【评价原理】近三十年来,世界癌症发病率以年均3-5%的速度递增,癌症已成为人类第一位死因。肿瘤移植模型为快速筛选抗肿瘤药物提供巨大帮助。斑马鱼在早期仅有非特异性免疫,不具备完善的特异性免疫,对人肿瘤细胞不存在排斥反应。因此,斑马鱼可直接接种人肿瘤细胞来筛选广谱抗肿瘤药物。另外,斑马鱼与人肿瘤发生、发展相关的(凋亡、VEGF、Wnt、ALK等)信号通路上相似,可用于筛选靶向抗肿瘤药物。1.肿瘤生长、转移将荧光标记的人肿瘤细胞(呈红色)移植到野生型斑马鱼体内,肿瘤细胞在斑马鱼体内的生长和转移情况可以被观察到。2.肿瘤部位新生血管将荧光标记的人肿瘤细胞(呈红色)移植到转基因血管荧光斑马鱼(呈绿色)体内,肿瘤细胞刺激斑马鱼新生血管情况可以被观察到。3.肿瘤细胞凋亡将人肿瘤细胞移植到野生型斑马鱼体内,通过特异性荧光染色(凋亡细胞呈绿色),细胞凋亡情况可以被观察到。4.肿瘤部位炎症将人肿瘤细胞移植到转基因中性粒细胞荧光斑马鱼(呈绿色)体内,肿瘤部位炎症反应可以被观察到。5.肿瘤病理将人肿瘤细胞移植到野生型斑马鱼体内,制作成病理切片,观察肿瘤细胞的形态变化。6.生存期将人肿瘤细胞移植到野生型斑马鱼体内,统计斑马鱼每日存活率、计算其生存期。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗肿瘤药/辅助抗肿瘤产品组。正常对照组不注射人肿瘤细胞,模型对照组与服用抗肿瘤药/辅助抗肿瘤产品组都注射了等量的荧光标记的人肿瘤细胞。服用抗肿瘤药/辅助抗肿瘤产品组注射等量的荧光标记的人肿瘤细胞后,摄入抗肿瘤药/辅助抗肿瘤产品。服用抗肿瘤药/辅助抗肿瘤产品数天后,我们对斑马鱼进行图像采集,观察肿瘤细胞的生长和转移情况、细胞凋亡情况、炎症反应情况以及形态变化,同时计算其生存期。【结果展示】图1. 斑马鱼肿瘤生长表型图红色部分为荧光标记的人肿瘤细胞可以看到,服用抗肿瘤药组的肿瘤细胞数量相比模型对照组明显减少。图2. 斑马鱼肿瘤转移距离表型图绿色为斑马鱼血管,红色颗粒为荧光标记的人肿瘤细胞可以看到,服用抗肿瘤药组的肿瘤转移距离相比模型对照组明显减少。图3. 斑马鱼肿瘤部位新生血管表型图绿色为血管,红色颗粒为人肿瘤细胞可以看到,服用抗肿瘤药组的血管结构与正常对照组比较相似,未出现模型对照组血管增多、增粗、紊乱、出芽的情况。图4. 斑马鱼肿瘤部位细胞凋亡表型图绿色为凋亡细胞,红色颗粒为人肿瘤细胞可以看到,正常对照组未出现凋亡细胞,模型对照组一些凋亡细胞,服用抗肿瘤药组的出现大量的凋亡细胞。图5. 斑马鱼肿瘤部位中性粒细胞表型图绿色颗粒为中性粒细胞可以看到,服用抗肿瘤药组斑马鱼肿瘤部位中性粒细胞较少,未出现模型对照组中性粒细胞募集情况。图6. 斑马鱼肿瘤病理切片绿色箭头指向人肿瘤细胞可以看到,正常对照组斑马鱼腹腔内没有肿瘤细胞,模型对照组斑马鱼腹腔内可见较多的肿瘤细胞,肿瘤细胞多形性、核浆比增大、出现病理性核分裂。抗肿瘤药组斑马鱼腹腔内仅见少量肿瘤细胞,肿瘤细胞体积增大、核浆比增大。图7. 斑马鱼生存期展示图可以看到,服用抗肿瘤药组生存期与正常对照组斑马鱼相似,未出现模型对照组生存期明显缩短的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,抗肿瘤药组的肿瘤细胞数量、转移距离、新生血管数量较模型对照组明显减少;抗肿瘤药组肿瘤部位凋亡细胞较模型对照组明显增加;抗肿瘤药组肿瘤细胞形态较接近正常对照组。2.经过每组60尾斑马鱼的对比实验,抗肿瘤药组斑马鱼生存期较模型对照组明显延长。3.本实验证实了顺铂、康莱特、沙利度胺等抗肿瘤药具有显著的抗肿瘤作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】花生四烯酸主要为AA在TXA2合成酶作用下生成TXA2,激活血小板,活化血小板通过GPⅡb/III a受体与纤维蛋白原交联在一起形成血栓。斑马鱼拥有凝血因子、血小板受体,并对临床应用的抗凝血和抗血栓药物具有很好的反应,适合于血栓形成机制和治疗药物的评价。躯干出现血栓后,血流速度便会减慢,回心血量便会减少。经过红细胞特异性染色(呈红色),患有血小板聚集性血栓的斑马鱼心脏红细胞数量比正常斑马鱼明显减少。由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点,可以明显被观察到。患有血小板聚集性血栓的斑马鱼血流速度会明显比正常斑马鱼明显减慢,在血流分析仪下可以明显观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和抗血栓药物组。其中正常对照组未摄入花生四烯酸,模型对照组与服用/注射抗血栓药物组都摄入了等量的花生四烯酸(花生四烯酸通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。抗血栓药物组在摄入花生四烯酸的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通、血塞通之类的抗血栓药物。服用一段时间抗血栓药物后,我们(1)对斑马鱼做红细胞特异性染色,观察心脏红细胞数量的变化;(2)观察血流速度的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图绿色虚线区域为心脏,心脏内红色为红细胞可以看到,服用抗血栓药物组的心脏情况与模型对照组比较,红细胞数量明显增多。