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杭州环特生物科技股份有限公司

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【评价原理】便秘的主要表现是排便次数减少和排便困难。斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物,它的肠道组成与人类相似,具有内皮细胞、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。硫酸铝能减少肠道蠕动,诱发斑马鱼便秘。经过喂食不被肠道吸收的特异性荧光材料,可以明显的观察到被便秘斑马鱼肠道蠕动减慢,肠道内的荧光强度明显比正常斑马鱼亮。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用通便剂组。服用通便剂组提前服用一段时间吗丁啉、派立清口服液和慈素粉之类的通便剂后,正常对照组、模型对照组与服用通便剂组都摄入了等量荧光材料。荧光材料摄入后,正常对照组不做任何处理,模型对照组和服用通便剂组都摄入了等量硫酸铝(荧光材料和硫酸铝通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间通便剂后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肠道荧光强度。【结果展示】图1. 斑马鱼肠道荧光强度表型图可以看到,服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。2.本实验证实了吗丁啉、派立清口服液和慈素粉等具有明显通便功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】贫血是外周血红细胞减少。斑马鱼在受精后24 h出现血液循环,可以直接在显微镜下观察到血细胞。造血过程在脊椎动物的进化过程中保守。苯肼作用于红细胞膜,加速膜表面亮氨酸、赖氨酸、组氨酸的水解,同时降低红细胞变形能力,增强红细胞黏附到细胞外基质的能力从而破坏循环血中的成熟红细胞。经过红细胞特异性染色(呈红色),患有贫血的斑马鱼心脏的血红细胞比正常斑马鱼心脏的血红细胞模型减少,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和补血剂组。其中正常对照组未摄入苯肼,模型对照组与补血剂组都加入了等量的苯肼(苯肼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用补血剂组在加入苯肼的同时摄入氯生血宁片之类的补血剂。服用一段时间补血剂后,我们对斑马鱼整体做红细胞特异性染色,观察心脏血红细胞变化。【结果展示】图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图绿色虚线区域为心脏红细胞可以看到,服用预防血栓药物组的心脏情况与未加入苯肼的正常对照组比较相似,没有明显的红细胞减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用补血剂组的心脏红细胞情况与未摄入苯肼的正常对照组比较相似,没有明显的红细胞减少。2.本实验证实了生血宁片具有补血功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的骨骼看似与人类差别明显,实际上它的生长发育过程和调控机制与哺乳动物高度相似。而且斑马鱼骨骼发育迅速,适合快速建立骨骼疾病模型。在大量摄入糖皮质激素(以泼尼松为例)后,斑马鱼会出现继发性骨质疏松。骨密度几乎由骨骼中钙含量来反映,应用特异性地结合钙的荧光染料染色(呈绿色),用其荧光强度可反映骨密度。斑马鱼骨骼染色后经荧光显微镜采集到的荧光强度能够客观反映骨密度。【实验方案】我们将测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用强健骨骼产品组。其中正常对照组未加入泼尼松,模型对照组与服用强健骨骼产品组加入了等量的泼尼松(泼尼松通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用强健骨骼产品组在加入泼尼松的同时加入碳酸钙、维生素D3之类的强健骨骼产品。服用一段时间强健骨骼产品后,我们对斑马鱼整体做钙黄绿素染色,观察脊椎骨荧光强度。【结果展示】 图1. 斑马鱼脊椎骨表型图黄色虚线区域为脊椎骨可以看到,服用强健骨骼产品的脊椎骨骨密度与正常对照组比较相似,没有明显的骨质疏松。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用强健骨骼产品组的骨密度与未经泼尼松处理的正常对照组相似,并未出现模型对照组的骨质疏松的情况。2.