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杭州环特生物科技股份有限公司

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【评价原理】通常来说,炎症是机体的一种抗病反应,机体蒙受损坏后,机体的内坏境以及内境界和外坏境之间达到新的均衡的过程中会引发组装细胞的损坏,使片面组装细胞显现变性、坏死。利用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼(MPO)作为模型,当体内炎症水平上升的时候,中性粒细胞的数量也就相对的增高,在荧光显微镜下,中性粒细胞的数量也就是表现出炎症反应程度的一个重要指标。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照与供试品组,通过服用/注射供试品一段时间后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼中性粒细胞的数量,同时检测体内炎症因子IL-6的表达情况。【结果展示】图1. 斑马鱼中性粒细胞数量(箭头所指的绿色荧光点为中性粒细胞)从实验结果可以看到,供试品组相对正常对照组斑马鱼侧线位置中性粒细胞数显著增多。图2:斑马鱼体内的中性粒细胞数量及体内炎症因子表达水平的变化从实验结果可以看到,斑马鱼供试品组相对正常对照组,IL-6炎症因子相对表达量下降。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,相对于正常对照组,服用或者注射供试品组之后,中性粒细胞增多和炎症因子上升。2.本实验证实了供试品组等具有增加中性粒细胞数量,以及促进炎性因子表达的作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的胃肠道在细胞功能和解剖学方面均与人类相似,由内皮细胞、结缔组织、外纵肌和环状肌组成。胚胎发育至26~126 hpf( hours post fertilization,受精后小时),斑马鱼胃肠道的管腔形成并不断生长,形成有功能的肠道上皮。在未喂食情况下,斑马鱼胚胎受精约72 hpf,肠道首次出现不稳定的自发收缩。伴随着发育的进行,第120~144 hpf,斑马鱼大部分的卵黄囊被吸收,肠道自发的蠕动及摄食能力增强。我们评价斑马鱼胃肠道毒性有2个指标:1.胃肠道形态的变化;2.肠蠕动功能抑制。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。摄入供试品之前提前给予食物,摄入供试品一段时间后,我们观察斑马鱼肠道表型。服用一段时间供试品后,我们观察胃肠道形态及内容物的情况。【结果展示】可以看到,斑马鱼给予食物后,食物充盈肠道。服用/注射供试品组食物明显多于正常对照组,表明肠蠕动功能被抑制。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼胃肠道形态与正常对照组比较,发生了明显的变化,且肠道蠕动功能被抑制。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有胃肠道毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼作为一种理想的人类血液毒性模型,是以其造血系统与人类造血系统在进化上高度保守性尾前提的。通过与人类造血类似的信号传导通路,斑马鱼形成了以包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统。斑马鱼可建立多种血液系统毒性模型,主要包括红细胞、白细胞、出凝血障碍性毒性三大类,因此主要与斑马鱼中性粒细胞、巨噬细胞、红细胞和血流量相关。由于斑马鱼具有身体积小、实验周期短等优点,可以用作评估血液毒性的一种便捷模型。转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼中性粒细胞自身发出荧光,可以直接在荧光显微镜下观察中性粒细胞个数;黑色素等位基因突变斑马鱼通体透明,经过巨噬细胞染色后可以直接在显微镜下观察巨噬细胞数量;利用邻联茴香胺将斑马鱼心脏红细胞染色,在显微镜下可以直接观察红细胞数量(信号强度)。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。处理结束后,(1)通过荧光显微镜观察并统计斑马鱼中性粒细胞数量;(2)通过染色斑马鱼巨噬观察巨噬细胞细胞数量;(3)通过邻联茴香胺染色心脏部位红细胞,在显微镜下观察心脏红细胞染色强度。【结果展示】图1.斑马鱼中性粒细胞表型图(绿色小点为中性粒细胞)可以看到,供试品组中性粒细胞个数较正常对照组明显减少。图2.斑马鱼巨噬细胞表型图(红色小点为巨噬细胞)可以看到,供试品组巨噬细胞数量较正常对照组明显减少。图3.斑马鱼红细胞抑制表型图(蓝色虚线框内为分析区域,分析红细胞染色强度)可以看到,供试品组心脏红细胞染色强度较正常对照组明显降低。