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杭州环特生物科技股份有限公司

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【评价原理】与人类相似,中性粒细胞在斑马鱼体内发挥固有免疫作用,且是体内数量最多的白细胞在炎症反应起始阶段有一系列事件发生,如血管舒张、毛细血管网的通透性增强、炎性介导释放等。化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症,炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。刺激物进入斑马鱼体内,诱导炎症反应,中性粒细胞发生免疫应答,向皮肤表皮迁移并聚集。采用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,可在荧光显微镜在观察到皮肤受刺激的斑马鱼皮肤上的中性粒细胞明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。皮肤吸收供试品一段时间后,我们在显微镜下观察斑马鱼皮肤上中性粒细胞数量(头部、心脏和血管中的中性粒细胞除外)。【结果展示】图1. 斑马鱼皮肤刺激性表型图绿色光点为中性粒细胞,绿色荧光越多,中性粒细胞越多,皮肤刺激性越强可以看到,供试品组斑马鱼皮肤上中性粒细胞数量明显增加。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,摄入供试品组的斑马鱼皮肤上中性粒细胞明显增多,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该十二烷基磺酸钠(SLS)和甲基异噻唑啉酮对斑马鱼有皮肤刺激性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼皮肤结构与功能与人类高度相似,斑马鱼皮肤含有基底层、棘层、颗粒层、透明层和表皮角质细胞层;另外尚有与人皮肤结构相同的固有层、半桥粒、黑色素细胞、血管和皮下脂肪细胞等。斑马鱼皮肤间质结缔组织、胶原及其临近的纤维母细胞及皮肤基因表达亦与人类皮肤相似。我们评价斑马鱼皮肤肌肉毒性有4个指标:1.皮肤刺激;2.肌肉纹理;3.皮肤凋亡细胞定量;4.皮肤色素变化。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内)。皮肤吸收供试品一段时间后,我们通过中性粒转基因荧光斑马鱼,观察皮肤/肌肉刺激性;通过表型拍照,观察肌肉纹理及皮肤色素变化;通过AO染色凋亡细胞,观察皮肤细胞凋亡情况。【结果展示】图1. 斑马鱼皮肤刺激性典型图片可以看到,供试品组皮肤/肌肉可见明显中性粒细胞聚集。图2. 斑马鱼皮肤损伤典型图片可以看到,供试品组可见明显肌肉纹理不清晰。图3. 斑马鱼凋亡细胞表型图可以看到,供试品组尾部可见明显凋亡(绿色荧光亮点)。图4. 斑马鱼皮肤色素异常表型图可以看到,供试品组躯干可见明显色素异常(黄色虚线区域)。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,供试品组的斑马鱼皮肤肌肉产生明显的毒性表型(包括肌肉纹理异常和色素异常),在斑马鱼尾部可见明显的凋亡细胞,在躯干部可见明显的中性粒细胞聚集。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有皮肤肌肉毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼皮肤结构与功能与人类高度相似,斑马鱼皮肤含有基底层、棘层、颗粒层、透明层和表皮角质细胞层;另外尚有与人皮肤结构相同的固有层、半桥粒、黑色素细胞、血管和皮下脂肪细胞等。斑马鱼皮肤间质结缔组织、胶原及其临近的纤维母细胞及皮肤基因表达亦与人类皮肤相似。我们评价斑马鱼皮肤肌肉毒性有4个指标:1.皮肤刺激;2.肌肉纹理;3.皮肤凋亡细胞定量;4.皮肤色素变化。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内)。皮肤吸收供试品一段时间后,我们通过中性粒转基因荧光斑马鱼,观察皮肤/肌肉刺激性;通过表型拍照,观察肌肉纹理及皮肤色素变化;通过AO染色凋亡细胞,观察皮肤细胞凋亡情况。【结果展示】图1. 斑马鱼皮肤刺激性典型图片可以看到,供试品组皮肤/肌肉可见明显中性粒细胞聚集。图2. 斑马鱼皮肤损伤典型图片可以看到,供试品组可见明显肌肉纹理不清晰。图3. 斑马鱼凋亡细胞表型图可以看到,供试品组尾部可见明显凋亡(绿色荧光亮点)。图4. 斑马鱼皮肤色素异常表型图可以看到,供试品组躯干可见明显色素异常(黄色虚线区域)。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,供试品组的斑马鱼皮肤肌肉产生明显的毒性表型(包括肌肉纹理异常和色素异常),在斑马鱼尾部可见明显的凋亡细胞,在躯干部可见明显的中性粒细胞聚集。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有皮肤肌肉毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼胚胎视力发育迅速,受精后发育4天的幼鱼就已经依赖视觉线索进行捕食和躲避行为。斑马鱼不仅在角膜、晶状体、脉络膜、视网膜以及血管化和神经支配等结构上和人类的眼睛有明显的相似性,而且还有保守的基因表达、细胞构成和组织结构,因此为研究食品及保健品的眼部毒性提供了一个极好的模型。我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标:1.