本实验证实了碳酸钙、维生素D3具有显著的强健骨骼功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】糖尿病是一种由遗传基因决定的与感染、肥胖等环境因素促发有关的疾病,其基本病理生理为绝对或相对性胰岛素分泌不足引起的代谢紊乱。斑马鱼胰腺的形态发生和基本细胞结构、排列方式类似于哺乳动物,斑马鱼食欲调节(如血清素)和胰岛素调节功能与人类相似,斑马鱼其他涉及葡萄糖体内平衡的器官系统(包括脑、肝、脂肪细胞组织和骨骼肌)的发育和功能也与哺乳动物类似。斑马鱼在糖负荷状态下表现出持续高血糖现象,用高糖高脂饲料可以诱发斑马鱼高血糖,模拟人的二型糖尿病。用血糖仪对高糖高脂斑马鱼进行血糖检测。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用降糖产品组。其中正常对照组未摄入高糖高脂饲料,模型对照组与服用降糖产品组都摄入了等量的高糖高脂饲料(高糖高脂饲料通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降糖产品组在摄入高糖高脂饲料的同时摄入蜂胶软胶囊、苦瓜素胶囊、苦瓜洋参软胶囊之类的降糖产品。服用一段时间降糖产品后,我们对斑马鱼进行血糖检测。【结果展示】图1. 斑马鱼体内葡萄糖水平与模型对照组比较,*** p < 0.001可以看到,模型对照组的血糖值较正常对照组明显增高,而降糖产品组血糖值明显下降。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,降糖产品组斑马鱼血糖值与模型对照组比较血糖明显下降。2.本实验证实了蜂胶软胶囊、苦瓜素胶囊、苦瓜洋参软胶囊之类的降糖产品具有降糖作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能,包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。斑马鱼对典型的心脏毒素的药理学反应与人类相似。斑马鱼受精后48 h,心血管系统功能全面,呈现出例子通道和代谢过程的复杂性。因此,可以应用斑马鱼评价药物对心衰的防治作用。维拉帕米是苯烷胺类钙离子拮抗剂,其诱导心力衰竭的药理学基础有以下三方面: (1)对心脏的抑制作用,即负性频率、负性传导及负性肌力作用,且为剂量依赖性;(2)扩张血管作用,即对外周血管具有明显的扩张作用,使外周阻力降低,平均动脉压下降; (3)减少冠脉血流,降低心肌血供。我们用维拉帕米建立斑马鱼心衰模型。患有心衰的斑马鱼与正常斑马鱼比较,出现心包水肿、静脉瘀血、心搏出量减少和血流速度减慢,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和抗心衰药物组。其中正常对照组未摄入维拉帕米,模型对照组与抗心衰药物组都摄入了等量的维拉帕米(维拉帕米通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。抗心衰药物组在摄入维拉帕米的同时加入地高辛、美托洛尔类的抗心衰药物。服用一段时间抗心衰药物后,观察斑马鱼心包水肿和静脉淤血的情况;用心跳血流分析系统检测心搏出量和血流速度的情况。【结果展示】图1. 斑马鱼心衰表型图黄色虚线区域为心脏,绿色虚线区域为静脉淤血可以看到,服用抗心衰药物组的心包面积和静脉瘀血面积与未摄入维拉帕米的正常对照组基本相似,没有明显的心衰情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗心衰药物组的心包面积和静脉瘀血面积与未摄入维拉帕米的正常对照组基本相似,没有出现模型对照组心包水肿、静脉瘀血的情况。2.本实验证实了地高辛、美托洛尔具有明显的心衰防治(心脏功能改善)作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼血液系统与人类血液系统的血小板和凝血因子有许多共同点。大剂量肾上腺素(AH)能够引起动物血管内皮损伤和血小板活性增强,造成体内处于高凝状态。肾上腺素的大量增加模拟人体暴怒、大怒,导致气机阻滞,气滞血瘀。经过特异性红细胞染色(邻联茴香胺染色),患有血栓的斑马鱼在尾部静脉会布满红细胞,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用抗血栓药物组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用抗血栓药物组都摄入了等量的AH(AH通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用抗血栓药物组在摄入AH的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷等抗血栓药物。服用一段时间抗血栓药物后,我们对斑马鱼整体进行特异性红细胞染色,观察尾部静脉血栓情况。【结果展示】图1. 