【评价原理】目前国际上公认的药物毒性与安全性评估实验方法分为体外与体内实验2种。斑马鱼实验为整体动物研究，能反映化合物吸收、分布、代谢与排泄的过程。而且，斑马鱼与人类基因组的相似度高达87%，有与人类近似的毒性特征和信号传导通路，斑马鱼的各种器官和组织在解剖学、生理学和分子水平上类似于哺乳动物，因此是一种可比性较强的模式生物，可以用于各种类型供试品的急性毒性评价。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体进行观察评价，观察斑马鱼心脏、脑部、耳、下颌、眼、肝脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、鳍、体长、身体着色、循环系统、身体水肿和出血等毒性反应情况，统计毒性发生率。【结果展示】图1. 斑马鱼胚胎毒性表型图可以看到，服用/注射供试品组的眼变小、心包水肿、肝脏变性、卵黄囊吸收延迟、肾性水肿、胃肠道发育延迟。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的组织器官产生明显的急性毒性表型，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有急性毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】目前国际上公认的药物毒性与安全性评估实验方法分为体外与体内实验2种。斑马鱼实验为整体动物研究，能反映化合物吸收、分布、代谢与排泄的过程。而且，斑马鱼与人类基因组的相似度高达87%，有与人类近似的毒性特征和信号传导通路，斑马鱼的各种器官和组织在解剖学、生理学和分子水平上类似于哺乳动物，因此是一种可比性较强的模式生物，可以用于各种类型供试品的急性毒性评价。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体进行观察评价，观察斑马鱼心脏、脑部、耳、下颌、眼、肝脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、鳍、体长、身体着色、循环系统、身体水肿和出血等毒性反应情况，统计毒性发生率。【结果展示】图1. 斑马鱼胚胎毒性表型图可以看到，服用/注射供试品组的眼变小、心包水肿、肝脏变性、卵黄囊吸收延迟、肾性水肿、胃肠道发育延迟。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的组织器官产生明显的急性毒性表型，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有急性毒性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】蛋黄粉中含有大量的脂肪、胆固醇和卵磷脂等。由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统，如肝脏、肠道等，消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。用蛋黄粉喂饲斑马鱼，相当于摄入了大量脂肪。经过脂肪特异性荧光染色（呈红色），摄入大量蛋黄粉的斑马鱼的肠道和血管会明显比正常斑马鱼的肠道和血管要红很多，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。【实验方案】受测试斑马鱼均摄入蛋黄粉（蛋黄粉通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内），饲喂数天后，我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和服用抑脂产品组服用抑脂产品组摄入奥利司他之类的抑脂产品。服用一段时间抑脂产品后，我们对斑马鱼做脂肪特异性染色，观察肠道和血管中的脂肪变化。【结果展示】图1. 斑马鱼肠腔和血管中的脂肪染色表型图虚线及箭头表示染色后的脂肪区域，区域内红色代表脂肪可以看到，服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少，未出现模型对照组明显脂肪沉积的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少，未出现模型对照组肠腔和血管中明显脂肪沉积的情况。2.本实验证实了奥利司他具有明显抑脂功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】近年来，随着工业化的发展，空气污染越来越严重，雾霾天也越来越多，对人的侵害也越来越严重。二氧化硫、氮氧化物、可吸入颗粒物（PM10）和细颗粒物（PM2.5）是雾霾的主要组成成分。研究表明，进入斑马鱼和大鼠体内的纳米活性炭颗粒能通过肠道的杯状细胞分泌而排泄，这一新颖的纳米排泄途径被命名为肠杯状细胞分泌通路（IGCSP)。用红色荧光微球模拟PM2.5微粒，激活斑马鱼炎症机制，引起其体内吞噬细胞的吞噬作用肠道分泌得以将异物排除。根据体内荧光微球的数量（呈红色），抗雾霾剂组斑马鱼体内微球数量明显减少。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和抗雾霾剂组。其中模型对照组与服用抗雾霾剂组都给予了等量的荧光微球（荧光微球通过注射方式到斑马鱼体内）。抗雾霾剂组在注射荧光微球的同时摄入冬虫夏草之类的抗雾霾剂。