图2. 斑马鱼血流速度与模型对照组比较,*** p < 0.001可以看到,服用抗血栓药物组的血流情况与模型对照组比较,血流速度明显加快。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组与模型对照组比较,心脏红细胞数量明显增加、血流速度明显加快。2.本实验证实了阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通和血塞通具有显著的抗血栓作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】普纳替尼通过影响人血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成等正常功能而造成血管内皮损伤,从而引起血管堵塞,发生血栓。斑马鱼心血管系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上,近年来斑马鱼广泛地被用于心血管疾病研究领域,如心力衰竭、血栓、心律失常、心肌病、动脉粥样硬化等。躯干出现血栓后,回心血量便会减少,血管直径将会减小,血流速度降低,经过血红细胞特异性染色(呈红色),患有血栓的斑马鱼心脏红细胞比正常斑马鱼心脏红细胞明显减少,由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点,可以明显被观察到;利用血管荧光斑马鱼结合显微镜,可以明显观察到患有血栓的斑马鱼血管直径减小;利用血流分析仪,可明显观察到患有血栓的斑马鱼血流速度减慢。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗血栓药物组。其中正常对照组未摄入普纳替尼,模型对照组与服用抗血栓药物组都摄入了等量的普纳替尼(普纳替尼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用抗血栓药物组在加入普纳替尼的同时摄入阿司匹林和二十五味珍珠片之类的抗血栓药物。服用一段时间抗血栓药物后,(1)对斑马鱼整体做血红细胞特异性染色,观察血栓发生情况、心脏红细胞信号强度变化;(2)在荧光显微镜下分析斑马鱼血管直径变化;(3)在血流分析仪下观察斑马鱼血流速度变化情况。【结果展示】图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图黄色虚线区域为心脏,心脏内红色为红细胞可以看到,服用抗血栓药物组的心脏红细胞数量与模型对照组比较明显增多。图2. 斑马鱼血管直径表型图可以看到,服用抗血栓药物组的血管直径与未摄入普纳替尼的正常对照组比较相似,未出现模型对照组血管直径显著减小的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组的与模型对照组比较,心脏红细胞明显增多、血管直径明显增大、血流速度明显加快。2.本实验证实了阿司匹林和二十五味珍珠片具有显著的抗血栓作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】药物主要通过影响血管生长因子的表达、阻滞血管生成因子受体的活性、抑制内皮细胞增殖、抑制基底膜降解和阻断内皮细胞特异性整合素等机制发挥抗血管生成作用。利用特有的转基因血管内皮发荧光斑马鱼(呈绿色),摄入血管形成抑制剂的斑马鱼肠下血管面积会明显较正常斑马鱼的肠下血管面积变小,节间血管会断裂而失去完整性。由于转基因斑马鱼的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和服用/注射血管形成抑制剂组(血管形成抑制剂索拉非尼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内,血管形成抑制剂恩度通过静脉注射吸收到斑马鱼体内)。服用或注射一段时间血管形成抑制剂后,我们对斑马鱼进行荧光拍照,观察斑马鱼肠下血管和节间血管的变化。【结果展示】图1. 肠下血管表型图黄色虚线区域为斑马鱼肠下血管可以看到,服用血管抑制剂组的肠下血管面积明显小于正常对照组。图2. 供试品对节间血管形成的抑制作用表型图白色箭头指向断裂的血管可以看到,注射血管形成抑制剂组的节间血管出现断裂。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,给予血管抑制组的肠下血管较正常对照组变小,节间血管较正常对照组失去完整性。2.本实验证实了索拉非尼和恩度具有抑制血管形成作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】甲萘醌能产生活性氧自由基,当自由基产生量大于机体清除能力时就发生氧化应激反应,最终导致皮肤色素沉积,出现黄褐斑、老年斑。抗氧化成分能够减少皮肤内自由基的生成,对皮肤色素沉着有着良好的抑制作用。斑马鱼通体透明,发生氧化应激反应后的斑马鱼皮肤色素沉着可以被明显观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成四组,分别是正常对照组、模型对照组、提亮肤色产品组。