皮肤亮白是东方女性一直以来对美的直观追求，因此美白类化妆品成为了市场的宠儿。人体皮肤变黑的主要原因是酪氨酸酶的存在促进了黑色素的合成和黑色素基因的表达，而在斑马鱼皮肤上也有类似的表达过程，因此，可以通过斑马鱼技术有效评价化妆品的美白功效。【评价原理】斑马鱼在发育初期全身透明，胚胎发育至 24 h时黑色素开始从视网膜上皮生长。色素细胞起源于背部外胚层分化的一群细胞—神经嵴细胞，然后增殖、迁徙、分化成色素母细胞。在黑色素形成的过程中进行干预，可抑制黑色素的形成。【实验方案】我们将斑马鱼分成若干组，含正常对照组和供试品组。正常对照组不做处理，供试品组使用受试化妆品，孵育48 hpf后，对斑马鱼头部进行拍照，利用高级图像处理软件分析斑马鱼头部的黑色素信号强度，从而评价其美白功效。此外，将斑马鱼进行匀浆处理，分别提取其中的酪氨酸酶和黑色素蛋白，进行OD值测定，通过酪氨酸酶活性和黑色素蛋白的含量反映化妆品的美白功效。【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）图1. 斑马鱼头部黑色素表型图（蓝色为分析区域）阳性对照组和化妆品组与正常对照组对比分析，得出美白功效作用。图2 斑马鱼酪氨酸酶活力与正常对照组比较，**p<0.01供试品组与正常对照组相比，酪氨酸酶活性显著降低。图3 斑马鱼黑色素蛋白含量与正常对照组比较，***p<0.001供试品组与正常对照组相比，黑色素含量显著降低。【评价结论】1.经过各组斑马鱼对比实验，阳性对照组和化妆品组与正常对照组对比，斑马鱼头部只有少量的黑色素。2.经过对斑马鱼进行匀浆和蛋白质提取处理，可见供试品组与正常对照组相比，酪氨酸酶活性和黑色素蛋白含量均减少。3.本实验证实了该化妆品具有美白的作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

过敏反应通常会引起许多皮肤症状，比如皮肤发红、发痒，严重的患者还会出现刺痛或者面部出现红斑、风团、丘疹或丘疱疹等症状。敏感性肌肤的人群选用化妆品时，需要特别关注化妆品的致敏性。通过斑马鱼技术可以有效评价化妆品及其原料的致敏性。【评价原理】过敏反应的主要原因是过敏原/致敏因子诱导组织学上肥大细胞脱颗粒，释放多种活性介质进而诱发各种过敏症状。其中类胰蛋白酶是肥大细胞内预先合成的中性蛋白酶，是临床上检验人体是否过敏的重要指标。斑马鱼产生过敏反应时，同样会诱导肥大细胞分泌类胰蛋白酶。因此，通过检测斑马鱼整体类胰蛋白酶水平可以判断化妆品及其原料的致敏性。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成若干组组，包含正常对照组和化妆品组。其中正常对照组未加入化妆品，化妆品组分别加入不同剂量（化妆品通过溶解到标准稀释水中的方式添加到实验体系中）的样品。处理24 h后，利用酶标仪检测各组吸光度值（OD值），以类胰蛋白酶的表达水平评价化妆品致敏作用。此外，可以通过斑马鱼病理切片，用PAS染色后观察肠道壁上肥大细胞的状况反映化妆品的致敏性。【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）图1. 斑马鱼类胰蛋白酶含量（吸光度值）与正常对照组比较，*p < 0.05，***p < 0.001可以看到，化妆品中剂量和高剂量组类胰蛋白酶含量与正常对照组比较明显升高，具有致敏性，低剂量组无致敏性。图2. 斑马鱼体内肥大细胞染色典型图（箭头指示为肥大细胞）从经过PAS染色的病理切片中也能看出来，化妆品组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量明显增加。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验，化妆品中、高剂量组斑马鱼类胰蛋白酶含量和肠道壁上的肥大细胞数量与正常对照组相比数量明显增加。2.本实验证实了该化妆品具有明显的致敏作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

雌激素是一类固醇激素，目前已成为一种新兴的污染物。一些无良商家为片面追求功效而在护肤产品中违规添加，导致很多女性因使用了此类护肤品而出现“激素脸”，表现为面部翻红、发痒、干燥脱皮，甚至烂脸流脓。环特生物应用诺贝尔奖技术——荧光蛋白基因转移技术，可实现对化妆品中雌激素类化学物质的直观、精确和高效的检测评价。【评价原理】通过转基因标记表达的绿色荧光蛋白含量来反映雌激素含量，绿色荧光蛋白特异性地在肝脏进行表达，一旦供试品中含有雌激素类化学物质，转基因斑马鱼暴露后肝脏部位会出现特异性绿色荧光，可用绿色荧光量化供试品中的雌激素含量，从而达到评价效果。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为两组，分别为正常对照组和供试品组。