服用一段时间抗雾霾剂后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼体内荧光微球数量的变化来反映机体清除PM2.5的能力。【结果展示】图1. 斑马鱼抗雾霾表型图红色点为荧光微球可以看到，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了冬虫夏草具有抗雾霾功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】近年来，随着工业化的发展，空气污染越来越严重，雾霾天也越来越多，对人的侵害也越来越严重。二氧化硫、氮氧化物、可吸入颗粒物（PM10）和细颗粒物（PM2.5）是雾霾的主要组成成分。研究表明，进入斑马鱼和大鼠体内的纳米活性炭颗粒能通过肠道的杯状细胞分泌而排泄，这一新颖的纳米排泄途径被命名为肠杯状细胞分泌通路（IGCSP)。用红色荧光微球模拟PM2.5微粒，激活斑马鱼炎症机制，引起其体内吞噬细胞的吞噬作用肠道分泌得以将异物排除。根据体内荧光微球的数量（呈红色），抗雾霾剂组斑马鱼体内微球数量明显减少。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和抗雾霾剂组。其中模型对照组与服用抗雾霾剂组都给予了等量的荧光微球（荧光微球通过注射方式到斑马鱼体内）。抗雾霾剂组在注射荧光微球的同时摄入冬虫夏草之类的抗雾霾剂。服用一段时间抗雾霾剂后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼体内荧光微球数量的变化来反映机体清除PM2.5的能力。【结果展示】图1. 斑马鱼抗雾霾表型图红色点为荧光微球可以看到，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了冬虫夏草具有抗雾霾功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】抑郁症是一种常见的精神疾病，主要表现为情绪低落，兴趣减低，悲观，思维迟缓，缺乏主动性，自责自罪，饮食、睡眠差，担心自己患有各种疾病，感到全身多处不适，严重者可出现自杀念头和行为，目前国内的抑郁症情况越来越严峻，所以对于如何缓解抑郁迫在眉睫。抑郁症患者单胺类神经递质含量较少，单胺氧化酶活性较平常人增高，单胺氧化酶抑制剂（MAO）能抑制单胺类酶活性，从而对机体内的神经递质例如5-HT，Dopamine能减少降解的作用，那么神经系统内的这些神经递质含量活性会持续性升高，从而有一定治疗抑郁症的结果。我们评价斑马鱼抗抑郁作用指标：单胺氧化酶活性的检测。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组与抗抑郁剂组。其中正常对照组未经任何处理。之后通过化学发光法测量组织内单胺氧化酶的相对活性。【结果展示】【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗抑郁剂情况与对照组相比较，机体内的单胺类氧化酶活性明显降低。2.本实验证实了盐酸司来吉兰，吗氯贝氨等具有显著的降低单胺氧化酶活性的作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87％，斑马鱼血液系统与人类血液系统的血小板和凝血因子有许多共同点。大剂量肾上腺素（AH）能够引起动物血管内皮损伤和血小板活性增强，造成体内处于高凝状态。肾上腺素的大量增加模拟人体暴怒、大怒，导致气机阻滞，气滞血瘀。经过特异性红细胞染色（邻联茴香胺染色），患有血栓的斑马鱼在尾部静脉会布满红细胞，可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗血栓药物组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与服用抗血栓药物组都摄入了等量的AH（AH通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用抗血栓药物组在摄入AH的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷等抗血栓药物。服用一段时间抗血栓药物后，我们对斑马鱼整体进行特异性红细胞染色，观察尾部静脉血栓情况。【结果展示】图1. 斑马鱼尾部静脉血栓表型图可以看到，服用抗血栓药物组的尾部静脉血栓情况与正常对照组比较相似，没有明显的血栓。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗血栓药物组的血栓情况与正常对照组相似，并未出现模型对照组尾部静脉大量血栓的情况。2.本实验证实了阿司匹林和氯吡格雷具有明显抗血栓作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】甲萘醌是一种氧化剂，通过细胞内还原酶系统（微粒体的P450还原酶和线粒体的呼吸链还原酶），产生不稳定的半醌，进入氧化还原循环，产生活性氧族。用甲萘醌可诱导斑马鱼建立氧化应激模型。经过特异性荧光染色（呈绿色，主要定位于细胞核和线粒体），发生氧化应激反应斑马鱼全身明显比正常斑马鱼绿很多，可以用荧光显微镜下观察到斑马鱼体内的活性氧含量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和抗氧化剂组。其中正常对照组未摄入甲萘醌，模型对照组与抗氧化剂组都摄入了等量的甲萘醌（甲萘醌通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。