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,供试品组的中性粒细胞数量、巨噬细胞数量明显减少,红细胞染色强度明显降低。2.本实验证实了此供试品诱发血液毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA由于分子量太大只能留在原位。在中性条件下,DNA片段可进入凝胶发生迁移,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损伤的DNA断链及片段被释放出来。由于这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA 向正极迁移形成“彗星”状图像,而未受损伤的DNA部分保持球形。DNA受损越严重,产生的断链和断片越多,长度也越小,在相同的电泳条件下迁移的DNA量就愈多,迁移的距离就愈长。通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可以测定单个细胞DNA损伤程度,从而确定受试物的作用剂量与DNA损伤效应的关系。彗星实验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。同时,这种技术只需要少量细胞。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/注射供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用/注射药物一段时间后,检测尾长、彗星长、尾矩和Olive尾矩。【结果展示】图1. 彗星电泳图片可以看到,服用/注射供试品组斑马鱼细胞核出现拖尾。该供试品改变DNA链的负超螺旋结构、空间构象,使DNA链断裂、形成类核,最终导致细胞死亡(坏死、凋亡或自体吞噬)。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼细胞核出现明显拖尾,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有基因毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼胚胎视力发育迅速,受精后发育4天的幼鱼就已经依赖视觉线索进行捕食和躲避行为。斑马鱼不仅在角膜、晶状体、脉络膜、视网膜以及血管化和神经支配等结构上和人类的眼睛有明显的相似性,而且还有保守的基因表达、细胞构成和组织结构,因此为研究药物眼部毒性提供了一个极好的模型。我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标:1.眼睛大小;2.眼部细胞凋亡;3.眼部血管面积;4.眼部病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组,供试品组(药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间眼保护剂后,我们在解剖显微镜下观察眼睛大小;整体做凋亡细胞特异性染色,观察眼部细胞凋亡;通过荧光显微镜观察眼部血管面积,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼眼睛表型图箭头指示区域为眼可以看到,药物组眼睛相较于正常对照组明显减小。图2. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞可以看到,药物组的凋亡细胞较正常对照组明显增多。图3. 斑马鱼眼部血管面积黄色虚线标记血管面积可以看到,药物组眼睛血管面积相较于正常对照组明显增加。图4. 眼部凋亡细胞病理切片可以看到,药物组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异于正常对照组。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,药物组斑马鱼眼睛明显变小,凋亡细胞明显增多,眼部血管面积明显增多,在病理切片中出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异常。2.本实验证实了药物的眼毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】肠道消化是食物在消化道中分解的过程,包括机械性消化(通过消化道肌肉搜索将食物与消化液混合并向消化道远端推送)和化学性消化(通过消化腺分泌的消化酶将大分子分解为小分子物质的过程)。肠道内的消化液包括胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶等。在受精后的26-126 h,斑马鱼肠道的管腔形成,内胚层分化出连续的有功能的肠道上皮。斑马鱼肠道肌肉发达,可分为两层平滑肌,有利于食物的蠕动消化。通过特异性的检测试剂盒检测OD值,可以量化斑马鱼体内胰脂肪酶和胰蛋白酶含量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成二组,分别是正常对照和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内),加入相应的胰脂肪酶和胰蛋白酶特异性检测试剂。