其中正常对照组未加入甲萘醌,模型对照组和提亮肤色产品组都摄入了等量的甲萘醌(甲萘醌通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。提亮肤色产品组在加入甲萘醌的同时摄入了N-乙酰-L半胱氨酸、燕窝酸等提亮肤色产品。服用一段时间提亮肤色产品后,我们对斑马鱼皮肤进行拍照,观察皮肤的色素沉着的情况。【结果展示】图1. 斑马鱼提亮肤色表型图从表型图可以看到,提亮肤色产品组的斑马鱼色素沉着和正常对照组没有明显的差别,未出现模型对照组斑马鱼色素沉着严重的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,提亮肤色产品组色素沉着情况与正常对照组相似,并未出现模型对照组色素沉着严重的情况。2.本实验证实了N-乙酰-L半胱氨酸、燕窝酸具有提亮肤色功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】正常成人的心率在每分钟60~100次之间,如果低于60次称为心动过缓,是心律失常的一个重要类型,患者平时有头晕、乏力、倦怠、精神差的症状。研究表明,斑马鱼心血管系统的发育与人高度相似,虽然斑马鱼是单心房单心室,但其心脏结构及功能与人高度保守。同时,由于斑马鱼具有透明易观察等优点,开始被大量应用于心血管疾病研究和药物心血管毒性评价当中。维拉帕米能阻滞心肌细胞慢通道,抑制Ca2+向细胞的内流,阻碍心脏慢反应电活动,降低舒张期去极化速度,抑制窦房结的自律性,减慢心率;亦能延长房室结的有效不应期,减慢房室传导。用解剖显微镜下观察斑马鱼心率,模型对照组斑马鱼心率较正常斑马鱼明显减慢。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入维拉帕米,模型对照组与药物组都摄入了等量的维拉帕米(维拉帕米通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。药物组先摄入地高辛之类的改善心动过缓药物再摄入维拉帕米。服用改善心动过缓药物后再加入维拉帕米共同处理至实验终点后,我们对斑马鱼统计斑马鱼的心率。【结果展示】图1. 斑马鱼心动过缓柱状图可以看到,模型对照组心率明显减慢,服用药物组的心率与正常对照组比较相似,没有明显的心率减慢。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用改善心动过缓药物组的心率相较于模型对照组。2.本实验证实了地高辛具有明显改善心动过缓的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼心血管系统的发育与人高度相似,虽然斑马鱼是单心房单心室,但其心脏结构及功能与人高度保守。同时,由于斑马鱼具有透明易观察等优点,开始被大量应用于心血管疾病研究和药物心血管毒性评价当中。羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 ( HMGCR) 是他汀类药物发挥抑制作用的直接作用点, HMGCR功能被抑制会影响血管的完整性和稳定性,诱发心脏出血。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用改善心脏出血药物组都摄入了等量的辛伐他汀(辛伐他汀通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。药物组在摄入辛伐他汀的同时摄入淫羊藿苷之类的改善心脏出血药物。服用改善心脏出血药物一段时间后,我们通过解剖显微镜对斑马鱼进行心脏出血发生率的统计;对斑马鱼进行行为学分析;通过心跳血流分析系统采集斑马鱼血流影像,并分析血流速度改善作用。【结果展示】图1. 斑马鱼改善心脏出血表型图可以看到,模型对照组的斑马鱼心脏有明显的出血,服用改善心脏出血药物组的心脏出血情况与正常对照组比较相似,没有明显的心脏出血。图2. 斑马鱼运动改善表型图可以看到,模型对照组的运动距离明显减少,服用改善心脏出血药物组的运动距离与正常对照组比较相似,没有明显的运动减少。图3. 斑马鱼改善血流柱状图可以看到,模型组的血流速度明显减慢,服用改善心脏出血药物组的血流速度与模型对照组比较血流速度增加,没有明显的血流速度减慢。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用改善心脏出血药物组的心脏出血情况、运动距离、血流速度均有明显改善作用。2.本实验证实了淫羊藿苷具有明显改善心脏出血的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】贫血是指人体外周血红细胞容量减少,低于正常范围下限的一种常见的临床症状。斑马鱼造血系统的形成,包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统,其相关的转录因子及信号转导通路同人类有高度的同源性,这些特点使斑马鱼在人类造血系统和血液疾病的研究中有着更加广泛的应用。由于斑马鱼早期出现血液循环时胚胎透明,可通过染色剂在显微镜直接观察心脏红细胞的数量。