胰岛素(insulin)是胰腺中胰岛β细胞分泌的一种双链形式(α、β)的多肽激素,由51个氨基酸组成,其中α链包含21个氨基酸,β链包含30个氨基酸。两条链间通过两对二硫键连接,而α链自身还含有一对二硫键。胰岛素是目前已知的机体内能降低血糖的蛋白激素,不仅负责调控细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄入,利用和储存,而且抑制糖原,蛋白质和脂肪的降解发生。不同物种胰岛素功能大体相同,只是氨基酸组成上的差异。本品为基因重组技术制备的全长序列的人胰岛素,分子量大约为5800 Da,结构与天然来源的人胰岛素相同,常用作细胞培养的辅助成分,常见使用浓度为1-10 µg/mL。
Wnt3a是Wnt家族成员之一,在调节多种细胞功能,包括自我更新、增殖、分化和运动等方面发挥关键作用。Wnt家族由19种人源蛋白组成,包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b(Wnt13)、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a(Wnt14)、Wnt9b(Wnt14b)、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11和Wnt16。这些基因编码富含半胱氨酸的分泌型糖蛋白。Wnt蛋白可以与在自分泌调节中起关键作用的细胞膜受体结合,和/或通过与相邻细胞膜受体结合参与旁分泌修饰。由Wnt基因介导的信号转导通路称为Wnt信号通路。越来越多的证据表明,Wnt3a通过典型的Wnt信号通路可促进或抑制肿瘤进展,事件取决于癌症的类型。此外,Wnt3a信号转导的作用可被多种蛋白质或化学物质抑制。人Wnt-3a与小鼠、牛和犬Wnt-3a的氨基酸同源性为96%,与鸡、非洲爪哇和斑马鱼的同源性分别为89%、86%和84%。Wnt3a与Wnt3具有87%的氨基酸同源度。在胚胎发育过程中,WNT-3a对于海马体的正常发育、前后构型、体节发育和尾芽的形成都是必需的。WNT-3a还促进造血干细胞、神经干细胞和胚胎干细胞的自我更新。
肝细胞生长因子(HGF)是一种强大的间质来源的成熟肝细胞有丝分裂原,对多种组织和细胞类型起生长因子的作用。HGF通过一种被称为MET的跨膜酪氨酸激酶受体来传递信号。HGF的活性包括诱导细胞增殖、运动、形态发生、抑制细胞生长和促进神经元存活。HGF是肝再生过程中至关重要的有丝分裂原,尤其是在肝部分切除和其他肝损伤后。HGF又称散射因子和促肝细胞生成素A,是纤溶酶原S1肽酶亚家族中的一种多效性蛋白。它是一个多结构域分子,包括一个N-末端PAN/APPLE样结构域,四个Kringle结构域,以及一个没有检测到蛋白酶活性的丝氨酸蛋白酶样结构域。它在第四个Kringle结构域之后被丝氨酸蛋白酶切割,形成具有生物活性的二硫键连接的HGF,具有60 kDa的α链和30 kDa的β链。交替剪接产生缺乏蛋白酶样结构域和不同数量的Kringle结构域的人HGF亚型。人肝细胞生长因子与牛、犬、猫、鼠和大鼠肝细胞生长因子的氨基酸序列同源性为91%-94%。HGF与硫酸乙酰肝素蛋白多糖和广泛表达的受体酪氨酸激酶HGF R/c-MET结合。
Y-27632是ROCK(Rho-associated coiled-coil forming protein serine/threonine kinase)的抑制剂,可以通过与催化部位结合来抑制ROCK。这种抑制作用可被ATP竞争性逆转。Y-27632的Ki值至少是另外两种Rho效应蛋白激酶--柠檬酸激酶和蛋白激酶PKN的20-30倍。Y-27632可在10um时消除Swiss 3T3 cells的应力纤维,而不影响细胞周期的G(1)-S相变和胞质分裂。与另一种ROCK抑制剂Y-30141相比,Y-27632的抑制活性和应力纤维形成的效力是Y-30141的1/10。Y-27632通过抑制LPA诱导的粘着斑激酶和蛋白酪氨酸蛋白的磷酸化而抑制MM1细胞的迁移和形态改变,ROCK可以调节这种作用。Y-27632呈剂量依赖性抑制大鼠乳腺癌细胞株Walker256细胞的趋化和侵袭活性。Y-27632在体外也能抑制肌球蛋白轻链的磷酸化水平。Y-27632可降低人胚胎干细胞(hES)分离诱导的细胞凋亡,提高克隆成功率。Y-27632作用于人角膜上皮细胞,可促进其增殖。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种二肽,在哺乳动物细胞培养基中广泛用于替代L-谷氨酰胺。后者在溶液中不稳定,形成的氨在细胞培养中具有有害效应;L-丙氨酰-L-谷氨酰胺对热消毒具有稳定性,形成氨的效果比L-谷氨酰胺小。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺内含 0.85%(W:V) NaCl,可作为哺乳动物贴壁细胞或悬浮细胞培养添加剂。