服用供试品后,我们使用酶标仪对斑马鱼进行OD值的检测。【结果展示】图1. 斑马鱼胰脂肪酶和胰蛋白酶OD值可以看到,服用供试品组的胰脂肪酶和胰蛋白酶的OD值与正常对照组比较,有显著性提高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组与正常对照组比较胰脂肪酶和胰蛋白酶含量均有明显的升高。2.本实验证实了供试品具有促进肠道消化功能的作用,主要表现为增加胰脂肪酶和胰蛋白酶的含量。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼胃肠道粘膜屏障系统由较完整的机械屏障、化学屏障和免疫屏障构成,与哺乳动物高度相似,可作为胃肠道粘膜屏障研究的动物模型。三硝基苯磺酸(TNBS)可破坏肠道粘膜屏障,与肠组织蛋白结合形成抗原,发生变态反应,诱发结肠炎。杯状细胞主要分泌黏蛋白,形成黏膜屏障以保护上皮细胞,肠黏膜损伤时杯状细胞数量减少。我们可以应用特异性的染料(呈蓝色),观察肠道杯状细胞数目,评价肠道粘液分泌功能。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用肠道粘膜辅助保护剂组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用肠道粘膜辅助保护剂组都摄入了等量的TNBS(TNBS通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用肠道粘膜辅助保护剂组在TNBS诱导肠道粘膜损伤之后摄入常欣卫口服液之类的肠道粘膜辅助保护剂。服用一段时间肠道粘膜辅助保护剂后,我们观察和分析肠道杯状细胞数目。【结果展示】图1. 斑马鱼肠道杯状细胞表型图可以看到,服用肠道粘膜辅助保护剂组的肠道杯状细胞数量与正常对照组比较相似,没有明显的减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用肠道粘膜辅助保护剂组的肠道杯状细胞量与正常对照组比较相似,没有明显的减少。2.本实验证实了常欣卫口服液具有明显的促肠道粘液分泌功能。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】正常成人的心率在每分钟60~100次之间,如果低于60次称为心动过缓,是心律失常的一个重要类型,患者平时有头晕、乏力、倦怠、精神差的症状。研究表明,斑马鱼心血管系统的发育与人高度相似,虽然斑马鱼是单心房单心室,但其心脏结构及功能与人高度保守。同时,由于斑马鱼具有透明易观察等优点,开始被大量应用于心血管疾病研究和药物心血管毒性评价当中。维拉帕米能阻滞心肌细胞慢通道,抑制Ca2+向细胞的内流,阻碍心脏慢反应电活动,降低舒张期去极化速度,抑制窦房结的自律性,减慢心率;亦能延长房室结的有效不应期,减慢房室传导。用解剖显微镜下观察斑马鱼心率,模型对照组斑马鱼心率较正常斑马鱼明显减慢。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入维拉帕米,模型对照组与药物组都摄入了等量的维拉帕米(维拉帕米通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。药物组先摄入地高辛之类的改善心动过缓药物再摄入维拉帕米。服用改善心动过缓药物后再加入维拉帕米共同处理至实验终点后,我们对斑马鱼统计斑马鱼的心率。【结果展示】图1. 斑马鱼心动过缓柱状图可以看到,模型对照组心率明显减慢,服用药物组的心率与正常对照组比较相似,没有明显的心率减慢。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用改善心动过缓药物组的心率相较于模型对照组。2.本实验证实了地高辛具有明显改善心动过缓的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼心血管系统的发育与人高度相似,虽然斑马鱼是单心房单心室,但其心脏结构及功能与人高度保守。同时,由于斑马鱼具有透明易观察等优点,开始被大量应用于心血管疾病研究和药物心血管毒性评价当中。羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 ( HMGCR) 是他汀类药物发挥抑制作用的直接作用点, HMGCR功能被抑制会影响血管的完整性和稳定性,诱发心脏出血。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用改善心脏出血药物组都摄入了等量的辛伐他汀(辛伐他汀通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。药物组在摄入辛伐他汀的同时摄入淫羊藿苷之类的改善心脏出血药物。服用改善心脏出血药物一段时间后,我们通过解剖显微镜对斑马鱼进行心脏出血发生率的统计;对斑马鱼进行行为学分析;通过心跳血流分析系统采集斑马鱼血流影像,并分析血流速度改善作用。