【评价原理】

斑马鱼胚胎在母体外发育，从合子期到孵化期仅72小时，且发育的完整过程均是透明的，利于实时观察和检测。斑马鱼幼鱼长3~4毫米，拥有6-384孔板的高通量检测体系，可实现低费-高效筛选。斑马鱼与人类基因同源性达到87%，用于药物的体内快速评价实验结果可比性强。故可以利用斑马鱼早期各个阶段的发育形态，准确高效的确定药物暴露在胚胎中的毒性，广泛应用于药物的发育毒性与致畸性研究。

实验结束后，以各浓度组织器官反应及死亡情况的统计学分析结果评价药物对斑马鱼的毒性，并对典型毒性器官进行拍照。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和药物组。其中正常对照组未摄入待测药物，药物组按照既定浓度摄入了不同浓度的待测药物（待测药物通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

在药物暴露过程中，每天观察记录各个浓度组斑马鱼的死亡情况，并及时挑走死鱼。实验结束后，统计斑马鱼死亡情况并使用OriginPro 8软件拟合数据曲线，获得药物的最大非致死浓度（MNLC）和LC10。

在药物暴露一段时间后，我们在显微镜下观察记录斑马鱼身体各个指标的情况并对典型毒性器官进行拍照。

【结果展示】

图1. 斑马鱼发最大非致死浓度（MNLC）和LC10摸索数据拟合图

可以看到，该药物的MNLC为313 μg/mL，LC10为350 μg/mL。

图2. 斑马鱼发育毒性与致畸性表型图

H=Heart;J=Jaw;In=Intestinal tract;L=Liver;Y=Yolk sac;E=Eye

可以看到，药物组较正常对照组出现卵黄囊吸收延迟、心包水肿、体长变短、眼变小和肝变形。

【评价结论】

1.该药物的MNLC为313 μg/mL，LC10为350 μg/mL，诱发斑马鱼卵黄囊吸收延迟、心包水肿、体长变短、眼变小和肝变形。

2.本实验证实了该药物对斑马鱼有发育毒性与致畸性风险。

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【评价原理】

糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病，其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物，斑马鱼食欲调节（如血清素）和胰岛素调节功能与人类相似，斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统（包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌）的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象，用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖，模拟人的二型糖尿病。

用血糖仪对高糖高脂斑马鱼进行血糖检测。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料，模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料（高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入蜂胶软胶囊、苦瓜素胶囊、苦瓜洋参软胶囊之类的降糖产品。

服用一段时间降糖产品后，我们对斑马鱼进行血糖检测。

【结果展示】

图1. 斑马鱼体内葡萄糖水平

与模型对照组比较，*** p < 0.001

可以看到，模型对照组的血糖值较正常对照组明显增高，而降糖产品组血糖值明显下降。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，降糖产品组斑马鱼血糖值与模型对照组比较血糖明显下降。

2.本实验证实了蜂胶软胶囊、苦瓜素胶囊、苦瓜洋参软胶囊之类的降糖产品具有降糖作用。

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紫外线是导致皮肤损伤或病变的重要因素，未进行防晒的皮肤暴露在紫外线下可能出现皮炎、红斑、黑色素增多等现象，类似的，斑马鱼的尾鳍受紫外线照射后将出现尾鳍褶皱，面积缩小等现象，使用化妆品后，通过定量评价斑马鱼尾鳍面积的复苏情况评价其抗光老化功效。

【评价原理】

通过紫外光照射使斑马鱼尾鳍形成损伤，添加化妆品后，采用拍照方式对斑马鱼尾鳍进行图像采集，分析斑马鱼尾鳍损伤程度并判定抗光老化功效。

【实验方案】

我们将斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组、化妆品组。正常对照组不做处理，模型对照组和化妆品组分别进行紫外光多次照射，随后化妆品组中定量加入受试化妆品，孵育一段时间后，三组斑马鱼分别进行尾鳍拍照处理，分析斑马鱼尾鳍面积，从而评价抗光老化功效。

【结果展示】

图1. 斑马鱼尾鳍损伤面积表型图（红色为分析区域）

【评价结论】

1.经过各组斑马鱼对比实验，与模型对照组尾鳍面积相比，化妆品组具有明显

改善作用。

2.本实验证实了该化妆品具有抗光老化的作用。

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类器官作为新兴的生物学模型，其具有细胞系和动物模型所不具有的独特优势，其细胞组成和结构更加类似人体组织，可提供一个高度生理相关的系统，是基础研究的绝佳模型。通过基于肿瘤类器官药敏的筛查，鉴别出有临床反应的患者具有极高的敏感性和特异性，综合结果表明肿瘤类器官药敏在预测肿瘤治疗效果方面，具有较高的应用价值。

斑马鱼PDX模型可为病人能提供即时的、精准化的治疗方案指导，为肿瘤的个性化治疗提供了一个非常理想的体内测试和诊断模型。将斑马鱼PDX模型广泛服务于肿瘤患者并提供个体化用药指导，会显著提高患者肿瘤化疗精准性，提高患者的生活质量，使患者获益。