抗氧化剂组在摄入甲萘醌之后摄入还原型谷胱甘肽之类的抗氧化剂。服用一定时间抗氧化剂后，我们对斑马鱼整体做活性氧染色，观察整体绿色荧光强度的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼活性氧表型图绿色荧光为活性氧可以看到，抗氧化剂组的荧光强度较正常对照组强，但较模型对照组明显减弱。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，抗氧化剂组的荧光强度比模型对照组弱。2.本实验证实了还原型谷胱甘肽具有明显抗氧化功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】甲萘醌是一种氧化剂，通过细胞内还原酶系统（微粒体的P450还原酶和线粒体的呼吸链还原酶），产生不稳定的半醌，进入氧化还原循环，产生活性氧族。用甲萘醌可诱导斑马鱼建立氧化应激模型。经过特异性荧光染色（呈绿色，主要定位于细胞核和线粒体），发生氧化应激反应斑马鱼全身明显比正常斑马鱼绿很多，可以用荧光显微镜下观察到斑马鱼体内的活性氧含量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和抗氧化剂组。其中正常对照组未摄入甲萘醌，模型对照组与抗氧化剂组都摄入了等量的甲萘醌（甲萘醌通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。抗氧化剂组在摄入甲萘醌之后摄入还原型谷胱甘肽之类的抗氧化剂。服用一定时间抗氧化剂后，我们对斑马鱼整体做活性氧染色，观察整体绿色荧光强度的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼活性氧表型图绿色荧光为活性氧可以看到，抗氧化剂组的荧光强度较正常对照组强，但较模型对照组明显减弱。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，抗氧化剂组的荧光强度比模型对照组弱。2.本实验证实了还原型谷胱甘肽具有明显抗氧化功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。用手术刀截断斑马鱼尾鳍，诱发急性损伤，促使斑马鱼中性粒细胞发生免疫应答。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到尾鳍截断的斑马鱼创面中性粒细胞数量比正常斑马鱼明显增加。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中正常对照组未截断尾鳍，模型对照组和服用抗炎药组均截断尾鳍。服用抗炎药组在切断尾鳍后摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼尾鳍中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼尾鳍炎症中性粒细胞表型图黄色虚线区域为尾鳍，绿色颗粒为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组尾鳍中性粒细胞与正常对照组相似，未出现创面中性粒细胞募集情况。以TNF-α、COX-2基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼TNF-α基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，TNF-α基因表达明显下调。图3. 斑马鱼COX-2基因相对表达量与模型对照组比较，***p < 0.001可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，COX-2基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射抗炎药组尾鳍中性粒细胞数量与正常对照组相似，未出现创面中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。用手术刀截断斑马鱼尾鳍，诱发急性损伤，促使斑马鱼中性粒细胞发生免疫应答。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到尾鳍截断的斑马鱼创面中性粒细胞数量比正常斑马鱼明显增加。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中正常对照组未截断尾鳍，模型对照组和服用抗炎药组均截断尾鳍。服用抗炎药组在切断尾鳍后摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼尾鳍中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼尾鳍炎症中性粒细胞表型图黄色虚线区域为尾鳍，绿色颗粒为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组尾鳍中性粒细胞与正常对照组相似，未出现创面中性粒细胞募集情况。以TNF-α、COX-2基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼TNF-α基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，TNF-α基因表达明显下调。