现中性粒细胞荧光强度明显减弱的情况。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，免疫调节剂组中性粒细胞数量与正常对照组相似，并未出现模型对照组免疫力低下的情况。

2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。

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环特生物，利用斑马鱼模型实验，为药品企业提供药效评价、药物功效与安全性评价、毒性毒理实验、临床前研究、药物筛选、活性成分筛选等生物检测服务，周期短、费用低、高效专业。助力药品企业做好研发、品控和宣传推广。

药效评价-药物功效评价模型

药物安全性评价-毒性评价模型

药物评价-药物筛选-毒性实验检测项目

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环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²生物评价实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，已有7个新药项目成功将环特生物斑马鱼实验数据用于CFDA的临床试验申报，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

环特生物是中国首家斑马鱼生物技术研究开发企业，专注于药物与大健康产品研发及毒理学评价等领域的技术外包服务，是中国首家通过AAALAC国际认证的斑马鱼研发机构，也是国家高新技术企业和国家火炬计划企业，并通过了中国合格评定国家认可委员会（CNAS，China National Accreditation Service for Conformity Assessment）和中国计量认证/认可（CMA，China Metrology Accredidation）的认证，检验检测项目表如下。

CNAS是由国家认证认可监督管理委员会批准设立并授权的国家认可机构，主要负责认证机构、实验室和检查机构等相关机构的认可工作。中国合格评定国家认可委员会是国际认可论坛（IAF）、国际实验室认可合作组织（IL-AC）、亚太实验室认可合作组织（APLAC）和太平洋认可合作组织（PAC）的正式成员，获得CNAS认证的实验室，也得到上述国际组织认可。

CMA是对检测机构的检测能力及可靠性进行全面的认证及评价。认证对象为所有对社会出具公正数据的产品质量监督检验机构及其他各类实验室如各种产品质量监督检验站、环境检测站、疾病预防控制中心等等。

下图为CNAS检测项目表：

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环特斑马鱼技术，完美契合《化妆品功效宣称评价指导原则》新规要求——是您开展功效宣称备案检测的理想之选！

环特生物，利用斑马鱼模型实验，为化妆品企业提供化妆品功效宣称评价、人体功效评价、功效备案检测、毒理安全性评价、原料筛选验证、微生物检测等服务，周期短、费用低、直观高效。助力化妆品企业做好研发、品控和宣传推广。

化妆品功效评价（人体功效/斑马鱼评价）- 备案检测

化妆品安全性评价-毒理评价

化妆品及原料评价检测项目

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环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²化妆品功效实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

【评价原理】

花生四烯酸主要为AA在TXA2合成酶作用下生成TXA2，激活血小板，活化血小板通过GPⅡb／III a受体与纤维蛋白原交联在一起形成血栓。斑马鱼拥有凝血因子、血小板受体，并对临床应用的抗凝血和抗血栓药物具有很好的反应，适合于血栓形成机制和治疗药物的评价。

躯干出现血栓后，血流速度便会减慢，回心血量便会减少。经过红细胞特异性染色（呈红色），患有血小板聚集性血栓的斑马鱼心脏红细胞数量比正常斑马鱼明显减少。由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点，可以明显被观察到。患有血小板聚集性血栓的斑马鱼血流速度会明显比正常斑马鱼明显减慢，在血流分析仪下可以明显观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和抗血栓药物组。其中正常对照组未摄入花生四烯酸，模型对照组与服用/注射抗血栓药物组都摄入了等量的花生四烯酸（花生四烯酸通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。抗血栓药物组在摄入花生四烯酸的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通、血塞通之类的抗血栓药物。

服用一段时间抗血栓药物后，我们（1）对斑马鱼做红细胞特异性染色，观察心脏红细胞数量的变化；（2）观察血流速度的变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图

绿色虚线区域为心脏，心脏内红色为红细胞

可以看到，服用抗血栓药物组的心脏情况与模型对照组比较，红细胞数量明显增多。

图2. 斑马鱼血流速度

与模型对照组比较，*** p < 0.001

可以看到，服用抗血栓药物组的血流情况与模型对照组比较，血流速度明显加快。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗血栓药物组与模型对照组比较，心脏红细胞数量明显增加、血流速度明显加快。

2.本实验证实了阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通和血塞通具有显著的抗血栓作用。

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