眼睛大小;2.眼部细胞凋亡;3.眼部血管面积;4.眼部病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组,供试品组(保健食品通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间眼保护剂后,我们在解剖显微镜下观察眼睛大小;整体做凋亡细胞特异性染色,观察眼部细胞凋亡;通过荧光显微镜观察眼部血管面积,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼眼睛表型图箭头指示区域为眼可以看到,保健食品组眼睛相较于正常对照组明显减小。图2. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞可以看到,保健食品组的凋亡细胞较正常对照组明显增多。图3. 斑马鱼眼部血管面积黄色虚线标记血管面积可以看到,保健食品组眼睛血管面积相较于正常对照组明显增加。图4. 眼部凋亡细胞病理切片可以看到,保健食品组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异于正常对照组。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,保健食品组斑马鱼眼睛明显变小,凋亡细胞明显增多,眼部血管面积明显增多,在病理切片中出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异常。2.本实验证实了保健食品的眼毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼胚胎视力发育迅速,受精后发育4天的幼鱼就已经依赖视觉线索进行捕食和躲避行为。斑马鱼不仅在角膜、晶状体、脉络膜、视网膜以及血管化和神经支配等结构上和人类的眼睛有明显的相似性,而且还有保守的基因表达、细胞构成和组织结构,因此为研究药物眼部毒性提供了一个极好的模型。我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标:1.眼睛大小;2.眼部细胞凋亡;3.眼部血管面积;4.眼部病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组,供试品组(药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间眼保护剂后,我们在解剖显微镜下观察眼睛大小;整体做凋亡细胞特异性染色,观察眼部细胞凋亡;通过荧光显微镜观察眼部血管面积,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼眼睛表型图箭头指示区域为眼可以看到,药物组眼睛相较于正常对照组明显减小。图2. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞可以看到,药物组的凋亡细胞较正常对照组明显增多。图3. 斑马鱼眼部血管面积黄色虚线标记血管面积可以看到,药物组眼睛血管面积相较于正常对照组明显增加。图4. 眼部凋亡细胞病理切片可以看到,药物组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异于正常对照组。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,药物组斑马鱼眼睛明显变小,凋亡细胞明显增多,眼部血管面积明显增多,在病理切片中出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异常。2.本实验证实了药物的眼毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】神经毒性通常指某些药物影响机体的神经传导,导致神经传导中断或减弱,从而影响机体的正常功能。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,神经系统形成过程和发育机制与人类高度相似,在6 hpf(受精后6小时)神经系统开始发育,受精6天后所有神经系统发育完成。斑马鱼在短时间内形成整个神经系统,为神经毒性的评价带来了有利的条件。而且斑马鱼对药物神经毒性的预测准确性高,同时兼具快速、高效、经济的优点。我们评价斑马鱼神经毒性有3个指标:1.行为学;2.中枢神经凋亡细胞荧光信号强度;3. 外周运动神经长度。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/注射供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用/注射药物一段时间后,我们观察斑马鱼的运动行为,通过荧光染色观察中枢神经凋亡细胞,也可以利用转基因运动神经绿色荧光NBT品系斑马鱼观察外周运动神经长度。【结果展示】图1. 斑马鱼神经毒性运动轨迹图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼运动明显减少。图2. 斑马鱼光暗刺激下每分钟运动速度表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼对光暗刺激不敏感。图3. 斑马鱼中枢神经凋亡细胞表型图黄色虚线框内为中枢神经分析区域,绿色荧光小点为凋亡细胞可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼中枢神经细胞凋亡明显增加。图4. 斑马鱼外周运动神经表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼外周运动神经明显缩短。