图3. 斑马鱼COX-2基因相对表达量与模型对照组比较，***p < 0.001可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，COX-2基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射抗炎药组尾鳍中性粒细胞数量与正常对照组相似，未出现创面中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。硫酸铜损伤斑马鱼神经丘（斑马鱼体表侧线器的末稍器官），造成神经丘细胞死亡，斑鱼的中性粒细胞发生免疫应答，聚集在神经丘周围，吞噬死亡的细胞 。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到斑马鱼体表侧线上的中性粒细胞比正常斑马鱼明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中正常对照组未摄入硫酸铜，模型对照组和服用/注射抗炎药组均摄入硫酸铜（硫酸铜通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射抗炎药组在摄入硫酸铜之前摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼体表侧线上的中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼体表侧线上中性粒细胞表型图黄色箭头所指为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组侧线上中性粒细胞与正常对照组相似，未出现中性粒细胞募集情况。以IL-1β基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼IL-1β基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-1β基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗炎药组侧线上中性粒细胞数量与正常对照组数量相当，未出现模型对照组中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。硫酸铜损伤斑马鱼神经丘（斑马鱼体表侧线器的末稍器官），造成神经丘细胞死亡，斑鱼的中性粒细胞发生免疫应答，聚集在神经丘周围，吞噬死亡的细胞 。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到斑马鱼体表侧线上的中性粒细胞比正常斑马鱼明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎药组。其中正常对照组未摄入硫酸铜，模型对照组和服用/注射抗炎药组均摄入硫酸铜（硫酸铜通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用/注射抗炎药组在摄入硫酸铜之前摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼体表侧线上的中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼体表侧线上中性粒细胞表型图黄色箭头所指为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组侧线上中性粒细胞与正常对照组相似，未出现中性粒细胞募集情况。以IL-1β基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼IL-1β基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-1β基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗炎药组侧线上中性粒细胞数量与正常对照组数量相当，未出现模型对照组中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位处，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。内毒素（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分，我们将其注射到斑马鱼卵黄囊，诱导炎症介质的产生。斑马鱼的中性粒细胞发生免疫应答，聚集在卵黄囊。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到斑马鱼卵黄囊的中性粒细胞比正常斑马鱼明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎组。其中正常对照组未注射LPS，模型对照组和抗炎组均注射LPS（LPS通过注射到卵黄囊的方式摄入到斑马鱼体内）。抗炎药组在注射LPS之前摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼卵黄囊内中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼卵黄囊内中性粒细胞表型图黄色虚线区域为卵黄囊，绿色颗粒为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组卵黄囊内中性粒细胞比模型对照组明显，未出现中性粒细胞大量募集情况。