依托类器官和斑马鱼两大技术平台， 环特生物构建起一套具备鲜明特色的“体外（类器官模型）+体内（斑马鱼PDX模型）” 模式的肿瘤精准医疗整体解决方案。

类器官 + 斑马鱼PDX，喜迎双“旦”  放肆打“价”！

活动对象：医院肿瘤科医生

活动时间：2022年12月24日-1月13日

特惠1：满五 6.4折

凡购买我司类器官科研服务或肿瘤个性化药敏检测中任一项，即可享受8折优惠！

当肿瘤样本数量≥5个时，即可再享受折上8折优惠！

类器官科研服务（下图）

特惠2：周边7折购

类器官基质胶、辅助试剂盒、生长因子和小分子等所有周边产品，一律7折！

基质胶及其他辅助类试剂盒（下图）

类器官相关生长因子（下图）

类器官相关小分子（下图）

特惠3：预存得豪礼

1. 预存5万抵6万元项目经费

2. 预存10万抵13万元项目经费

3. 预存20万抵28万元项目经费

4. 预存40万抵60万元项目经费

备注：特惠1和特惠3，不可叠加。

项目服务详情，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）。

【评价原理】

便秘的主要表现是排便次数减少和排便困难。斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物，它的肠道组成与人类相似，具有内皮细胞、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。硫酸铝能减少肠道蠕动，诱发斑马鱼便秘。

经过喂食不被肠道吸收的特异性荧光材料，可以明显的观察到被便秘斑马鱼肠道蠕动减慢，肠道内的荧光强度明显比正常斑马鱼亮。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用通便剂组。服用通便剂组提前服用一段时间吗丁啉、派立清口服液和慈素粉之类的通便剂后，正常对照组、模型对照组与服用通便剂组都摄入了等量荧光材料。荧光材料摄入后，正常对照组不做任何处理，模型对照组和服用通便剂组都摄入了等量硫酸铝（荧光材料和硫酸铝通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用一段时间通便剂后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肠道荧光强度。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肠道荧光强度表型图

可以看到，服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。

2.本实验证实了吗丁啉、派立清口服液和慈素粉等具有明显通便功效。

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斑马鱼专用成像系统，是一款为斑马鱼定制的软硬件系统，其中包括前端的流式限位功能、光学成像模块与斑马鱼分析软件。可用于斑马鱼荧光和白光图像采集、图像分析，适用于所有3-7天的斑马鱼幼鱼实验终点活体成像，可自动将斑马鱼部位微观图像拼接合成为宏观整鱼图像。

产品参数（示例）：

【评价原理】

脑出血是指非外伤性脑实质内部血管破裂引发的脑内出血病症，占全部脑卒中的20%～30%，急性期病死率为30%～40%。羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 ( HMGCR) 是他汀类药物发挥抑制作用的直接作用点, HMGCR功能被抑制会影响血管的完整性和稳定性，诱发脑出血。由于斑马鱼大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征，血管与神经系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上。在大量摄入辛伐他汀后，斑马鱼脑部也会出现脑出血的情况，患有脑出血的斑马鱼的脑部会出现明显的片状出血，而正常斑马鱼没有；由于脑出血斑马鱼的心搏输出量和血流速度也会降低，利用血流分析仪可明显观察到。脑出血可直接造成反应迟钝、运动功能障碍，可通过行为分析软件观察斑马鱼的行为轨迹。

我们评价斑马鱼脑出血有4个指标：1.脑出血发生率；2.心搏输出量；3. 血流速度；4. 行为学（运动改善）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用脑血管保护剂组。其中正常对照组未摄入辛伐他汀，模型对照组与服用脑血管保护剂组都摄入了等量的辛伐他汀（辛伐他汀通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用脑血管保护剂组在摄入辛伐他汀的同时摄入淫羊藿苷之类的脑血管保护剂。

服用脑血管保护剂一段时间后，我们对斑马鱼脑部出血、心搏输出、血流速度和行为学（运动改善）情况进行观察。

【结果展示】

图1. 斑马鱼脑出血表型图

黄色虚线区域为脑出血区域

可以看到，服用脑血管保护剂组的斑马鱼头部情况与正常对照组比较相似，没有明显的脑出血现象。

图2. 斑马鱼心搏输出量

与模型对照组比较，*** p< 0.001

可以看到，服用脑血管保护剂组的斑马鱼心搏输出量与模型对照组比较明显增加。

图3. 斑马鱼血流速度

与模型对照组比较，*** p< 0.001

可以看到，服用脑血管保护剂组的斑马鱼血流速度与模型对照组比较明显增加。

图4 .斑马鱼运动轨迹图

（黑线：斑马鱼慢速运动轨迹；绿线：中速运动；红线：快速运动）

可以看到，模型对照组斑马鱼总运动距离较正常对照组明显减少，而服用脑血管保护剂组斑马鱼运动功能得到明显改善。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用脑血管保护剂组的斑马鱼脑部情况与未摄入辛伐他汀的正常对照组相似，并未出现模型对照组明显的脑出血的情况；服用脑血管保护剂组的与模型对照组比较，心搏输出量明显增多、血流速度明显加快、运动功能得到明显改善。