苯肼导致红细胞外翻和氧化应激产生,红细胞外翻能够引起血细胞聚集,氧化应激产生导致内皮细胞损伤,进而导致血小板聚集、纤维蛋白原形成,最终诱导血栓发生。用特异性红细胞染色剂(呈红色),贫血斑马鱼心脏部位的红细胞较正常斑马鱼明显减少,在解剖显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用补血药物组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用补血药物组都摄入了等量的苯肼(苯肼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用补血药物组先摄入生血宁之类的改善贫血药物后再摄入苯肼。服用改善贫血药物一段时间后,再加入苯肼共同处理一段时间后,我们对斑马鱼整体做红细胞特异性染色,最终分析斑马鱼的红细胞信号强度。【结果展示】图1. 斑马鱼贫血表型图可以看到,模型对照组红细胞信号强度较正常对照组明显减少,服用补血药物组的红细胞信号强度与正常对照组比较相似,没有明显的红细胞减少情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用补血药物组的红细胞信号强度与正常对照组相似,并未出现模型对照组红细胞减少的情况。2.本实验证实了生血宁具有明显改善贫血的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中,生物可能会发生氧化应激,主要表现为活性氧(ROS)产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中,活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解毒。 应用ROS特异性荧光检测试剂,它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质,用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是底物对照组、正常对照和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内),并加入ROS特异性荧光检测试剂。服用供试品一段时间后,我们使用酶标仪对斑马鱼体内ROS进行荧光定量。【结果展示】图1. 斑马鱼体内ROS荧光值可以看到,服用供试品组斑马鱼体内荧光值比正常对照组有明显升高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼ROS水平明显高于正常对照组,与正常对照组存在显著性差异。2.本实验证实了该供试品诱发斑马鱼氧化应激。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中,生物可能会发生氧化应激,主要表现为活性氧(ROS)产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中,活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解毒。 应用ROS特异性荧光检测试剂,它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质,用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是底物对照组、正常对照和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内),并加入ROS特异性荧光检测试剂。服用供试品一段时间后,我们使用酶标仪对斑马鱼体内ROS进行荧光定量。【结果展示】图1. 斑马鱼体内ROS荧光值可以看到,服用供试品组斑马鱼体内荧光值比正常对照组有明显升高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼ROS水平明显高于正常对照组,与正常对照组存在显著性差异。2.本实验证实了该供试品诱发斑马鱼氧化应激。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中,生物可能会发生氧化应激,主要表现为活性氧(ROS)产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中,活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解毒。 应用ROS特异性荧光检测试剂,它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质,用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是底物对照组、正常对照和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内),并加入ROS特异性荧光检测试剂。服用供试品一段时间后,我们使用酶标仪对斑马鱼体内ROS进行荧光定量。【结果展示】图1. 