在相同的温、湿度条件下培育一段时间后，在显微镜下对肝脏部位的绿色荧光进行量化分析。【结果展示】 图1. 雌激素处理后斑马鱼荧光表型图可以看到，用供试品处理后的斑马鱼在肝脏部位显示明显的绿色荧光。【评价结论】1、经过各组斑马鱼的对比实验，雌激素处理组斑马鱼的肝脏部位出现明显的绿色荧光，与正常对照组存在明显的差别；2、本实验说明供试品中存在雌激素类有害物质。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】半数致死浓度（LC50）是指在动物急性毒性实验中，使受试动物半数死亡的毒性浓度。在比较各种污染物的毒性，不同种或不同发育阶段的动物对污染物的敏感性以及环境因素对毒性影响等方面的研究中，都以LC50为依据。常规急性毒性实验常采用啮齿类和非啮齿类动物进行，能较准确地反映食品及保健食品的安全性，但实验周期一般较长，用量较大。用斑马鱼胚胎检验食品及保健食品的急性毒性，具有体积小，成本低，易于饲养，重复性好，便于观察，繁殖周期短，繁殖频率高，给药方式简单等诸多优点。因此斑马鱼是一种理想的试验模型，用以确定食品及保健品暴露在胚胎中的毒性效应，评价其半数致死浓度。根据实验终点斑马鱼的死亡率，通过使用OriginPro 8.0统计学软件，拟合半数致死浓度。【实验方案】我们将供试品（保健食品）设置一系列浓度，并设置一个正常对照组。同时设置3个生物学重复。药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内进行3天的暴露实验。每天观察记录斑马鱼死亡情况，药物处理结束后，统计各实验组的斑马鱼致死率，使用OriginPro 8.0统计学软件绘制最佳的剂量效应曲线，并计算LC50。【结果展示】图1. 斑马鱼“浓度-死亡率”效应曲线可以看到，利用OriginPro 8.0软件模拟得出保健食品LC50= 8.0 μg/mL。【评价结论】1.根据保健食品“浓度-死亡率”统计数据，利用OriginPro 8.0软件模拟得出LC50=8.0 μg/mL。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】半数致死浓度（LC50）是指在动物急性毒性实验中，使受试动物半数死亡的毒性浓度。在比较各种污染物的毒性，不同种或不同发育阶段的动物对污染物的敏感性以及环境因素对毒性影响等方面的研究中，都以LC50为依据。常规急性毒性实验常采用啮齿类和非啮齿类动物进行，能较准确地反映药物的安全性，但实验周期一般较长，药物用量较大。用斑马鱼胚胎检验药物急性毒性，具有体积小，成本低，易于饲养，重复性好，便于观察，繁殖周期短，繁殖频率高，给药方式简单等诸多优点，因此它是一种理想的试验模型，用以确定药物暴露在胚胎中的毒性效应，评价药物半数致死浓度。根据实验终点斑马鱼的死亡率，通过使用OriginPro 8.0统计学软件，拟合半数致死浓度。【实验方案】我们将供试品设置一系列浓度，并设置一个正常对照组。同时设置3个生物学重复。药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内进行3天的暴露实验。每天观察记录斑马鱼死亡情况，药物处理结束后，统计各实验组的斑马鱼致死率，使用OriginPro 8.0统计学软件绘制最佳的剂量效应曲线，并计算LC50。【结果展示】图1. 斑马鱼“浓度-死亡率”效应曲线可以看到，利用OriginPro 8.0软件模拟得出药物LC50=8.0 μg/mL。【评价结论】1.根据药物“浓度-死亡率”的统计数据，利用OriginPro 8.0软件模拟得出药物的LC50=8.0 μg/mL。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼的听觉外侧系统由内耳和侧线两个关键的感觉结构组成，斑马鱼具有典型的内耳结构，内耳的毛细胞和侧线的毛细胞在结构功能及分子水平上与哺乳动物的内耳毛细胞非常相似，包括对耳毒性药物的相似反应。经过DASPEI特异性荧光染色（呈绿色），听力损伤的斑马鱼比正常斑马鱼毛细胞明显减少或缺失（荧光减弱或者消失）。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体做毛细胞特异性染色，观察毛细胞的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼“浓度-死亡率”效应曲线供试品最大非致死浓度（MNLC）和LC10图2. 斑马鱼毛细胞表型图绿色荧光点为听细胞聚集的神经丘可以看到，服用/注射供试品组斑马鱼毛细胞减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼毛细胞明显减少，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有听毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼的听觉外侧系统由内耳和侧线两个关键的感觉结构组成，斑马鱼具有典型的内耳结构，内耳的毛细胞和侧线的毛细胞在结构功能及分子水平上与哺乳动物的内耳毛细胞非常相似，包括对耳毒性药物的相似反应。