【结果展示】图1. 斑马鱼改善心脏出血表型图可以看到,模型对照组的斑马鱼心脏有明显的出血,服用改善心脏出血药物组的心脏出血情况与正常对照组比较相似,没有明显的心脏出血。图2. 斑马鱼运动改善表型图可以看到,模型对照组的运动距离明显减少,服用改善心脏出血药物组的运动距离与正常对照组比较相似,没有明显的运动减少。图3. 斑马鱼改善血流柱状图可以看到,模型组的血流速度明显减慢,服用改善心脏出血药物组的血流速度与模型对照组比较血流速度增加,没有明显的血流速度减慢。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用改善心脏出血药物组的心脏出血情况、运动距离、血流速度均有明显改善作用。2.本实验证实了淫羊藿苷具有明显改善心脏出血的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。高血脂患者由于血液中胆固醇、油脂含量过多,就会使过多油脂沉积于血管壁上,容易使动脉管壁增厚、变硬、失去弹性,导致动脉硬化。斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖脂负荷状态下表现出持续高血糖、高血脂现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病。用转基因绿色血管荧光斑马鱼(呈绿色),患有高糖高脂的斑马鱼眼部血管壁厚度较正常斑马鱼明显增厚,在共聚焦显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降糖降脂产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖降脂产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降糖降脂产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖降脂产品。服用一段时间降糖降脂产品后,我们用共聚焦显微镜下观察斑马鱼眼部血管壁厚度。【结果展示】图1. 斑马鱼眼部血管壁厚度白色箭头所指为血管壁可以看到,模型对照组的眼部血管壁厚度较正常对照组明显增厚,而降糖降脂产品组斑马鱼眼部血管壁厚度与正常对照组相近。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖降脂产品组斑马鱼眼部血管壁厚度与正常对照组相近,并未出现模型对照组眼部血管壁增厚的情况。2.本实验证实了松花蛹虫草具有眼部血管壁厚度增厚改善功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】蛋黄粉中60%为脂类,用蛋黄粉喂食斑马鱼,可以使斑马鱼血液中的脂肪含量快速升高,从而建立斑马鱼高血脂症模型。经过油红O特异性脂肪染色(与组织内甘油三酯等脂肪滴结合呈橘红色),高血脂斑马鱼血管内肉眼可见明显的脂质聚积,通过静脉注射,可见荧光标记胆固醇的积累。我们评价斑马鱼降低血脂功效有4个指标:1.斑马鱼血脂表型图;2.斑马鱼总甘油三脂含量;3.斑马鱼胆固醇表型图;4.斑马鱼总胆固醇含量。【实验方案】我们先将测试斑马鱼喂食蛋黄粉和荧光标记的胆固醇(蛋黄粉和荧光标记的胆固醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内),建立高血脂模型后,再将受测试斑马鱼分成两组,分别是模型对照组和服用降脂剂组,服用降脂组摄入阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀之类的降脂剂。服用一段时间降脂剂后,我们对斑马鱼整体做脂肪特异性染色,观察体内甘油三酯聚积的变化,以及观察体内胆固醇的聚积情况,同时利用甘油三酯和胆固醇试剂盒检测斑马鱼体内甘油三酯和胆固醇含量的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼血脂表型图橘红色脂滴为血脂可以看到,服用降脂剂组的血脂聚积情况与模型对照组比较明显减少。图2. 斑马鱼胆固醇表型图红色为荧光胆固醇可以看到,服用降脂剂组的胆固醇荧光强度与模型对照组比较明显减少。图3. 斑马鱼总胆固醇含量(mmol/gprot)与模型对照组比较,** p < 0.01从生化指标可以看出,服用降脂剂组的斑马鱼整体总胆固醇含量与模型对照组比较明显降低。图4. 斑马鱼甘油三酯含量(mmol/gprot)与模型对照组比较,*** p < 0.001从实验结果可以看出,服用降脂剂组的斑马鱼整体甘油三酯含量与模型对照组比较明显降低。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用降脂产品组的血脂聚积情况与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀类降脂产品具有显著的降脂降胆固醇作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。