斑马鱼尾部静脉血栓表型图可以看到,服用抗血栓药物组的尾部静脉血栓情况与正常对照组比较相似,没有明显的血栓。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组的血栓情况与正常对照组相似,并未出现模型对照组尾部静脉大量血栓的情况。2.本实验证实了阿司匹林和氯吡格雷具有明显抗血栓作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】花生四烯酸主要为AA在TXA2合成酶作用下生成TXA2,激活血小板,活化血小板通过GPⅡb/III a受体与纤维蛋白原交联在一起形成血栓。斑马鱼拥有凝血因子、血小板受体,并对临床应用的抗凝血和抗血栓药物具有很好的反应,适合于血栓形成机制和治疗药物的评价。躯干出现血栓后,血流速度便会减慢,回心血量便会减少。经过红细胞特异性染色(呈红色),患有血小板聚集性血栓的斑马鱼心脏红细胞数量比正常斑马鱼明显减少。由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点,可以明显被观察到。患有血小板聚集性血栓的斑马鱼血流速度会明显比正常斑马鱼明显减慢,在血流分析仪下可以明显观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和抗血栓药物组。其中正常对照组未摄入花生四烯酸,模型对照组与服用/注射抗血栓药物组都摄入了等量的花生四烯酸(花生四烯酸通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。抗血栓药物组在摄入花生四烯酸的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通、血塞通之类的抗血栓药物。服用一段时间抗血栓药物后,我们(1)对斑马鱼做红细胞特异性染色,观察心脏红细胞数量的变化;(2)观察血流速度的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图绿色虚线区域为心脏,心脏内红色为红细胞可以看到,服用抗血栓药物组的心脏情况与模型对照组比较,红细胞数量明显增多。图2. 斑马鱼血流速度与模型对照组比较,*** p < 0.001可以看到,服用抗血栓药物组的血流情况与模型对照组比较,血流速度明显加快。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组与模型对照组比较,心脏红细胞数量明显增加、血流速度明显加快。2.本实验证实了阿司匹林、氯吡格雷、丹参多酚酸、盐酸地尔硫卓、血栓通和血塞通具有显著的抗血栓作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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【评价原理】过高的血尿酸浓度可以引起痛风,并与其他代谢类疾病相关联。斑马鱼具有与嘌呤代谢有关的黄嘌呤脱氢酶,尿酸氧化酶,尿囊素酶和尿囊酸酶。尿酸氧化酶是动物嘌呤代谢过程中一种重要的酶,能催化尿酸氧化生成尿裹素、CO2和H2O2。大多数脊椎动物的肝脏、肾脏和脑髓里均发现有此酶的存在。经过尿酸荧光试剂盒特异性反应,患有高尿酸的斑马鱼的尿酸荧光信号强度会比正常斑马鱼的尿酸荧光信号强度明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降尿酸产品组。其中正常对照组未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤,模型对照组与降尿酸产品组都摄入了等量的氧嗪酸钾和黄嘌呤(氧嗪酸钾和黄嘌呤通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降尿酸产品组在摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的同时摄入鲣鱼胶原肽和蛹虫草之类的降尿酸产品。服用一段时间降尿酸产品组后,我们用尿酸荧光检测试剂盒检测斑马鱼体内尿酸水平。【结果展示】图1. 斑马鱼体内尿酸水平(荧光信号强度)与模型对照组比较,*** p < 0.001可以看到,服用降尿酸产品组的斑马鱼体内尿酸水平与未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的正常对照组相似,没有明显的尿酸升高现象。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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环特生物可定制的斑马鱼实验模型有数百种,主要应用于化妆品,保健食品,药物功效与安全性评价、药理毒理评价、临床前研究实验、药物高通量筛选、化合物筛选、活性成分筛选、分子生物学实验、斑马鱼行为分析等,周期短、费用低、高效专业。