经过DASPEI特异性荧光染色（呈绿色），听力损伤的斑马鱼比正常斑马鱼毛细胞明显减少或缺失（荧光减弱或者消失）。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体做毛细胞特异性染色，观察毛细胞的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼“浓度-死亡率”效应曲线供试品最大非致死浓度（MNLC）和LC10图2. 斑马鱼毛细胞表型图绿色荧光点为听细胞聚集的神经丘可以看到，服用/注射供试品组斑马鱼毛细胞减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼毛细胞明显减少，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有听毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中，而核DNA由于分子量太大只能留在原位。在中性条件下，DNA片段可进入凝胶发生迁移，而在碱性电解质的作用下，DNA发生解螺旋，损伤的DNA断链及片段被释放出来。由于这些DNA的分子量小且碱变性为单链，所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA 向正极迁移形成“彗星”状图像，而未受损伤的DNA部分保持球形。DNA受损越严重，产生的断链和断片越多，长度也越小，在相同的电泳条件下迁移的DNA量就愈多，迁移的距离就愈长。通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可以测定单个细胞DNA损伤程度，从而确定受试物的作用剂量与DNA损伤效应的关系。彗星实验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性，研究的细胞不需处于有丝分裂期。同时，这种技术只需要少量细胞。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，检测尾长、彗星长、尾矩和Olive尾矩。【结果展示】图1. 彗星电泳图片可以看到，服用/注射供试品组斑马鱼细胞核出现拖尾。该供试品改变DNA链的负超螺旋结构、空间构象，使DNA链断裂、形成类核，最终导致细胞死亡（坏死、凋亡或自体吞噬）。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼细胞核出现明显拖尾，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有基因毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】 皮肤弹性作为皮肤组织的重要生物力学特性，对生理病理状态的分析、诊断、治疗有着极其重要的参考价值和指导作用，是评价皮肤功能的重要指标。皮肤的液体含量(血液、淋巴液)、弹力纤维和肌纤维的特性及神经组织的紧张度是决定皮肤弹性高低的重要因素。皮肤的弹性和胶原蛋白有关，人体内的胶原蛋白不足时，便会出现皮肤的弹性下降。I型是在大多数结缔组织中发现的原纤维形成胶原，在骨骼，角膜，真皮和肌腱中含量丰富。在人体内，I型胶原是一种三聚体，主要由两条α1链和一条α2链组成，分别由col1a1和col1a2基因编码。相反，在斑马鱼中，存在三种I型胶原基因，分别编码α1（I），α3（I）和α2（I）链的col1a1a，col1a1b和col1a2。在胚胎和幼虫发育过程中，三种I型胶原基因显示出相似的时空表达模式，表明它们在这些阶段的共同调控和相互依赖性。通过检测皮肤弹性相关基因（皮肤胶原蛋白col1a2基因、col1a1a和col1a1b基因）相对表达量来表明产品的增加皮肤弹性功效。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和皮肤弹性产品组（皮肤弹性产品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。皮肤吸收皮肤弹性产品一段时间后，我们通过qPCR检测皮肤胶原蛋白col1a2基因（推荐）、col1a1a和col1a1b基因的转录水平，并计算其相对表达量。【结果展示】以col1a2基因为例，提供柱状图图1. 斑马鱼体内col1a2相对表达量与正常对照组比较，*** p< 0.001可以看到，摄入皮肤弹性产品组的斑马鱼col1a2基因相对表达量较正常对照组明显增加。