斑马鱼体内ROS荧光值可以看到,服用供试品组斑马鱼体内荧光值比正常对照组有明显升高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼ROS水平明显高于正常对照组,与正常对照组存在显著性差异。2.本实验证实了该供试品诱发斑马鱼氧化应激。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】临床上显示常见的青光眼视神经病变、糖尿病性视网膜病变以及视网膜中央动静脉阻塞等疾病的发生都与缺氧有关系。组织的缺氧被视为视网膜血管疾病的重要原因,而与血管相关的视网膜疾病恰恰是临床上导致视力丧失的最主要原因。斑马鱼视网膜结构与人类高度相似,这使得斑马鱼胚胎能够模拟视网膜新生血管,为在短时间内快速评估功效提供了模型。氯化钴是广泛使用的化学缺氧模拟剂,其钴可以取代特定前体羟化酶中的铁离子,使羟化活性失活。缺氧条件下,能够诱导转录因子(hif)和血管内皮生长因子(vegf)的表达,诱发新生血管形成。改善湿性黄斑变性有3个指标:(1)采用转基因血管内皮细胞绿色荧光斑马鱼,可在荧光显微镜在观察到缺氧的斑马鱼视网膜血管明显增多增粗;(2)同时制作病理切片,进行苏木素-伊红染色,观察视网膜结构变化;(3)检测hif、vegf基因相对表达量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和黄斑变性药物组。其中正常对照组未摄入氯化钴,模型对照组与黄斑变性药物组都摄入了等量的氯化钴(氯化钴通过溶于鱼水的方式摄入到斑马鱼体内)。黄斑变性药物组在摄入氯化钴的同时给予施图伦滴眼液、贝伐单抗之类的黄斑变性药物。服用/注射一段时间黄斑变性药物后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼视网膜血管的变化,制作成病理切片观察视网膜的病理结构变化,检测hif、vegf基因相对表达量。【结果展示】图1. 斑马鱼视网膜血管表型图可以看到,服用/注射黄斑变性药物组的视网膜血管面积与正常对照组比较相似,没有明显的血管增多增粗。图2. 视网膜结构表型图从病理切片中也能看出来,模型斑马鱼眼睛病理切片的色素上皮层和外核层结构紊乱、变薄,而服用/注射黄斑变性药物组的色素上皮层和外核层结构均有所恢复。图3. hif-1α基因相对表达量可以看到,模型斑马鱼hif-1α基因表达显著升高,服用/注射黄斑变性药物组该基因明显下降。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射黄斑变性药物组与模型对照组比较,视网膜血管明显变细、视网膜结构较正常、hif-1α基因表达下调。2.本实验证实了施图伦滴眼液、贝伐单抗具有明显的湿性黄斑变性防治作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统,如肝脏、肠道等,消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。斑马鱼的卵黄囊70%左右是中性脂肪,如果能够促进斑马鱼卵黄囊的吸收,就相当于可以促进脂肪的分解和代谢,类似于体内脂肪燃烧。经过脂肪特异性荧光染色(呈红色),斑马鱼的卵黄囊被染红,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组和服用燃脂产品组。其中正常对照组未摄入其他物质,服用燃脂产品组摄入了白藜芦醇之类的燃脂产品(燃脂产品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间燃脂产品后,我们对斑马鱼卵黄囊做脂肪特异性荧光染色,观察卵黄囊的脂肪颜色变化。【结果展示】图1. 斑马鱼卵黄囊脂肪表型图黄色虚线区域为斑马鱼卵黄囊可以看到,服用燃脂产品的斑马鱼卵黄囊荧光强度与正常对照组明显减弱。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用燃脂产品组卵黄囊荧光强度与正常对照组比较明显减弱。2.本实验证实了白藜芦醇具有明显燃脂(促进脂肪代谢)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼成鱼体长5 cm左右,其胚胎透明,在受精72 h后完成孵化,并在孵出后3个月内性成熟。成年斑马鱼的繁殖周期短(一般7 d左右),若条件适宜,成年雌性斑马鱼可定期产卵(每次200~300个)。在斑马鱼的早期胚胎及幼体的发育过程中,尚无性别分化,原始性腺都是相同的且具有双向发育的潜能,易受环境(温度、光照、pH值等)因素的影响而改变其遗传性别。对于雌性斑马鱼而言,产卵量是评价其繁殖力的常用生物指标,它与鱼类繁殖过程中的多个环节(卵子发育、雌雄交配行为、性激素刺激等)相关,并对环境化学物质具有高敏感性,能直接反应鱼类繁殖力变化。环境化学物质除了直接对亲代斑马鱼的生殖系统造成损害,还可能对其子代的正常生长发育。卵黄蛋白原在斑马鱼雌鱼成熟过程中发挥重要作用,成熟雌鱼在体内17β-雌二醇的刺激下,由肝脏合成的VTG经过血液到达卵巢并加工成卵黄蛋白,促进性腺发育。幼鱼和雄鱼在正常情况下不合成VTG,但在受到雌激素和类雌激素刺激时能合成VTG,导致鱼体内VTG浓度升高,出现雌性体征。鱼类的性腺发育和繁殖行为受到下丘脑-垂体-性腺轴(HPG 轴)的调控。