以IL-6、IL-10基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼IL-6基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-6基因表达明显下调。图3. 斑马鱼IL-10基因相对表达量与模型对照组比较，***p < 0.001可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-10基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射抗炎药组卵黄囊内中性粒细胞数量比正常对照组略多，未出现模型对照组中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】炎症是免疫系统对组织损伤和感染的一种反应，主要特点就是白细胞（粒细胞、巨噬细胞）会聚集在感染组织周围。斑马鱼的免疫系统非常类似于哺乳动物。创伤发生时，中性粒细胞、巨噬细胞对创伤性炎症几乎同时作出应答，中性粒细胞迁移速度快，先募集到损伤部位处，随后巨噬细胞才到达。数小时后，炎症开始消退，巨噬细胞和中性粒细胞离开损伤部位。内毒素（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分，我们将其注射到斑马鱼卵黄囊，诱导炎症介质的产生。斑马鱼的中性粒细胞发生免疫应答，聚集在卵黄囊。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到斑马鱼卵黄囊的中性粒细胞比正常斑马鱼明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗炎组。其中正常对照组未注射LPS，模型对照组和抗炎组均注射LPS（LPS通过注射到卵黄囊的方式摄入到斑马鱼体内）。抗炎药组在注射LPS之前摄入吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸之类的抗炎药。服用一段时间抗炎药后，我们观察斑马鱼卵黄囊内中性粒细胞数量，并通过Q-PCR检测TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。【结果展示】图1. 斑马鱼卵黄囊内中性粒细胞表型图黄色虚线区域为卵黄囊，绿色颗粒为中性粒细胞可以看到，服用/注射抗炎药组卵黄囊内中性粒细胞比模型对照组明显，未出现中性粒细胞大量募集情况。以IL-6、IL-10基因为例，提供柱状图。图2. 斑马鱼IL-6基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.01可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-6基因表达明显下调。图3. 斑马鱼IL-10基因相对表达量与模型对照组比较，***p < 0.001可以看到，服用/注射抗炎药组斑马鱼与模型对照组比较，IL-10基因表达明显下调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射抗炎药组卵黄囊内中性粒细胞数量比正常对照组略多，未出现模型对照组中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调。2.本实验证实了吲哚美辛、阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸具有显著的抗炎作用，且抑制TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症相关因子的表达。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

暴露于生活环境中的皮肤，接触到有毒有害物质后可能引起一定程度的皮肤炎症，出现皮肤红肿、瘙痒等现象。一些医美类化妆品除具有常规护肤功效外还能起到抗炎舒缓作用。通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料抗炎舒缓功效。【评价原理】化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症，炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。十二烷基磺酸钠（SLS）是人体皮肤刺激物模型斑贴试验常见的阳性对照物，SLS刺激后能诱发表皮炎症细胞浸润，刺激物进入斑马鱼体内，诱导炎症反应，中性粒细胞发生免疫应答，向皮肤表皮迁移并聚集。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组（供试品通过溶解到标准稀释水中的方式接触到斑马鱼皮肤）。正常对照组不做处理，模型对照组仅用SLS处理，供试品组在用SLS的同时添加受试化妆品。孵育一段时间后，我们将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照，以皮肤表面中性粒细胞数量评价供试品的抗炎舒缓功效。【结果展示】图1 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域，绿色荧光点为中性粒细胞可以看到，供试品组斑马鱼的中性粒细胞数目比模型对照组少，与正常对照组相似。