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用皮肤弹性产品组的col1a2基因、col1a1a和col1a1b基因相对表达量较正常对照组明显增加。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】多发性硬化是以中枢神经系统白质炎性脱髓鞘病变为主要特点的自身免疫病，可能是遗传易感个体与环境因素作用而发生的神经免疫过程，由于其发病率较高，成慢性病程和倾向于年轻人罹患，而成为最重要的神经系统疾病之一。研究表明斑马鱼的髓鞘少突胶质细胞的结构特性和细胞谱系关系与哺乳动物具有高度的可比性。斑马鱼体内与髓鞘形成相关的基因与哺乳动物具有很好的同源性。尽管这些基因与哺乳动物有些不同，但高度保守的基因序列足够表达出功能类似的蛋白。溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，能诱导斑马鱼脑脊髓神经细胞髓鞘损伤。经过特异性荧光染色，髓鞘损伤的斑马鱼荧光比正常斑马鱼弱很多，可以在荧光显微镜下明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用髓鞘保护剂组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与服用髓鞘保护剂组都摄入了等量的溴化乙锭（溴化乙锭通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用髓鞘保护剂组先摄入溴化乙锭再摄入L-甲状腺素钠之类的髓鞘保护剂。服用髓鞘保护剂后，我们对斑马鱼整体进行荧光染色，对斑马鱼髓鞘进行定量。【结果展示】图1. 斑马鱼多发性硬化症表型图黄色箭头为斑马鱼髓鞘细胞可以看到，模型对照组的髓鞘细胞荧光强度较正常对照组明显减弱，服用髓鞘保护剂组的髓鞘细胞荧光强度明显增强。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用髓鞘保护剂组的髓鞘细胞荧光强度明显增强，并未出现模型对照组明显髓鞘损伤的情况。2.本实验证实了L-甲状腺素钠具有明显治疗多发性硬化症的功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】肿瘤治疗中一个普遍存在的问题就是多药耐药。在化疗引起的肿瘤耐药机制中，肿瘤细胞的P-糖蛋白（P-gp）表达水平升高是主要机制之一。P-gp是一种细胞外转运子，P-gp表达水平升高会导致进入肿瘤细胞会很快被转运到细胞外，导致肿瘤细胞内的化疗药浓度达不到杀死肿瘤细胞的浓度，进而产生耐药性。让正常斑马鱼摄入荧光底物（呈红色），由于P-gp的存在，正常斑马鱼将荧光底物泵出体外，残留在体内的荧光底物很少；而用P-gp抑制剂环孢菌素A处理后，P-gp的活性受到抑制，P-gp荧光底物不能被排出，残留在斑马鱼体内的荧光底物增多。若某种药物能够增加荧光底物在斑马鱼体内的存留，则其可能是潜在的P-gp抑制剂。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和服用P-gp抑制剂组。斑马鱼提前P-gp抑制剂数小时，而正常斑马鱼和服用P-gp抑制剂组都摄入了等量的荧光底物（荧光底物通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。一定时间后，观察斑马鱼卵黄囊荧光底物的残留情况（卵黄囊荧光强度）来体现P-gp抑制剂逆转多药耐药作用。【结果展示】图1. 斑马鱼多药耐药表型图可以看到，服用P-gp抑制剂组的斑马鱼卵黄囊明显比正常对照组的亮，说明其对P-gp有显著的抑制作用。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用P-gp抑制剂组的斑马鱼卵黄囊明显比正常对照组的亮，说明其对P-gp有显著的抑制作用。2.本实验证实了环孢菌素A、维拉帕米具有逆转多药耐药作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼与哺乳动物有相似的神经系统。在哺乳动物体内起到睡眠调节作用的分子和细胞群（单胺能、胆碱能、下丘脑素能）的斑马鱼体内大部分是守恒的。各种催眠药物如H1组胺能拮抗剂、褪黑激素激动剂、-2肾上腺素能激动剂和γ-氨基丁酸（GABA）能调节剂在斑马鱼体内的反应也很保守。GABA是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经传达物质。戊四唑（PTZ）是GABA抑制剂，小剂量PTZ可诱导既有躁狂症又有抑郁症的双相精神障碍，从而造成失眠。患有失眠症的斑马鱼会表现出行为异常，表现为总运动距离明显增加，可以用行为分析仪观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和安神助眠剂组。