▼斑马鱼模型实验-CRO实验外包-定制服务项目(部分)▼药物实验类服务项目(CRO外包委托实验)▼食品/保健食品功效与毒性安全性评价检测项目(部分)▼化妆品/原料 评价备案检测项目(部分)更多更详细的斑马鱼模型实验定制服务项目,请拨电话咨询 0571-83782130,项目经理手机 17364531293。环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证,自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域,已牵头起草发布团体标准10项,申请发明专利64余项,自主开发的主要斑马鱼模型150多种,发表SCI及核心期刊论文120余篇,已有7个新药项目成功将环特生物斑马鱼实验数据用于CFDA的临床试验申报,公司已累计完成项目超5000个,建立长期合作客户600多家。

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雌激素是一类固醇激素,目前已成为一种新兴的污染物。一些无良商家为片面追求功效而在护肤产品中违规添加,导致很多女性因使用了此类护肤品而出现“激素脸”,表现为面部翻红、发痒、干燥脱皮,甚至烂脸流脓。环特生物应用诺贝尔奖技术——荧光蛋白基因转移技术,可实现对化妆品中雌激素类化学物质的直观、精确和高效的检测评价。【评价原理】通过转基因标记表达的绿色荧光蛋白含量来反映雌激素含量,绿色荧光蛋白特异性地在肝脏进行表达,一旦供试品中含有雌激素类化学物质,转基因斑马鱼暴露后肝脏部位会出现特异性绿色荧光,可用绿色荧光量化供试品中的雌激素含量,从而达到评价效果。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为两组,分别为正常对照组和供试品组。在相同的温、湿度条件下培育一段时间后,在显微镜下对肝脏部位的绿色荧光进行量化分析。【结果展示】 图1. 雌激素处理后斑马鱼荧光表型图可以看到,用供试品处理后的斑马鱼在肝脏部位显示明显的绿色荧光。【评价结论】1、经过各组斑马鱼的对比实验,雌激素处理组斑马鱼的肝脏部位出现明显的绿色荧光,与正常对照组存在明显的差别;2、本实验说明供试品中存在雌激素类有害物质。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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光毒性检测是化妆品安全性评价的重要内容之一,皮肤接触到光敏性物质后,在光照下可能产生局部或全身的毒性效应。根据斑马鱼胚胎的生长发育状况可以评价受试物的光毒性。【评价原理】将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的受试物溶液,采用同等剂量的光进行照射,一定时间段后记录斑马鱼胚胎的死亡率,确定50%试验鱼胚胎死亡的受试物浓度,用LC50表示。【实验方案】配制一定浓度系列的受试物溶液,在斑马鱼发育初期(4hpf-6hpf)分别水溶加入受试物,同时设置正常对照组。受试物组经过同等剂量的光照后,分别观察每组斑马鱼的发育状况,以卵凝结、体节异常、尾部未分离等判定胚胎死亡。记录每组斑马鱼胚胎的死亡率,绘制“浓度-死亡率”效应曲线,计算LC50值。【结果展示】1、斑马鱼胚胎死亡判定图1.斑马鱼胚胎死亡表型图2、LC50值:“浓度-死亡率”效应曲线图2. 斑马鱼胚胎“浓度-死亡率”效应曲线【评价结论】经实验比对,斑马鱼胚胎随着受试物浓度的增加逐渐出现死亡特征,LC50值为31.5μg/ml。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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急性毒性试验是了解外源化学物对机体产生急性毒性的根本依据,也是毒理学安全性评价的一步工作,斑马鱼早期发育阶段的胚胎期是其对外界环境敏感的阶段。斑马鱼的急性胚胎毒性对于化妆品的安全性评价具有重要的实际意义。【评价原理】将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的受试物溶液,一定时间段后记录斑马鱼胚胎的死亡率,确定50%试验鱼胚胎死亡的受试物浓度,用LC50表示。【实验方案】配制一定浓度系列的受试物溶液,在斑马鱼发育初期(4hpf-6hpf)分别水溶加入受试物,同时设置正常对照组,孵育48h后分别观察每组斑马鱼的发育状况,以卵凝结、体节异常、尾部未分离等判定胚胎死亡。记录每组斑马鱼胚胎的死亡率,绘制“浓度-死亡率”效应曲线,计算LC50值。【结果展示】1、斑马鱼胚胎死亡判定图1.斑马鱼胚胎死亡表型图2、LC50值:“浓度-死亡率”效应曲线图2. 斑马鱼胚胎“浓度-死亡率”效应曲线【评价结论】经过48小时的实验,斑马鱼胚胎随着受试物浓度的增加逐渐出现死亡特征,LC50值为31.5μg/ml。