2.本实验证实了淫羊藿苷具有显著的防治脑出血作用。

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【评价原理】

近年来，随着工业化的发展，空气污染越来越严重，雾霾天也越来越多，对人的侵害也越来越严重。二氧化硫、氮氧化物、可吸入颗粒物（PM10）和细颗粒物（PM2.5）是雾霾的主要组成成分。研究表明，进入斑马鱼和大鼠体内的纳米活性炭颗粒能通过肠道的杯状细胞分泌而排泄，这一新颖的纳米排泄途径被命名为肠杯状细胞分泌通路（IGCSP)。用红色荧光微球模拟PM2.5微粒，激活斑马鱼炎症机制，引起其体内吞噬细胞的吞噬作用肠道分泌得以将异物排除。

根据体内荧光微球的数量（呈红色），抗雾霾剂组斑马鱼体内微球数量明显减少。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和抗雾霾剂组。其中模型对照组与服用抗雾霾剂组都给予了等量的荧光微球（荧光微球通过注射方式到斑马鱼体内）。抗雾霾剂组在注射荧光微球的同时摄入冬虫夏草之类的抗雾霾剂。

服用一段时间抗雾霾剂后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼体内荧光微球数量的变化来反映机体清除PM2.5的能力。

【结果展示】

图1. 斑马鱼抗雾霾表型图

红色点为荧光微球

可以看到，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。

2.本实验证实了冬虫夏草具有抗雾霾功效。

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过敏反应通常会引起许多皮肤症状，比如皮肤发红、发痒，严重的患者还会出现刺痛或者面部出现红斑、风团、丘疹或丘疱疹等症状。敏感性肌肤的人群选用化妆品时，需要特别关注化妆品的致敏性。通过斑马鱼技术可以有效评价化妆品及其原料的致敏性。

【评价原理】

过敏反应的主要原因是过敏原/致敏因子诱导组织学上肥大细胞脱颗粒，释放多种活性介质进而诱发各种过敏症状。其中类胰蛋白酶是肥大细胞内预先合成的中性蛋白酶，是临床上检验人体是否过敏的重要指标。斑马鱼产生过敏反应时，同样会诱导肥大细胞分泌类胰蛋白酶。因此，通过检测斑马鱼整体类胰蛋白酶水平可以判断化妆品及其原料的致敏性。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成若干组组，包含正常对照组和化妆品组。其中正常对照组未加入化妆品，化妆品组分别加入不同剂量（化妆品通过溶解到标准稀释水中的方式添加到实验体系中）的样品。

处理24 h后，利用酶标仪检测各组吸光度值（OD值），以类胰蛋白酶的表达水平评价化妆品致敏作用。

此外，可以通过斑马鱼病理切片，用PAS染色后观察肠道壁上肥大细胞的状况反映化妆品的致敏性。

【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）

图1. 斑马鱼类胰蛋白酶含量（吸光度值）

与正常对照组比较，*p < 0.05，***p < 0.001

可以看到，化妆品中剂量和高剂量组类胰蛋白酶含量与正常对照组比较明显升高，具有致敏性，低剂量组无致敏性。

图2. 斑马鱼体内肥大细胞染色典型图（箭头指示为肥大细胞）

从经过PAS染色的病理切片中也能看出来，化妆品组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量明显增加。

【评价结论】

1.经过各组斑马鱼的对比实验，化妆品中、高剂量组斑马鱼类胰蛋白酶含量和肠道壁上的肥大细胞数量与正常对照组相比数量明显增加。

2.本实验证实了该化妆品具有明显的致敏作用。

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【评价原理】

糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病，其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。高血脂患者由于血液中胆固醇、油脂含量过多，就会使过多油脂沉积于血管壁上，容易使动脉管壁增厚、变硬、失去弹性，导致动脉硬化。斑马鱼食欲调节（如血清素）和胰岛素调节功能与人类相似，斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统（包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌）的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖脂负荷状态下表现出持续高血糖、高血脂现象，用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖，模拟人的二型糖尿病。

用转基因绿色血管荧光斑马鱼（呈绿色），患有高糖高脂的斑马鱼眼部血管壁厚度较正常斑马鱼明显增厚，在共聚焦显微镜下可以观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和降糖降脂产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料，模型对照组与服用降糖降脂产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料（高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。降糖降脂产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖降脂产品。

服用一段时间降糖降脂产品后，我们用共聚焦显微镜下观察斑马鱼眼部血管壁厚度。

【结果展示】

图1. 斑马鱼眼部血管壁厚度

白色箭头所指为血管壁

可以看到，模型对照组的眼部血管壁厚度较正常对照组明显增厚，而降糖降脂产品组斑马鱼眼部血管壁厚度与正常对照组相近。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，降糖降脂产品组斑马鱼眼部血管壁厚度与正常对照组相近，并未出现模型对照组眼部血管壁增厚的情况。

2.本实验证实了松花蛹虫草具有眼部血管壁厚度增厚改善功效。

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