生长因子是能够刺激细胞生长、增殖和分化的蛋白质家族,典型的是通过与细胞表面的受体结合作为信号分子。 许多生长因子有相当多的功能,一些生长因子刺激许多不同类型细胞的分裂,而另一些生长因子是特异的针对特定细胞类型。 多个生长因子经常一起参与细胞的活动。 例如, VEGF、FGF和EGF刺激血管形成。 所以,描绘出生长因子的表达方式为阐述细胞活动的生物学机制提供了宝贵的视野。美国 Signosis的生长因子复合酶免试剂可定量地测定8种蛋白 VEGF、EGF、PDGF-BB、b-NGF、SCF、TNF-a、FGF-b和TGF-b。 A. 优点: · 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种生长因子 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA-1102为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---一12x 8孔预包被板的完整操作系统. B. 原理 板条每个孔包被有针对生长因子的特异抗体,8个孔包被有8种不同抗体,一个板条8个孔可测定8种不同蛋白质。待测样品中的生长因子在固相抗体和酶标记抗体之间,可与二个抗体组成的抗体对反应。孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。生长因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。
趋化因子(RANTES)是T细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞的趋化蛋白。 RANTES由循环T细胞产生,TNF-a和IL1a诱导合成,在吸引白细胞到炎症部位过程中扮演积极角色。 借助于T细胞分泌的特殊细胞因子, Rantes也引发某些自然杀伤性细胞(NK)的增殖和活化,形成CC趋化因子激活的杀伤细胞。Rantes还是CD8+ T细胞释放的HIV抑制因子。 RANTES增加单核细胞对内皮细胞的黏附。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对鼠RANTES的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 鼠RANTES试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗鼠RANTES抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗鼠RANTES抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品鼠RANTES夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。鼠RANTES的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
细胞色素P450是一类基因超家族酶系,在多种化学物代谢中起着重要作用,这些包括化学物、甾醇、脂肪酸。P450家族中有许多可以激活不可治愈症的原,其在对各种环境化合物和药物的应答中出现高度差异性表达。由于大鼠常被选作研究毒理的动物模型,检测毒性相关的P450表达对揭示潜在的机制至关重要。美国Signosis公司大鼠p450 cDNA微孔板阵列检测试剂可检测22种CYP基因的表达。 A. 优点: 美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的大鼠p450 cDNA微孔板芯片检测试剂具有以下优点: ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。