其中正常对照组未摄入PTZ，模型对照组与安神助眠剂组都摄入了等量的PTZ（PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。安神助眠剂组在摄入PTZ前服用睡安片之类的安神助眠剂。服用一段时间安神助眠剂后，我们通过行为分析仪检测斑马鱼的总运动距离。【结果展示】图1. 斑马鱼的运动轨迹图红色线条表示快速运动轨迹，绿色线条表示中速运动轨迹，黑色线条表示慢速运动轨迹可以看到，服用安神助眠剂组的运动明显比加了模型对照组减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用安神助眠剂组的总运动距离相对于模型对照组明显减少，能缓解斑马鱼的躁狂症。2.本实验证实了睡安片具有安神助眠功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼与哺乳动物有相似的神经系统。在哺乳动物体内起到睡眠调节作用的分子和细胞群（单胺能、胆碱能、下丘脑素能）的斑马鱼体内大部分是守恒的。各种催眠药物如H1组胺能拮抗剂、褪黑激素激动剂、-2肾上腺素能激动剂和γ-氨基丁酸（GABA）能调节剂在斑马鱼体内的反应也很保守。GABA是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经传达物质。戊四唑（PTZ）是GABA抑制剂，小剂量PTZ可诱导既有躁狂症又有抑郁症的双相精神障碍，从而造成失眠。患有失眠症的斑马鱼会表现出行为异常，表现为总运动距离明显增加，可以用行为分析仪观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和安神助眠剂组。其中正常对照组未摄入PTZ，模型对照组与安神助眠剂组都摄入了等量的PTZ（PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。安神助眠剂组在摄入PTZ前服用睡安片之类的安神助眠剂。服用一段时间安神助眠剂后，我们通过行为分析仪检测斑马鱼的总运动距离。【结果展示】图1. 斑马鱼的运动轨迹图红色线条表示快速运动轨迹，绿色线条表示中速运动轨迹，黑色线条表示慢速运动轨迹可以看到，服用安神助眠剂组的运动明显比加了模型对照组减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用安神助眠剂组的总运动距离相对于模型对照组明显减少，能缓解斑马鱼的躁狂症。2.本实验证实了睡安片具有安神助眠功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】Caspase家族在细胞凋亡的调控上起着重要的作用。Caspase分为三大类：凋亡启动因子、凋亡执行因子和炎症介导因子。凋亡启动因子在级联反应的上游，包括（Caspase-8和Caspase-9）等，能识别和激活下游的Caspase。Caspase-9参与线粒体途径介导的细胞凋亡。凋亡执行因子在级联反应的下游，包括Caspase-3和Caspase-7等，作用于其特异性底物并导致细胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中的，最重要的凋亡执行者之一，大多数引发细胞凋亡的因素，最终均需要通过caspase-3介导的信号传递途径，它的活化是凋亡进入不可逆阶段的标志。我们评价斑马鱼对caspase的诱导作用有3个指标：1.对caspase 3的诱导作用；2.对caspase 8的诱导作用；3.对caspase 9的诱导作用。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和供服用/注射试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射供试品一段时间后，利用特异性试剂盒检测斑马鱼体内caspase的活性。【结果展示】图1. 斑马鱼caspase3活性与正常对照组比较，*** p < 0.001图2. 斑马鱼caspase8活性与正常对照组比较，*** p < 0.001图3. 斑马鱼caspase9活性与正常对照组比较，*** p < 0.001可以看到，服用/注射供试品组与正常对照组比较caspase活性明显上升。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼caspase活性明显上升，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼caspase有诱导作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】细胞色素P450酶是许多同工酶组成的超大家族，主要位于肝脏微粒体中，参与生物体许多内源性和外源性物质的生物转化。