酒精性肝损伤是全世界发病率和死亡率的主要原因,酒精性肝损伤是过量饮酒的结果。当患者继续饮酒时,会诱发严重的肝损伤形式,如脂肪性肝炎,纤维化,肝硬化和肝细胞癌。用乙醇可以诱发斑马鱼肝脏损伤,模拟人的肝脏疾病。我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用肝保护剂组。其中正常对照组未摄入乙醇,模型对照组与服用肝保护剂组都摄入了等量的乙醇(乙醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。肝保护剂组在摄入对乙醇的同时摄入美他多辛之类的肝保护剂。服用一段时间肝保护剂后,我们在显微镜下观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。【结果展示】从病理切片中也能看出来,正常对照组肝细胞核规则清晰,肝细胞结构正常,边缘清晰。乙醇处理后,斑马鱼肝细胞结构模糊、肝细胞核肿大,肝组织出现脂肪空泡样变性,而肝保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,肝保护剂组斑马鱼肝脏与正常对照组相似,并未出现模型对照组的肝脏肿大、肝变性和卵黄囊吸收延迟情况。2.本实验证实美他多辛对斑马鱼肝脏的保护作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】临床上显示常见的青光眼视神经病变、糖尿病性视网膜病变以及视网膜中央动静脉阻塞等疾病的发生都与缺氧有关系。组织的缺氧被视为视网膜血管疾病的重要原因,而与血管相关的视网膜疾病恰恰是临床上导致视力丧失的最主要原因。斑马鱼视网膜结构与人类高度相似,这使得斑马鱼胚胎能够模拟视网膜新生血管,为在短时间内快速评估功效提供了模型。氯化钴是广泛使用的化学缺氧模拟剂,其钴可以取代特定前体羟化酶中的铁离子,使羟化活性失活。缺氧条件下,能够诱导转录因子(hif)和血管内皮生长因子(vegf)的表达,诱发新生血管形成。改善湿性黄斑变性有3个指标:(1)采用转基因血管内皮细胞绿色荧光斑马鱼,可在荧光显微镜在观察到缺氧的斑马鱼视网膜血管明显增多增粗;(2)同时制作病理切片,进行苏木素-伊红染色,观察视网膜结构变化;(3)检测hif、vegf基因相对表达量。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和黄斑变性药物组。其中正常对照组未摄入氯化钴,模型对照组与黄斑变性药物组都摄入了等量的氯化钴(氯化钴通过溶于鱼水的方式摄入到斑马鱼体内)。黄斑变性药物组在摄入氯化钴的同时给予施图伦滴眼液、贝伐单抗之类的黄斑变性药物。服用/注射一段时间黄斑变性药物后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼视网膜血管的变化,制作成病理切片观察视网膜的病理结构变化,检测hif、vegf基因相对表达量。【结果展示】图1. 斑马鱼视网膜血管表型图可以看到,服用/注射黄斑变性药物组的视网膜血管面积与正常对照组比较相似,没有明显的血管增多增粗。图2. 视网膜结构表型图从病理切片中也能看出来,模型斑马鱼眼睛病理切片的色素上皮层和外核层结构紊乱、变薄,而服用/注射黄斑变性药物组的色素上皮层和外核层结构均有所恢复。图3. hif-1α基因相对表达量可以看到,模型斑马鱼hif-1α基因表达显著升高,服用/注射黄斑变性药物组该基因明显下降。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射黄斑变性药物组与模型对照组比较,视网膜血管明显变细、视网膜结构较正常、hif-1α基因表达下调。2.本实验证实了施图伦滴眼液、贝伐单抗具有明显的湿性黄斑变性防治作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】随着电子产品的广泛使用,用眼的时间和强度已远超过去,用眼过度引起一系列视力问题。研究表明,高度近视、视网膜疾病、白内障、眼干燥关节综合征均与眼细胞凋亡相关。斑马鱼的眼部血管结构跟人非常相似,斑马鱼视网膜结构也跟人高度相似。用霉酚酸吗啉乙酯可以诱发斑马鱼眼细胞凋亡,模拟人的眼部疾病。用特异性荧光染色(呈绿色),患有眼疾的斑马鱼眼细胞凋亡较正常斑马鱼明显增多,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入霉酚酸吗啉乙酯,模型对照组与服用眼保护剂组都摄入了等量的霉酚酸吗啉乙酯(霉酚酸吗啉乙酯通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。眼保护剂组在摄入霉酚酸吗啉乙酯的同时摄入蓝莓叶黄素酯之类的眼保护剂。服用一段时间眼保护剂后,我们对斑马鱼整体做凋亡细胞特异性染色,观察细胞凋亡,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞可以看到,模型对照组的凋亡细胞较正常对照组明显增多,而眼保护剂组凋亡细胞与正常细胞相似。图2. 