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼运动明显减少且对光暗刺激不敏感,中枢神经细胞凋亡增加且外周运动神经缩短,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有神经毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】神经毒性通常指某些药物影响机体的神经传导,导致神经传导中断或减弱,从而影响机体的正常功能。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,神经系统形成过程和发育机制与人类高度相似,在6 hpf(受精后6小时)神经系统开始发育,受精6天后所有神经系统发育完成。斑马鱼在短时间内形成整个神经系统,为神经毒性的评价带来了有利的条件。而且斑马鱼对药物神经毒性的预测准确性高,同时兼具快速、高效、经济的优点。我们评价斑马鱼神经毒性有3个指标:1.行为学;2.中枢神经凋亡细胞荧光信号强度;3. 外周运动神经长度。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/注射供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用/注射药物一段时间后,我们观察斑马鱼的运动行为,通过荧光染色观察中枢神经凋亡细胞,也可以利用转基因运动神经绿色荧光NBT品系斑马鱼观察外周运动神经长度。【结果展示】图1. 斑马鱼神经毒性运动轨迹图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼运动明显减少。图2. 斑马鱼光暗刺激下每分钟运动速度表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼对光暗刺激不敏感。图3. 斑马鱼中枢神经凋亡细胞表型图黄色虚线框内为中枢神经分析区域,绿色荧光小点为凋亡细胞可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼中枢神经细胞凋亡明显增加。图4. 斑马鱼外周运动神经表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼外周运动神经明显缩短。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼运动明显减少且对光暗刺激不敏感,中枢神经细胞凋亡增加且外周运动神经缩短,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有神经毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用转基因运动神经荧光斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼运动神经细胞损伤、荧光强度减弱,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经荧光强度。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经荧光强度白色箭头代表运动神经可以看到,模型对照组周围运动神经荧光强度较正常对照组明显减弱,而降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度明显增强。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度与模型对照组比较明显增强。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的产品具有神经保护作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用转基因运动神经荧光斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼运动神经细胞损伤、荧光强度减弱,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经荧光强度。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经荧光强度白色箭头代表运动神经可以看到,模型对照组周围运动神经荧光强度较正常对照组明显减弱,而降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度明显增强。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度与模型对照组比较明显增强。