下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),其作用于脑垂体,刺激其分泌促黄体生成素(LH)和促卵泡素(FSH),这两种激素通过血液循环与相应的受体结合后作用于性腺,刺激性腺产生睾酮(T)、17β-雌二醇(E2)和 11-酮基睾酮(11-KT) 等类固醇激素,进而促进精子和卵子的发育和成熟。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,进行21天的暴露实验,分别是正常对照组和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间供试品后,观察每次的产卵量、受精率及孵化率;对受精卵进行子一代发育毒性与致畸性评价。在实验终点取斑马鱼的组织,检测卵黄蛋白原(VTG)含量及相关基因表达,并对性腺进行病理组织学检查,指标主要包括:睾丸卵母细胞、睾丸间质细胞增生、卵黄形成减少、精原细胞和滤泡增生;其他性腺损伤包括:卵母细胞闭锁、睾丸变性和分期改变。【结果展示】图1. 供试品对斑马鱼体内卵黄蛋白原(VTG)的影响可以看到,供试品组VTG有下降趋势,但与正常对照组比较没有显著性差异。 图2. 斑马鱼发育毒性与致畸性表型图可以看到,供试品组斑马鱼诱发眼睛变小,下颌异常,心血管毒性等。 图3. 斑马鱼性腺病理切片可以看到,供试品组斑马鱼精巢精子量变少,卵巢中卵母细胞体积变小、数量减少 。图4. 供试品对斑马鱼基因表达的影响可以看到,供试品组FSHβ、LHβ基因相较于正常对照组显著表达。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,摄入供试品组的斑马鱼体内VTG有下降趋势,子一代斑马鱼有致畸性,性腺病理切片有不同程度的异常,与性腺发育和繁殖行为相关基因的上调。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有生殖毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼成鱼体长5 cm左右,其胚胎透明,在受精72 h后完成孵化,并在孵出后3个月内性成熟。成年斑马鱼的繁殖周期短(一般7 d左右),若条件适宜,成年雌性斑马鱼可定期产卵(每次200~300个)。在斑马鱼的早期胚胎及幼体的发育过程中,尚无性别分化,原始性腺都是相同的且具有双向发育的潜能,易受环境(温度、光照、pH值等)因素的影响而改变其遗传性别。对于雌性斑马鱼而言,产卵量是评价其繁殖力的常用生物指标,它与鱼类繁殖过程中的多个环节(卵子发育、雌雄交配行为、性激素刺激等)相关,并对环境化学物质具有高敏感性,能直接反应鱼类繁殖力变化。环境化学物质除了直接对亲代斑马鱼的生殖系统造成损害,还可能对其子代的正常生长发育。卵黄蛋白原在斑马鱼雌鱼成熟过程中发挥重要作用,成熟雌鱼在体内17β-雌二醇的刺激下,由肝脏合成的VTG经过血液到达卵巢并加工成卵黄蛋白,促进性腺发育。幼鱼和雄鱼在正常情况下不合成VTG,但在受到雌激素和类雌激素刺激时能合成VTG,导致鱼体内VTG浓度升高,出现雌性体征。鱼类的性腺发育和繁殖行为受到下丘脑-垂体-性腺轴(HPG 轴)的调控。下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),其作用于脑垂体,刺激其分泌促黄体生成素(LH)和促卵泡素(FSH),这两种激素通过血液循环与相应的受体结合后作用于性腺,刺激性腺产生睾酮(T)、17β-雌二醇(E2)和 11-酮基睾酮(11-KT) 等类固醇激素,进而促进精子和卵子的发育和成熟。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,进行21天的暴露实验,分别是正常对照组和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间供试品后,观察每次的产卵量、受精率及孵化率;对受精卵进行子一代发育毒性与致畸性评价。在实验终点取斑马鱼的组织,检测卵黄蛋白原(VTG)含量及相关基因表达,并对性腺进行病理组织学检查,指标主要包括:睾丸卵母细胞、睾丸间质细胞增生、卵黄形成减少、精原细胞和滤泡增生;其他性腺损伤包括:卵母细胞闭锁、睾丸变性和分期改变。【结果展示】图1. 供试品对斑马鱼体内卵黄蛋白原(VTG)的影响可以看到,供试品组VTG有下降趋势,但与正常对照组比较没有显著性差异。 图2. 斑马鱼发育毒性与致畸性表型图可以看到,供试品组斑马鱼诱发眼睛变小,下颌异常,心血管毒性等。 图3. 斑马鱼性腺病理切片可以看到,供试品组斑马鱼精巢精子量变少,卵巢中卵母细胞体积变小、数量减少 。图4. 供试品对斑马鱼基因表达的影响可以看到,供试品组FSHβ、LHβ基因相较于正常对照组显著表达。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,摄入供试品组的斑马鱼体内VTG有下降趋势,子一代斑马鱼有致畸性,性腺病理切片有不同程度的异常,与性腺发育和繁殖行为相关基因的上调。