缺氧诱导因子(HIF)被认为主要在维持氧代谢和能量代谢中发挥重要作用。HIF是异源二聚体转录因子,分别由HIF-1和HIF-2组成,与b-亚单位二聚化后,与靶基因启动子的缺氧反应因子结合。HIF活性由各种刺激物调控,包括细胞氧浓度、生长因子、致癌活性等的变化。美国Signosis 公司研发的HIF滤板法检测试剂与常规的凝胶迁移试验不同,它是一种高通量的检测方法,可同时分析多个标本,而且该方法较非放射的凝胶迁移试验简单的多,较基于P32的凝胶迁移试验安全的多。 A. 优点: 美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的HIF滤板法检测试剂,具有下列优势: · 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 · 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 · 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 · 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 B. 原理 美国Signosis 公司研发的HIF滤板法检测试剂,是基于微孔板检测HIF活性的分析方法,该方法中使用二块板---过滤板和杂交板,预标记HIF的DNA结合序列与核抽体物混合,形成HIF/探针复合物。过滤板用于保留结合的DNA序列,除去游离的DNA序列。结合的预标记的DNA序列随后从过滤板上洗脱、收集,用于微孔板杂交。捕获的DNA序列进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。
白介素-6 (IL-6)是调控免疫反应、造血、急性相反应和炎症的一种多功能细胞因子。 IL-6产生的下调涉及到几个疾病过程的病理学。 在几种疾病中观察了IL-6的水平,包括风湿性关节炎(RA)。 IL-6以促炎和抗炎细胞因子发挥作用。 IL-6由T细胞和巨噬细胞分泌刺激免疫反应。 另外, IL-6象TNFa一样也许是介入胰岛素抵抗的另一种脂肪细胞分泌产物。IL-6是许多细胞分泌的细胞因子,包括脂肪细胞和脂肪基质细胞。 IL-6的分泌在肥胖者的脂肪细胞是增加的,作为一种循环激素或胰岛素活动的局部调节剂也许有其重要性。 IL-6涉及肥胖者胰岛素抵抗的发展。 象TNF, IL-6抑制LPL表达,但是,不同于TNF, IL-6不刺激脂肪分解。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对鼠IL-6的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 鼠IL-6试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗鼠IL-6抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗鼠IL-6抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品鼠IL-6夹在捕获抗体和标记抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。鼠IL-6的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
细胞色素P450是一类基因超家族酶系,在多种化学物代谢中起着重要作用,这些包括化学物、甾醇、脂肪酸。P450家族中有许多可以激活不可治愈症的原,其在对各种环境化合物和药物的应答中出现高度差异性表达。由于大鼠常被选作研究毒理的动物模型,检测毒性相关的P450表达对揭示潜在的机制至关重要。美国Signosis公司大鼠p450 cDNA微孔板阵列检测试剂可检测22种CYP基因的表达。 A. 优点: 美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的大鼠p450 cDNA微孔板芯片检测试剂具有以下优点: ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。