眼部凋亡细胞病理切片红色箭头指向凋亡细胞从病理切片中也能看出来,模型对照组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,而眼保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,眼保护剂组斑马鱼眼细胞与正常对照组相似,并未出现模型对照组的大面积细胞凋亡情况。2.本实验证实了蓝莓叶黄素酯具有保护视力功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用转基因运动神经荧光斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼运动神经细胞损伤、荧光强度减弱,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经荧光强度。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经荧光强度白色箭头代表运动神经可以看到,模型对照组周围运动神经荧光强度较正常对照组明显减弱,而降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度明显增强。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经荧光强度与模型对照组比较明显增强。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的产品具有神经保护作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。持续的高血糖水平导致糖尿病并发症发生,高血糖累及中枢和周围神经病变,出现神经炎症。感觉神经受损较为多见,出现麻木、触电、发热、蚁行感,运动神经受损则出现肌力下降。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病的神经并发症。用中性粒细胞荧光与运动神经荧光杂交品系斑马鱼(呈绿色),患有高血糖的斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目增多,在荧光显微镜下可以观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入松花蛹虫草之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们用荧光显微镜观察斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目。【结果展示】图1. 斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目黄色框线内绿色荧光点代表中性粒细胞可以看到,模型对照组的周围运动神经中性粒细胞数目较正常对照组明显增多,而降糖产品组斑马鱼明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼周围运动神经中性粒细胞数目与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了松花蛹虫草之类的降糖产品具有神经炎症消退功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】近年来,各种各样的美食迫使人们越来越关注胃肠道健康问题。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,并拥有与人类结构和功能相似的胃肠道组织。斑马鱼胃肠道粘膜屏障系统由较完整的机械屏障、化学屏障和免疫屏障构成,与哺乳动物高度相似,可作为胃肠道粘膜屏障研究的动物模型。三硝基苯磺酸(TNBS)可破坏胃肠粘膜屏障,与肠组织蛋白结合形成抗原,发生变态反应,诱发溃疡性胃肠道损伤。胃肠道病变累及肌层和神经,导致胃肠壁张力减退,胃肠腔扩大。胃肠道病变时出现炎症反应,中性粒细胞募集到损伤部位。杯状细胞主要分泌黏蛋白,形成黏膜屏障以保护上皮细胞,胃肠黏膜损伤时杯状细胞数量减少。通过病理切片可观察胃肠道组织学改变(如溃疡形成等)的情况。我们评价斑马鱼胃肠道粘膜损伤辅助保护功效有4个指标:1. 观察胃肠腔面积;2. 应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察胃肠道中性粒细胞数量;3. 应用特异性的染料(呈蓝色),观察肠道杯状细胞数目;4. 胃肠道病理切片。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用胃肠道粘膜辅助保护剂组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用胃肠道粘膜辅助保护剂组都摄入了等量的TNBS(TNBS通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用胃肠道粘膜辅助保护剂组在TNBS诱导胃肠道粘膜损伤之后摄入常欣卫口服液之类的胃肠道粘膜辅助保护剂。