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的产品具有神经保护作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用中性粒细胞荧光与运动神经荧光杂交品系斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目增多,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目黄色框线内绿色荧光点代表中性粒细胞可以看到,模型对照组的周围运动神经中性粒细胞数目较正常对照组明显增多,而降糖产品组斑马鱼明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的降糖产品具有神经炎症消退功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用中性粒细胞荧光与运动神经荧光杂交品系斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目增多,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目黄色框线内绿色荧光点代表中性粒细胞可以看到,模型对照组的周围运动神经中性粒细胞数目较正常对照组明显增多,而降糖产品组斑马鱼明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的降糖产品具有神经炎症消退功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的鳔从器官进化、组织结构以及生物学等多个层面都类似于哺乳动物的肺泡。细菌性肺炎:注射给予LPS建立斑马鱼细菌性肺炎模型。LPS是脂质和多糖的复合物,来源于革兰氏阴性菌细胞壁的外膜,是内毒素的主要成分。接触一定量的LPS会引起机体支气管炎、肺炎、肝炎及脂多糖血症。通过使用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼和转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,在荧光显微镜下可以直接观察斑马鱼中性粒细胞和巨噬细胞,并分时间点视频记录巨噬细胞和中性粒细胞溢出血管情况,使用实时荧光定量PCR仪可获得基因表达水平,通过制作组织病理切片观察斑马鱼鱼鳔部位的病理结构变化。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中,模型对照组与抗炎药组都注射了等量的LPS建立细菌性肺炎模型。抗炎药组在注射了LPS的同时摄入吲哚美辛之类的抗肺炎抗炎药。服用一段时间抗肺炎抗炎药后,我们在荧光显微镜下拍摄斑马鱼中性粒细胞和巨噬细胞的数量,并分时间点视频记录巨噬细胞和中性粒细胞溢出血管情况,用实时荧光定量PCR仪检测TNF-α、IL-1β值,同时制作成病理切片观察鱼鳔部位的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼中性粒表型图黄色虚线区域为鱼鳔,绿色荧光颗粒为中性粒细胞可以看到,抗炎药组斑马鱼鱼鳔位置处的中性粒细胞聚集情况明显改善。图2. 斑马鱼巨噬细胞表型图黄色虚线区域为鱼鳔,绿色荧光为巨噬细胞可以看到,抗炎药组斑马鱼鱼鳔位置处的巨噬细胞聚集情况明显改善。图3. TNF-α基因表达水平与模型对照组比较,*p < 0.05可以看到,抗炎药组能显著抑制斑马鱼的炎症基因TNF-α表达水平。图4. IL-1β基因表达水平与模型对照组比较,**p < 0.01可以看到,抗炎药组能显著抑制斑马鱼的炎症基因IL-1β表达水平。图4. 鱼鳔部位病理切片从病理切片中能看出来,抗炎药组斑马鱼鱼鳔病理结构与正常对照组相似,未出现模型对照组渗入的炎性细胞明显增多的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,抗炎药组能显著抑制中性粒细胞和巨噬细胞的聚集,能显著抑制炎症基因表达水平,能改善炎性浸润情况。2.本实验证实了吲哚美辛具有显著的细菌性肺炎防治作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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化妆品中的功效活性成分是通过经皮吸收到达皮肤各层而发挥作用的,许多在体外试验中表现良好的活性物质在消费者实际使用过程中并未达到理想的功效结果,这与活性物的经皮吸收性能密切相关。斑马鱼的皮肤结构与人体高度相似,因此活性成分在活体斑马鱼上的经皮吸收结果可以反映在人体皮肤上的吸收状况。【评价原理】    通过高效液相色谱法定量检测养鱼用水在孵育斑马鱼一段时间后的活性成分含量变化反映活性成分经斑马鱼的皮肤吸收状况,含量的减少量即为斑马鱼的经皮吸收量。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为三组,分别为正常对照组(不含活性物)、活性物对照组(不含鱼)和受试物组。在相同的温、湿度条件下孵育一段时间,在孵育前后分别检测各组中活性成分的含量。【结果展示】图1. 活性成分在不同组别中的色谱图可以看到,受试物组的斑马鱼养鱼用水中的活性成分,在孵育后发生减少,减少量即为经皮吸收量。【评价结论】1、正常对照组的鱼水中未检测到活性成分,说明该方法不存在基体干扰;2、活性物对照组孵育前后活性物含量无明显变化,说明在没有斑马鱼存在的孵育条件下活性物含量不发生变化;3、受试物组,孵育后活性物含量明显低于孵育前,说明活性成分被经皮吸收至斑马鱼体内,经皮吸收量即为鱼水中的减少量。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼消化道的解剖结构和细胞结构与人类消化道相似,具有同心圆层的内上皮、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。三硝基苯磺酸(TNBS)的乙醇溶液造模法属于正常免疫系统下的半抗原诱导性模型,当TNBS的乙醇溶液灌肠时,乙醇作为有机溶剂溶解肠粘膜表面的黏液,暂时性破坏肠粘膜屏障,使TNBS和肠组织蛋白结合形成完全抗原,导致肠黏膜免疫系统针对该抗原的迟发性变态反应,并造成肠黏膜的损伤。杯状细胞是黏蛋白的主要来源,其数量和形态反应肠粘膜的健康状况,是肠粘膜异常的敏感指标。