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有生殖毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】酒精进入人体后90%进入肝脏进行代谢,长期过量饮酒诱发酒精性脂肪肝,临床表现为肝脏受脂肪浸润。由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统,如肝脏、肠道等,消化和营养的吸收及运输与人类高度相似,在大量摄入酒精后,肝脏也会出现脂肪变性(酒精性脂肪肝)的情况。经过脂肪特异性染色(呈红色),患有酒精性脂肪肝的斑马鱼的肝脏会明显比正常斑马鱼的肝脏要红很多,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用解酒剂组。其中正常对照组未摄入酒精,模型对照组与服用解酒剂组都摄入了等量的酒精(酒精通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用解酒剂组在摄入酒精的同时摄入RU21、海王金樽之类的解酒剂。服用一定时间解酒剂后,我们对斑马鱼整体做脂肪特异性染色,观察肝脏的脂肪变化,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼酒精性脂肪肝表型图黄色虚线区域为肝脏,肝脏内红色代表脂肪可以看到,服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组比较相似,没有明显的脂肪沉积。图2. 肝脏病理切片黄色箭头指向脂肪颗粒从病理切片中也能看出来,酒精性脂肪肝斑马鱼的肝脏有很多脂肪颗粒,而服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组都没有出现类似的脂肪颗粒。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组相似,并未出现模型对照组的出现大量脂肪颗粒(酒精性脂肪肝)的情况。2.本实验证实了RU21、海王金樽解酒剂具有疏肝解酒(酒精性脂肪肝防治)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】酒精进入人体后90%进入肝脏进行代谢,长期过量饮酒诱发酒精性脂肪肝,临床表现为肝脏受脂肪浸润。由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统,如肝脏、肠道等,消化和营养的吸收及运输与人类高度相似,在大量摄入酒精后,肝脏也会出现脂肪变性(酒精性脂肪肝)的情况。经过脂肪特异性染色(呈红色),患有酒精性脂肪肝的斑马鱼的肝脏会明显比正常斑马鱼的肝脏要红很多,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用解酒剂组。其中正常对照组未摄入酒精,模型对照组与服用解酒剂组都摄入了等量的酒精(酒精通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用解酒剂组在摄入酒精的同时摄入RU21、海王金樽之类的解酒剂。服用一定时间解酒剂后,我们对斑马鱼整体做脂肪特异性染色,观察肝脏的脂肪变化,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼酒精性脂肪肝表型图黄色虚线区域为肝脏,肝脏内红色代表脂肪可以看到,服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组比较相似,没有明显的脂肪沉积。图2. 肝脏病理切片黄色箭头指向脂肪颗粒从病理切片中也能看出来,酒精性脂肪肝斑马鱼的肝脏有很多脂肪颗粒,而服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组都没有出现类似的脂肪颗粒。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用解酒剂组的肝脏情况与未摄入酒精的正常对照组相似,并未出现模型对照组的出现大量脂肪颗粒(酒精性脂肪肝)的情况。2.本实验证实了RU21、海王金樽解酒剂具有疏肝解酒(酒精性脂肪肝防治)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】苯肼导致红细胞外翻和氧化应激产生,红细胞外翻能够引起血细胞聚集,氧化应激产生导致内皮细胞损伤,进而导致血小板聚集、纤维蛋白原形成,最终诱导血栓发生。斑马鱼的造血遗传网络在进化上和人类高度保守,适合于血栓形成机制和治疗药物的评价。躯干出现血栓后,回心血量便会减少。经过血红细胞特异性染色(呈红色),患有血栓的斑马鱼心脏红细胞比正常斑马鱼心脏红细胞明显减少,由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用血管疏通剂组。其中正常对照组未摄入苯肼,模型对照组与服用血管疏通剂组都摄入了等量的苯肼(苯肼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用血管疏通剂组在加入苯肼的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷之类的血管疏通剂。