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验，水溶给予供试品组的斑马鱼中性粒细胞数目比模型对照组少，与正常对照组相似。。2.本实验证实了该供试品具有抗炎舒缓功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼拥有与人类相似的神经组织器官，下丘脑、丘脑、基底神经节、边缘系统等都是与焦虑相关的脑区。1-（3-氯苯基）哌嗪盐酸盐(mCPP)是一种非特异性5 -羟色胺（5-HT）能激动剂，5-HT广泛存在于上述脑区。研究表明mCPP可通过影响5-HT通路而诱导焦虑。氨基丁酸（GABA）是哺乳动物中枢神经系统中广泛分布的一种抑制性神经递质，脑中GABA水平的下降会产生抑郁、紧张、焦虑、失眠等情绪问题。谷氨酸脱羧酶(GAD)是谷氨酸向GABA转化的限速酶。单胺氧化酶（MAO）是一种具有多个结合部位的单一分子酶，对底物的特异性不高，可使多种胺类氧化脱氨，从而影响多种神经递质的代谢，斑马鱼体内只有一种Mao序列，具有人MAO-A和人MAO-B的性质，且与人MAO-A更相似。在大多数物种中，MAO-A降解5-HT。研究表明斑马鱼的运动活动和趋向性是反映焦虑的两个重要指标。GAD2基因与焦虑和情感障碍关系密切。5-HT通过5-羟色胺受体2A（htr2aa）增加焦虑样行为。GABA-A受体在焦虑发生中起重要作用。研究表明MAO-A/B双敲除小鼠的5-HT分解降低，焦虑增加。因此，我们可以通过检测斑马鱼的行为来判断斑马鱼是否产生焦虑。同时还可以通过检测焦虑相关基因（如gabra1、gad2、htr2aa基因）相对表达量以及MAO含量来评价斑马鱼是否产生焦虑。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用焦虑改善剂组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与服用焦虑改善剂组都摄入了等量的mCPP（mCPP通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用焦虑改善剂组在摄入mCPP的同时摄入司来吉兰之类的焦虑改善剂。服用一段时间焦虑改善剂后，我们（1）分析斑马鱼的总运动距离；（2）用q-PCR检测焦虑相关基因表达；（3）用试剂盒检测单胺氧化酶（MAO）活性。【结果展示】（1）行为学：可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼gabra1基因相对表达量与正常对照组比较相似，较模型对照组明显增加。可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼htr2aa基因相对表达量与正常对照组比较相似，较模型对照组明显降低。（3）单胺氧化酶（MAO）活性：图5. 斑马鱼单胺氧化酶活性量与模型对照组比较，*p < 0.05可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼单胺氧化酶活性与正常对照组比较相似，较模型对照组明显降低。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用焦虑改善剂组斑马鱼总运动距离、gabra1、gad2和htr2aa基因相对表达量及MAO活性与正常对照组相似。2.本实验证实了司来吉兰有明显抗焦虑功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】斑马鱼拥有与人类相似的神经组织器官，下丘脑、丘脑、基底神经节、边缘系统等都是与焦虑相关的脑区。1-（3-氯苯基）哌嗪盐酸盐(mCPP)是一种非特异性5 -羟色胺（5-HT）能激动剂，5-HT广泛存在于上述脑区。研究表明mCPP可通过影响5-HT通路而诱导焦虑。氨基丁酸（GABA）是哺乳动物中枢神经系统中广泛分布的一种抑制性神经递质，脑中GABA水平的下降会产生抑郁、紧张、焦虑、失眠等情绪问题。谷氨酸脱羧酶(GAD)是谷氨酸向GABA转化的限速酶。单胺氧化酶（MAO）是一种具有多个结合部位的单一分子酶，对底物的特异性不高，可使多种胺类氧化脱氨，从而影响多种神经递质的代谢，斑马鱼体内只有一种Mao序列，具有人MAO-A和人MAO-B的性质，且与人MAO-A更相似。在大多数物种中，MAO-A降解5-HT。研究表明斑马鱼的运动活动和趋向性是反映焦虑的两个重要指标。GAD2基因与焦虑和情感障碍关系密切。5-HT通过5-羟色胺受体2A（htr2aa）增加焦虑样行为。GABA-A受体在焦虑发生中起重要作用。研究表明MAO-A/B双敲除小鼠的5-HT分解降低，焦虑增加。因此，我们可以通过检测斑马鱼的行为来判断斑马鱼是否产生焦虑。同时还可以通过检测焦虑相关基因（如gabra1、gad2、htr2aa基因）相对表达量以及MAO含量来评价斑马鱼是否产生焦虑。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用焦虑改善剂组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与服用焦虑改善剂组都摄入了等量的mCPP（mCPP通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用焦虑改善剂组在摄入mCPP的同时摄入司来吉兰之类的焦虑改善剂。服用一段时间焦虑改善剂后，我们（1）分析斑马鱼的总运动距离；（2）用q-PCR检测焦虑相关基因表达；（3）用试剂盒检测单胺氧化酶（MAO）活性。