蛋白组学前处理试剂盒
产品概述
目前常规的蛋白质组样品前处理过程存在着诸多问题,如重现性差、方法稳定性不好、灵敏度不高且非常耗时及无法自动化等。针对上述问题,逸微健华推出新一代“All In One Tube”的创新产品,本产品主要是针对微量蛋白(5-100 μg)的处理,即便是没有组学背景的科研人员,也可以快速的制备前处理的样品,可用于后续的质谱分析。
产品组分及储存条件
名称 | 规格 | 储存条件 |
Lysis buffer | 1.5 ml | -20 ℃ |
Balance buffer | 5 ml | 4 ℃ |
Digest buffer | 0.5 ml | -20 ℃ |
Stop buffer | 1 ml | RT |
Wash buffer 1 | 15 ml | RT |
Wash buffer 2 | 15 ml | RT |
Elution buffer | 25 ml | RT |
Loading buffer | 5 ml | RT |
Tip柱 | 48 T | RT |
操作流程
1. 裂解
① 取20 μL的Lysis buffer加入到含有样品的EP管中,震荡混匀;
② 将含有Lysis buffer的EP管水浴95℃、10 min,然后取出冷却至室温。
2. 酶解
① 向冷却至室温的EP管中加入90 μL的Balance buffer;
② 加入1 μL的Digest buffer后混匀,37 ℃,震荡酶解12-16 h。
3. 除盐(室温)
① 向样品中加入10 μL的Stop buffer,涡旋混匀;
② 将样品转入Tip柱中,500 rpm/min,离心3-5min,直到液体全部离心下来,如果液体流速较慢,可以加大转速;
③ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 1(用之前震荡10-20 s),500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
④ 向脱盐柱中加入200 μL的Wash buffer 500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
⑤ 将脱盐柱重新放入一个新的EP管中,向脱盐柱中加入200 μL的Elution buffer,500 rpm/min,离心3-5 min,直到液体全部离心下来;
⑥重复步骤⑤,收集两次的洗脱液,冷冻干燥;
⑦加入10 μL的Loading buffer, 剧烈涡匀3 min,离心20,000 g、10 min,取适量样品,即可质谱检测。以HF-X仪器为例,上样0.5-1μg即可。
注意事项和免责说明
本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。