服用一段时间血管疏通剂后,我们对斑马鱼整体做血红细胞特异性染色,观察心脏红细胞变化。【结果展示】图1. 斑马鱼血栓表型图黄色虚线区域为心脏,心脏内红色为红细胞可以看到,服用血管疏通剂组的肝脏情况与未摄入苯肼的正常对照组比较相似,没有明显的红细胞减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用血管疏通剂组的心脏红细胞数量与未摄入苯肼的正常对照组相似,并未出现模型对照组的心脏红细胞数量减少的情况。2.本实验证实了阿司匹林、氯吡格雷和养血清脑颗粒具有显著的疏通血管(抗血栓)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】斑马鱼的鳔从器官进化、组织结构以及生物学等多个层面都类似于哺乳动物的肺泡。病毒性肺炎:注射给予聚肌胞——poly(i:c)建立斑马鱼病毒性肺炎模型。poly(i:c)的双链RNA结构非常类似于病毒或病毒复制过程中形成的双链RNA,所以poly(i:c)类似某些病毒,具有很强的干扰素诱生作用。通过使用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼和转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,在荧光显微镜下可以直接观察斑马鱼中性粒细胞和巨噬细胞,并分时间点视频记录巨噬细胞和中性粒细胞溢出血管情况,使用实时荧光定量PCR仪可获得基因表达水平,通过制作组织病理切片观察斑马鱼鱼鳔部位的病理结构变化。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中,模型对照组与抗炎药组都注射了等量的聚肌胞——poly(i:c)建立病毒性肺炎模型。抗炎药组在注射了poly(i:c)的同时摄入吲哚美辛之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后,我们在荧光显微镜下拍摄斑马鱼中性粒细胞和巨噬细胞的数量,并分时间点视频记录巨噬细胞和中性粒细胞溢出血管情况,用实时荧光定量PCR仪检测TNF-α、IL-1β值,同时制作成病理切片观察鱼鳔部位的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼中性粒表型图黄色虚线区域为鱼鳔,绿色荧光颗粒为中性粒细胞可以看到,抗炎药组斑马鱼鱼鳔位置处的中性粒细胞聚集情况明显改善。图2. 斑马鱼巨噬细胞表型图黄色虚线区域为鱼鳔,绿色荧光为巨噬细胞可以看到,抗炎药组斑马鱼鱼鳔位置处的巨噬细胞聚集情况明显改善。图3. TNF-α基因表达水平与模型对照组比较,**p < 0.01可以看到,抗炎药组能显著抑制斑马鱼的炎症基因TNF-α表达水平。图4. IL-1β基因表达水平与模型对照组比较,**p < 0.01可以看到,抗炎药组能显著抑制斑马鱼的炎症基因IL-1β表达水平。图5. 鱼鳔部位病理切片从病理切片中能看出来,抗炎药组斑马鱼鱼鳔病理结构与正常对照组相似,未出现模型对照组渗入的炎性细胞明显增多的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,抗炎药组与模型对照组比较,能显著抑制中性粒细胞和巨噬细胞的聚集,能显著抑制炎症基因表达水平,能改善炎性浸润情况。2.本实验证实了吲哚美辛具有显著的病毒性肺炎防治作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)
【评价原理】光毒物质在特定的波长光线刺激下,形成单线态和三线态后,可迅速与细胞小分子物质结合形成特异的光激活物质。这种物质在体内会降解为普通毒物或再次成为光毒物质,对机体造成伤害。在急性光毒性反应中,皮肤在照射紫外线后数分钟至数小时内出现红斑、水疱等。在慢性光毒性中可引起照射处皮肤色素的沉着过多以及皮肤增厚。斑马鱼皮肤包括表皮、真皮和真皮下组织,结构与人高度相似。因此,斑马鱼适合评价化妆品的光毒性。我们评价斑马鱼光毒性有2个指标:1.毒性表型;2.LC50。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成12个组,分别是避光正常对照组,5个避光供试品组,光照正常对照组,5个光照供试品组。供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内。皮肤吸收一段时间供试品后,我们记录斑马鱼各组斑马鱼死亡率,以软件计算供试品LC50;并记录拍照记录明显毒性表型。【结果展示】图1:光毒性表型图可以看到,正常对照组和光照处理正常对照组未诱发任何毒性表型。供试品组诱发卵黄囊吸收延迟,光照处理的供试品组诱发心血管毒性和肾毒性等。图2. 供试品LC50可以看到,未光照的供试品与光照过的供试品LC50有明显差异。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,光照过的供试品诱发毒性表型较未光照的供试品严重,且与正常对照组存在明显的差别;未光照的供试品与光照过的供试品LC50有明显差异。2.本实验证实了供试品具有光毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)