许多临床相关药物间的相互作用与抑制和/或诱导CYP酶有关，改变CYP酶的活性对药效有重要影响，有时甚至会威胁生命。在众多肝脏细胞色素P450酶家族中，CYP3A4和CYP2D6与70%以上的药物代谢有关，其中CYP3A4占50%以上，而CYP2D6占20%左右，因此目前药物代谢研究集中于评价药物对CYP3A4和CYP2D6的影响。我们评价斑马鱼对细胞色素P450的影响作用有2个指标：1.对CYP3A4的影响作用；2.对CYP2D6的影响作用。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，利用特异性试剂盒检测斑马鱼体内细胞色素P450的活性。【结果展示】图1. 斑马鱼CYP3A4活性与正常对照组比较，*** p < 0.001图2. 斑马鱼CYP2D6活性与正常对照组比较，*** p < 0.001可以看到，服用/注射供试品组斑马鱼细胞色素P450活性抑制。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼细胞色素P450活性明显抑制，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼细胞色素P450有抑制作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】帕金森病是一种影响运动能力的退行性神经系统疾病，一般认为与黑质纹状体的多巴胺能通路破坏有关。中脑黑质多巴胺能神经元大量死亡可导致多巴胺减少，不能正常传递运动信号，乙酰胆碱功能也相对增强，导致帕金森患者出现静止性震颤和肌肉僵直等典型的运动症状。斑马鱼由于体积小、胚胎和早期幼鱼透明、神经系统在胚胎发育4天时就已发育成熟，在胚胎时期就能观察到完整的中枢神经系统。斑马鱼胚胎透明，能观察到多巴胺长投射纤维在脑和脊髓的分布，对帕金森病的发病机制研究有重要作用。6-OHDA是一种能有效导致多巴胺神经元变性的神经毒剂，广泛用于动物帕金森模型。诺米芬辛是4一氢异喹啉衍化的三环类化合物，它抑制多巴胺及NA的摄取，主要是通过抑制多巴胺转运体对生物体起作用。经过行为学分析仪，患有帕金森病的斑马鱼的运动距离明显减少；经过免疫组化染色，患有帕金森病的斑马鱼多巴胺神经元面积明显减少。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用帕金森病治疗药物组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与阳性对照组都摄入了等量的6-OHDA（6-OHDA通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。帕金森病治疗药物组在摄入6-OHDA的同时摄入诺米芬新之类的帕金森治疗药物。服用一段时间帕金森治疗药物后，我们用行为学分析仪测定斑马鱼的运动总距离，并对斑马鱼体内多巴胺神经元进行免疫组化染色，分析多巴胺神经元面积变化。【结果展示】图1. 各实验组斑马鱼运动总运动距离与模型对照组比较，*p< 0.05可以看到，模型对照组斑马鱼的运动总距离与正常对照组相比明显减少，帕金森病治疗药物组的运动总距离与正常对照组较相似，没有明显的减少。图2. 帕金森病多巴胺神经元免疫组化染色黄色区域为定量区域可以看到，模型对照组的多巴胺神经元面积与正常对照组相比明显减小，帕金森病治疗药物组的多巴胺神经元面积与正常对照组比较相似，没有明显的减小。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用帕金森病治疗药物组的运动总距离、多巴胺神经元面积与正常对照组相似，并未出现模型对照组运动总距离明显减少和多巴胺神经元面积明显减小的情况。2.本实验证实了诺米芬新具有防治帕金森病的作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼的骨骼看似与人类差别明显，实际上它的生长发育过程和调控机制与哺乳动物高度相似。而且斑马鱼骨骼发育迅速，适合快速建立骨骼疾病模型。在大量摄入糖皮质激素（以泼尼松为例）后，斑马鱼会出现继发性骨质疏松。骨密度几乎由骨骼中钙含量来反映，应用特异性地结合钙的荧光染料染色（呈绿色），用其荧光强度可反映骨密度。斑马鱼骨骼染色后经荧光显微镜采集到的荧光强度能够客观反映骨密度。【实验方案】我们将测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用强健骨骼产品组。其中正常对照组未加入泼尼松，模型对照组与服用强健骨骼产品组加入了等量的泼尼松（泼尼松通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用强健骨骼产品组在加入泼尼松的同时加入碳酸钙、维生素D3之类的强健骨骼产品。