【结果展示】（1）行为学：图1. 斑马鱼总运动距离与模型对照组比较，***p < 0.001可以看到，服用焦虑改善剂组的运动距离与正常对照组比较相似，运动距离没有明显的增加。（2）gabra1、gad2、htr2aa基因相对表达量：图2. 斑马鱼gabra1基因相对表达量与模型对照组比较，*p < 0.05可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼gabra1基因相对表达量与正常对照组比较相似，较模型对照组明显增加。图3. 斑马鱼gad2基因相对表达量与模型对照组比较，*p < 0.05可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼gad2基因相对表达量与正常对照组比较相似，较模型对照组明显增加。图4. 斑马鱼htr2aa基因相对表达量与模型对照组比较，**p < 0.05可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼htr2aa基因相对表达量与正常对照组比较相似，较模型对照组明显降低。（3）单胺氧化酶（MAO）活性：图5. 斑马鱼单胺氧化酶活性量与模型对照组比较，*p < 0.05可以看到，服用焦虑改善剂组斑马鱼单胺氧化酶活性与正常对照组比较相似，较模型对照组明显降低。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用焦虑改善剂组斑马鱼总运动距离、gabra1、gad2和htr2aa基因相对表达量及MAO活性与正常对照组相似。2.本实验证实了司来吉兰有明显抗焦虑功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】癫痫发作是指大脑神经元广泛同步放电所致的大脑功能紊乱。若反复发作则称为癫痫或癫痫综合征。GABA是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经传达物质。戊四唑（PTZ）是γ-氨基丁酸（简称GABA）抑制剂，大剂量PTZ可诱导癫痫发作，是哺乳动物癫痫模型中的常用诱导剂。斑马鱼已被建议作为一种替代动物模型用于研究癫痫的机制和筛选抗癫痫药。用戊四唑诱导斑马鱼后，中枢神经系统受影响，斑马鱼幼鱼表现出运动行为异常(类似人类癫痫的痉挛)和c-fos基因表达的上调。用行为分析仪记录斑马鱼的运动（快速运动类似于癫痫发作的线呈现红色），癫痫斑马鱼快速运动距离较正常斑马鱼明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入PTZ，模型对照组与服用抗癫痫药物组都摄入了等量的PTZ（PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。抗癫痫药物组在摄入PTZ之前摄入苯妥英钠、丙戊酸钠之类的抗癫痫药物。服用一段时间抗癫痫药物后，我们利用行为分析仪追踪记录斑马鱼的运动，同时检测与癫痫相关的c-fos和gabra1（GABA A受体α1）基因。【结果展示】图1. 斑马鱼癫痫表型图红线代表快速运动距离（>20mm/s抽搐）可以看到，模型对照组的快速运动距离较正常对照组明显增多，而抗癫痫药物组快速运动距离明显减少。图2. c-fos和gabra1基因图从基因图中也能看出来，模型对照组c-fos基因上调，gabra1下调，而抗癫痫药物组c-fos基因下调，gabra1上调。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，抗癫痫药物组斑马鱼运动与模型对照组比较，快速运动距离明显减少。2.本实验证实了苯妥英钠、丙戊酸钠具有抗癫痫作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】细菌感染是致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖，产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染。斑马鱼有着与哺乳动物非常相似的发育良好的免疫系统(包括特异性免疫和非特异性免疫），使得斑马鱼成为了研究病菌感染机制和筛选抗菌剂非常有用的动物模型。经过荧光标记的细菌（呈红色）注射进入斑马鱼体内，生长繁殖，可以明显地被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和服用抗菌剂组。模型对照组与服用细菌抑制剂组都注射了等量的细菌（细菌通过静脉注射的方式入到斑马鱼体内）。服用抗菌剂组在注射细菌后摄入阿奇霉素、比阿培南、利奈唑酮之类的抗菌剂。服用一段时间抗菌剂后，我们将斑马鱼置于荧光显微镜下观察细菌数量的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼体内细菌繁殖表型图白色箭头所指红色颗粒为细菌可以看到，服用抗菌剂组的体内细菌数量较模型对照组显著减少，未出现全身性感染。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗菌剂组的斑马鱼体内细菌数量较模型对照组显著减少，未出现全身性感染。2.本实验证实了阿奇霉素、比阿培南、利奈唑酮等抗生素具有显著的抑制细菌作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）