由于斑马鱼通体透明的特点,有两种方法检测结肠炎的防治作用。1.观察肠腔面积的变化,2. 通过特异性染料(呈蓝色)对肠道的杯状细胞染色,通过观察杯状细胞数量来判断肠粘膜的损伤情况。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和抗结肠炎药物组。其中正常对照组未摄入TNBS,模型对照组与抗结肠炎药物组都加入了等量的TNBS(TNBS通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。抗结肠炎药物组在摄入TNBS的同时摄入泼尼松之类抗结肠炎药物。服用一段时间抗结肠炎药物组后,我们观察斑马鱼的肠腔面积变化、杯状细胞数量。【结果展示】图1. 斑马鱼肠腔面积表型图绿色虚线区域为斑马鱼肠腔可以看到,服用抗结肠炎药物的肠腔面积与未加TNBS的正常对照组比较相似,没有明显的肠腔面积扩大。图2. 斑马鱼肠道杯状细胞表图红色框线区域内蓝色颗粒为杯状细胞可以看到,服用抗结肠炎药物的肠道杯状细胞数量与未加TNBS的正常对照组比较相似,没有像模型组明显的杯状细胞减少情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗结肠炎药物的肠腔面积和杯状细胞数量与未加入TNBS的正常对照组相似,并未出现模型对照组的肠腔变大和杯状细胞减少的情况。2.本实验证实了泼尼松具有结肠炎的防治作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】体力疲劳常表现为肌肉出现僵硬、肿胀和疼痛,动作慢、不协调;反应迟钝,判断错误,注意力不集中等。斑马鱼大部分器官的作用机理与人类高度相似,而且斑马鱼生长发育周期短,器官发育较快,有利于开展缓解体力疲劳功效的研究。亚硫酸钠通过化学反应消耗水中的氧气,造成水中斑马鱼缺氧,经过一段时间诱发缺氧性疲劳。斑马鱼在氧气不足的情况下,机体自发活动将会减弱,同时,肌肉贮备糖原无氧酵解生成乳酸,乳酸堆积可使局部H+浓度升高,过量H+直接作用于肌原纤维,抑制肌动蛋白和肌球蛋白的结合,导致肌肉收缩能力下降,机体运动能力减弱。疲劳斑马鱼运动距离下降、乳酸堆积、氧自由基(ROS)上升、ATP酶含量降低。我们评价疲劳有4个指标:(1)行为分析仪检测斑马鱼总运动距离;(2)酶标仪检测乳酸含量;(3)酶标仪检测ROS水平;(4)酶标仪检测ATP含量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗疲劳剂组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组和服用抗疲劳剂摄入等量的亚硫酸钠以诱发斑马鱼疲劳模型(亚硫酸钠通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用抗疲劳剂组摄入亚硫酸钠的同时摄入中华跌打丸、红牛和脉动饮料之类的抗疲劳剂。服用一段时间抗疲劳剂后,我们检测斑马鱼的总运动距离、乳酸含量、ROS水平和ATP含量。【结果展示】图1. 斑马鱼运动轨迹图黑线:斑马鱼静止运动轨迹;绿线:中速运动;红线:快速运动可以看到,服用抗疲劳剂组的斑马鱼运动情况与正常对照组比较相似,没有明显的总运动距离减少。图2. 斑马鱼乳酸含量与模型对照组比较,*p<0.05可以看到,服用抗疲劳剂组的斑马鱼乳酸含量比模型对照组明显降低。图3. 斑马鱼ROS水平与模型对照组比较,***p<0.001可以看到,服用抗疲劳剂组的斑马鱼ROS水平比模型对照组明显降低。图4. 斑马鱼ATP含量与模型对照组比较,***p<0.001可以看到,服用抗疲劳剂组的斑马鱼ATP含量比模型对照组明显升高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗疲劳剂组与模型对照组比较,总运动距离明显增加、乳酸明显减少、ROS水平明显降低、ATP含量明显升高。2.本实验证实了中华跌打丸、红牛和脉动饮料等具有明显缓解体力疲劳功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】正常人的皮肤颜色主要由黑色素决定,通常我们说的色斑、色沉也与黑色素有关。目前认可的黑色素形成途径主要为酪氨酸在酶催化下经过多巴氧化等过程,最终形成黑色素。由于斑马鱼拥有与人类相似的皮肤结构,黑色素的形成机理也与人类高度相似。而且斑马鱼的幼鱼身体透明,表皮的黑色素易于观察,因此可以用来观察产品的美白淡斑效果。由于斑马鱼通体透明,斑马鱼的黑色素可以被明显地观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和美白淡斑产品组(美白淡斑产品熊果苷、曲酸等通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间美白淡斑产品后,我们对斑马鱼头部进行拍照,观察斑马鱼头部色素的变化情况。【结果展示】图1. 斑马鱼美白淡斑表型图红色虚线区域为头部分析区域,区域内黑色部分为黑色素可以看到,美白淡斑产品组的黑色素相比正常对照组明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用美白淡斑产品组的色素相比正常对照组明显减少。2.本实验证实了熊果苷、曲酸美白产品具有美白淡斑功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】缺氧可能导致心血管系统、呼吸系统、神经系统、消化系统等等一系列危害身体的疾病。斑马鱼心血管系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上,近年来斑马鱼广泛地被用于心血管疾病研究领域。