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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化妆品中刺激性物质作用于机体后可能引发机体产生刺激、过敏等一系列的反应,其中主要的是刺激反应,可导致水肿、红斑、瘙痒、疼痛等症状。化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症,炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。【评价原理】刺激物进入斑马鱼体内,诱导炎症反应,中性粒细胞发生免疫应答,向皮肤表皮迁移并聚集。通过在荧光显微镜下对斑马鱼皮肤表面的中性粒细胞进行计数,从而反映受试物刺激性强度。【实验方案】将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和化妆品组(供试品通过溶解到标准稀释水中的方式摄入到斑马鱼体内)。使用化妆品一段时间后,将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照,以皮肤表面中性粒细胞数量评价化妆品的刺激性。【结果展示】图1. 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域可以看到,化妆品组斑马鱼皮肤表面中性粒细胞数量显著上升。【评价结论】1、经过各组斑马鱼的对比实验,化妆品组的斑马鱼皮肤表面中性粒细胞数量明显增多,与正常对照组存在明显的差别。2、本实验证实了该化妆品对斑马鱼有刺激性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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过敏反应通常会引起许多皮肤症状,比如皮肤发红、发痒,严重的患者还会出现刺痛或者面部出现红斑、风团、丘疹或丘疱疹等症状。敏感性肌肤的人群选用化妆品时,需要特别关注化妆品的致敏性。通过斑马鱼技术可以有效评价化妆品及其原料的致敏性。【评价原理】过敏反应的主要原因是过敏原/致敏因子诱导组织学上肥大细胞脱颗粒,释放多种活性介质进而诱发各种过敏症状。其中类胰蛋白酶是肥大细胞内预先合成的中性蛋白酶,是临床上检验人体是否过敏的重要指标。斑马鱼产生过敏反应时,同样会诱导肥大细胞分泌类胰蛋白酶。因此,通过检测斑马鱼整体类胰蛋白酶水平可以判断化妆品及其原料的致敏性。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成若干组组,包含正常对照组和化妆品组。其中正常对照组未加入化妆品,化妆品组分别加入不同剂量(化妆品通过溶解到标准稀释水中的方式添加到实验体系中)的样品。处理24 h后,利用酶标仪检测各组吸光度值(OD值),以类胰蛋白酶的表达水平评价化妆品致敏作用。此外,可以通过斑马鱼病理切片,用PAS染色后观察肠道壁上肥大细胞的状况反映化妆品的致敏性。【结果展示】(展示图片仅供参考,实际实验组别依据合同而定)图1. 斑马鱼类胰蛋白酶含量(吸光度值)与正常对照组比较,*p < 0.05,***p < 0.001可以看到,化妆品中剂量和高剂量组类胰蛋白酶含量与正常对照组比较明显升高,具有致敏性,低剂量组无致敏性。图2. 斑马鱼体内肥大细胞染色典型图(箭头指示为肥大细胞)从经过PAS染色的病理切片中也能看出来,化妆品组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量明显增加。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,化妆品中、高剂量组斑马鱼类胰蛋白酶含量和肠道壁上的肥大细胞数量与正常对照组相比数量明显增加。2.本实验证实了该化妆品具有明显的致敏作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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空调、环境污染、季节转换带来的温度变化与压力,以及皮肤衰老、代谢减缓等因素,都会造成肌肤水份流失,令肌肤粗糙、黯哑、形成干纹、引发诸多肌肤问题。皮肤缺水可表现为表面失去光泽变得暗淡无光,失去弹性,出现细纹。补水保湿是护肤化妆品最基础的功效,通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料的补水保湿功效。【评价原理】斑马鱼用氯化钠处理,由于渗透压的原因皮肤表面将会失水皱缩,尾部面积因皱缩而变小,通过对尾部面积的影响评价化妆品的补水保湿效果。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组(供试品通过溶解到标准稀释水中的方式接触到斑马鱼皮肤)。