服用一段时间强健骨骼产品后，我们对斑马鱼整体做钙黄绿素染色，观察脊椎骨荧光强度。【结果展示】 图1. 斑马鱼脊椎骨表型图黄色虚线区域为脊椎骨可以看到，服用强健骨骼产品的脊椎骨骨密度与正常对照组比较相似，没有明显的骨质疏松。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用强健骨骼产品组的骨密度与未经泼尼松处理的正常对照组相似，并未出现模型对照组的骨质疏松的情况。2.本实验证实了碳酸钙、维生素D3具有显著的强健骨骼功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能，包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。而且斑马鱼幼鱼通体透明，血细胞在心脏和血液循环系统的堆积非常容易观察，因而利用斑马鱼模型研究心血管毒性极为方便。我们评价斑马鱼心血管毒性有4个指标：1.心率；2.心节律；3.心包水肿面积；4.静脉瘀血面积。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼的心脏进行观察评价。【结果展示】图1. 斑马鱼心血管毒性表型图红色虚线框内为心脏可以看到，服用/注射供试品组的斑马鱼出现明显的心包水肿。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼出现明显的心包水肿，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有心血管毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能，包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。而且斑马鱼幼鱼通体透明，血细胞在心脏和血液循环系统的堆积非常容易观察，因而利用斑马鱼模型研究心血管毒性极为方便。我们评价斑马鱼心血管毒性有4个指标：1.心率；2.心节律；3.心包水肿面积；4.静脉瘀血面积。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼的心脏进行观察评价。【结果展示】图1. 斑马鱼心血管毒性表型图红色虚线框内为心脏可以看到，服用/注射供试品组的斑马鱼出现明显的心包水肿。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的斑马鱼出现明显的心包水肿，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有心血管毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能，包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。斑马鱼对典型的心脏毒素的药理学反应与人类相似。斑马鱼受精后48 h，心血管系统功能全面，呈现出例子通道和代谢过程的复杂性。因此，可以应用斑马鱼评价药物对心衰的防治作用。维拉帕米是苯烷胺类钙离子拮抗剂,其诱导心力衰竭的药理学基础有以下三方面: （1）对心脏的抑制作用,即负性频率、负性传导及负性肌力作用,且为剂量依赖性;（2）扩张血管作用,即对外周血管具有明显的扩张作用,使外周阻力降低,平均动脉压下降; （3）减少冠脉血流,降低心肌血供。我们用维拉帕米建立斑马鱼心衰模型。患有心衰的斑马鱼与正常斑马鱼比较，出现心包水肿、静脉瘀血、心搏出量减少和血流速度减慢，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和抗心衰药物组。其中正常对照组未摄入维拉帕米，模型对照组与抗心衰药物组都摄入了等量的维拉帕米（维拉帕米通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。抗心衰药物组在摄入维拉帕米的同时加入地高辛、美托洛尔类的抗心衰药物。服用一段时间抗心衰药物后，观察斑马鱼心包水肿和静脉淤血的情况；用心跳血流分析系统检测心搏出量和血流速度的情况。【结果展示】图1. 斑马鱼心衰表型图黄色虚线区域为心脏，绿色虚线区域为静脉淤血可以看到，服用抗心衰药物组的心包面积和静脉瘀血面积与未摄入维拉帕米的正常对照组基本相似，没有明显的心衰情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗心衰药物组的心包面积和静脉瘀血面积与未摄入维拉帕米的正常对照组基本相似，没有出现模型对照组心包水肿、静脉瘀血的情况。2.本实验证实了地高辛、美托洛尔具有明显的心衰防治（心脏功能改善）作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）