因此,斑马鱼适用于评价耐缺氧功效。钴离子作用细胞后,可直接取代类血红素中的铁离子,使类血红素不能和氧结合而保持脱氧状态,从而模拟缺氧。经过行为分析仪检测,缺氧的斑马鱼的总运动距离会明显比正常斑马鱼明显减少;经过凋亡细胞特异性荧光染色(呈绿色),斑马鱼脑部细胞凋亡可以被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用耐缺氧剂组。其中正常对照组未服用氯化钴,模型对照组与服用耐缺氧剂组都摄入了等量的氯化钴(氯化钴通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用耐缺氧剂组在摄入氯化钴之前摄入红景天苷之类的耐缺氧剂。服用耐缺氧剂一段时间后,我们对斑马鱼进行行为分析,分析其总运动距离;同时对斑马鱼进行凋亡细胞染色,观察脑细胞凋亡情况。【结果展示】图1. 斑马鱼运动轨迹图黑线:斑马鱼静止运动轨迹;绿线:中速运动;红线:快速运动可以看到,服用耐缺氧剂组的总运动距离与未服用氯化钴的正常对照组比较相似,没有明显的运动减少。图2. 缺氧导致的脑细胞凋亡表型图计算黄色区域内的凋亡细胞可以看到,服用耐缺氧剂组的脑部细胞与未服用氯化钴的正常对照组比较相似,没有明显的凋亡细胞。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用耐缺氧剂组的总运动距离和脑部凋亡细胞与正常对照组相似,并未出现模型对照组总运动距离减少和脑部凋亡细胞增多的情况。2.本实验证实了红景天苷具有明显的耐缺氧功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】缺氧可能导致心血管系统、呼吸系统、神经系统、消化系统等等一系列危害身体的疾病。斑马鱼心血管系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上,近年来斑马鱼广泛地被用于心血管疾病研究领域。因此,斑马鱼适用于评价耐缺氧功效。亚硝酸钠中毒是临床常见的一种化学性中毒,将正常的血红蛋白氧化成为高铁血红蛋白而失去携氧能力,造成组织细胞缺氧。统计斑马鱼的死亡情况。经过解剖显微镜观察,通过斑马鱼死亡率的差别判断耐缺氧功效。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用耐缺氧剂组。其中正常对照组未服用亚硝酸钠,模型对照组与服用耐缺氧剂组都摄入了等量的亚硝酸钠(亚硝酸钠通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用耐缺氧剂组在摄入亚硝酸钠之前摄入红景天苷之类的耐缺氧剂。服用耐缺氧剂一段时间后,我们统计斑马鱼死亡和存活情况。【结果展示】图1. 斑马鱼死亡和存活数量可以看到,服用耐缺氧剂组未出现模型对照组死亡率明显增多的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用耐缺氧剂组未出现模型对照组死亡率明显增多的情况。2.本实验证实了红景天苷具有明显的耐缺氧功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/注射供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用/注射药物一段时间后,我们观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼肝脏毒性表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼肝脏肿大、变性、卵黄囊吸收延迟。图2. 斑马鱼肝脏病理切片绿色箭头指向红细胞淤积从病理切片中可见,正常对照组肝组织结构规则,肝细胞形态完整,细胞质均匀,细胞核呈规则圆形,位于细胞中央;服用/注射供试品组的斑马鱼肝脏红细胞淤积严重,细胞肿胀现象严重,细胞核萎缩变形,位于细胞边缘,局部可见炎性浸润,坏死。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼肝脏产生明显的毒性表型且组织病理学改变,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有肝脏毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/注射供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用/注射药物一段时间后,我们观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼肝脏毒性表型图可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼肝脏肿大、变性、卵黄囊吸收延迟。图2. 斑马鱼肝脏病理切片绿色箭头指向红细胞淤积从病理切片中可见,正常对照组肝组织结构规则,肝细胞形态完整,细胞质均匀,细胞核呈规则圆形,位于细胞中央;服用/注射供试品组的斑马鱼肝脏红细胞淤积严重,细胞肿胀现象严重,细胞核萎缩变形,位于细胞边缘,局部可见炎性浸润,坏死。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼肝脏产生明显的毒性表型且组织病理学改变,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有肝脏毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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