服用一段时间胃肠道粘膜辅助保护剂后,我们观察斑马鱼胃肠道表型,分析胃肠腔面积,胃肠道中性粒细胞数目和杯状细胞数目,同时制作成病理切片观察胃肠道的病理结构变化。【结果展示】图1. 斑马鱼胃肠道表型图(蓝色虚线区域为胃肠腔)可以看到,服用胃肠道粘膜辅助保护组的胃肠腔面积与正常对照组比较相似,没有明显的胃肠腔扩张。图2. 斑马鱼胃肠道中性粒细胞表型图(黄色虚线区域为肠腔)可以看到,服用胃肠道粘膜辅助保护剂组的肠道中性粒细胞数量与正常对照组比较相似,没有明显的增多。图3. 斑马鱼胃肠道杯状细胞表型图可以看到,服用胃肠道粘膜辅助保护剂组的肠道杯状细胞数量与正常对照组比较相似,没有明显的减少。图4. 斑马鱼胃肠道病理切片可以看到,服用胃肠道粘膜辅助保护剂组的胃肠粘膜形态与正常对照组比较相似,没有明显的胃肠腔扩张、粘膜糜烂溃疡等症状。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用胃肠道粘膜辅助保护剂组的胃肠腔情况与正常对照组相似,并未出现模型对照组胃肠腔扩张、中性粒细胞数量增加、肠道杯状细胞数目减少、粘膜糜烂溃疡等情况。2.本实验证实了常欣卫口服液具有明显胃肠道粘膜辅助保护功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】毛蕊异黄酮,作为从黄芪中分离得到的异黄酮类成分已被证明了其具有促血管新生的活性,其表现为促进斑马鱼胚胎肠下血管增粗,诱导血管及血管之间的交联的形成。斑马鱼心血管系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85%以上,近年来斑马鱼广泛地应用于心血管疾病研究领域。我们评价血管形成促进功效的指标为肠下血管面积。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成二组,分别是正常对照组和服用促血管形成剂组。其中正常对照组不做任何处理。服用促血管形成剂组加入毛蕊异黄酮之类的促血管形成剂。服用药物一段时间后在荧光显微镜下分析斑马鱼肠下血管面积。【结果展示】图1. 斑马鱼肠下血管面积表型图黄色虚线区域为肠下分析区域可以看到,服用促血管形成剂组的肠下血管面积与正常对照组比较明显变大。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用促血管形成剂组斑马鱼与正常对照组比较,肠下血管面积明显变大。2.本实验证实了毛蕊异黄酮之类的药物具有显著的血管形成促进作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】机体供能主要分为有氧供能与无氧供能,在两种供能条件下ATP均源源不断的合成以维持机体活动的需求。通过ATP含量的测定,可以分析能量调节剂对斑马鱼能量代谢快慢的影响。如持续的促进能量代谢、增加机体能量消耗是行之有效的减肥措施,促进脂肪分解类减肥产品可明显增加斑马鱼体内ATP含量。【实验方案】将受测试斑马鱼分成2组,分别是正常对照组、能量调节剂组。服用一段时间能量调节剂后,我们利用ATP试剂盒检测斑马鱼体内ATP含量。【结果展示】图1. 斑马鱼体内ATP含量与正常对照组比较,***p<0.001可以看到,服用能量调节剂的斑马鱼体内ATP含量明显比正常对照组高。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用能量调节剂的斑马鱼体内ATP含量与正常对照组相比明显升高,说明本次实验中选用的能量调节剂可促进ATP生成,促进能量代谢。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼消化道的解剖结构、组织细胞形态与人类消化道相似,具有内皮、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。斑马鱼发育至5 dpf时,其消化道即出现了自发有节奏的肌肉收缩活动。经过喂食不被吸收的特异性荧光材料尼罗红,可以明显的观察到被鱼吃进去的荧光染料,以胃肠道尼罗红的量(荧光强度)为指标,若供试品有胃肠动力抑制作用,则胃肠道内尼罗红无法排出,堆积的尼罗红的量增加,胃肠道荧光强度明显变亮。【实验方案】我们先给斑马鱼喂饲特异性荧光材料尼罗红,然后将受测试斑马鱼分成2组,分别是正常对照组、胃肠动力抑制剂组。服用一段时间胃肠动力抑制剂后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼胃肠道荧光强度。【结果展示】图1. 斑马鱼胃肠道荧光强度表型图可以看到,服用胃肠动力抑制剂斑马鱼的胃肠道荧光强度明显比正常对照组亮。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用胃肠动力抑制剂斑马鱼的胃肠道荧光强度明显比正常对照组亮。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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