正常对照组不做处理,模型对照组用氯化钠溶液处理,供试品组在用氯化钠处理的同时定量加入受试的化妆品。孵育一段时间后,对斑马鱼进行拍照,以斑马鱼尾部面积评价供试品的补水保湿功效。【结果展示】图1 斑马鱼尾部面积(红色区域为尾部面积)模型对照组斑马鱼尾鳍皱缩、面积明显减小可以看到,供试品组斑马鱼的尾部面积与正常对照组相似,没有明显的皱缩。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,供试品组的斑马鱼尾部面积与正常对照组相似,没有出现明显的皱缩。2.本实验证实了该供试品对具有明显的补水保湿功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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皮肤微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环。血液循环最根本的功能是进行血液和组织之间的物质交换,皮肤微循环状态与皮肤衰老密切相关。【评价原理】转基因血管内皮绿色荧光斑马鱼的节间血管可以在荧光显微镜下被明显地观察到,因而可以通过观察受试物对节间血管直径的影响来评价受试物促进血管新生的功效,进而表征改善微循环功效。此外,可以利用血流分析仪检测受试斑马鱼的血流速度,补充评价改善微循环功效。【实验方案】将斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组。正常对照组不做处理,供试品组添加一定浓度的受试化妆品,孵育24h小时后,在荧光显微镜下观察斑马鱼节间血管并拍照保存图片,用高级图像处理软件进行图像分析,计算斑马鱼节间直径,通过其统计学意义评价供试品改善微循环功效。此外,通过血流分析仪分析观察各组斑马鱼的血流速度,以血流速度的增加量评价受试化妆品改善微循环功效。【结果展示】1、斑马鱼节间血管直径图4. 供试品改善微循环功效表型图黄色虚线标记部分为斑马鱼肠下血管,红色箭头所指为出芽数2、斑马鱼血流速度(提供各组实验柱状图)图5 斑马鱼血流速度与模型对照组比较,***p<0.001【评价结论】1、经过斑马鱼对比实验,供试品组与正常对照组对比,肠下血管面积增大,出芽数增多,直径变大。2、与正常对照组相比,化妆品组斑马鱼血流速度明显增大。3、本实验证实了该化妆品具有改善微循环的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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化妆品中的功效活性成分是通过经皮吸收到达皮肤各层而发挥作用的,许多在体外试验中表现良好的活性物质在消费者实际使用过程中并未达到理想的功效结果,这与活性物的经皮吸收性能密切相关。斑马鱼的皮肤结构与人体高度相似,因此活性成分在活体斑马鱼上的经皮吸收结果可以反映在人体皮肤上的吸收状况。【评价原理】    通过高效液相色谱法定量检测养鱼用水在孵育斑马鱼一段时间后的活性成分含量变化反映活性成分经斑马鱼的皮肤吸收状况,含量的减少量即为斑马鱼的经皮吸收量。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为三组,分别为正常对照组(不含活性物)、活性物对照组(不含鱼)和受试物组。在相同的温、湿度条件下孵育一段时间,在孵育前后分别检测各组中活性成分的含量。【结果展示】图1. 活性成分在不同组别中的色谱图可以看到,受试物组的斑马鱼养鱼用水中的活性成分,在孵育后发生减少,减少量即为经皮吸收量。【评价结论】1、正常对照组的鱼水中未检测到活性成分,说明该方法不存在基体干扰;2、活性物对照组孵育前后活性物含量无明显变化,说明在没有斑马鱼存在的孵育条件下活性物含量不发生变化;3、受试物组,孵育后活性物含量明显低于孵育前,说明活性成分被经皮吸收至斑马鱼体内,经皮吸收量即为鱼水中的减少量。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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紫外线是导致皮肤损伤或病变的重要因素,未进行防晒的皮肤暴露在紫外线下可能出现皮炎、红斑、黑色素增多等现象,类似的,斑马鱼的尾鳍受紫外线照射后将出现尾鳍褶皱,面积缩小等现象,使用化妆品后,通过定量评价斑马鱼尾鳍面积的复苏情况评价其抗光老化功效。【评价原理】通过紫外光照射使斑马鱼尾鳍形成损伤,添加化妆品后,采用拍照方式对斑马鱼尾鳍进行图像采集,分析斑马鱼尾鳍损伤程度并判定抗光老化功效。【实验方案】我们将斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组、化妆品组。正常对照组不做处理,模型对照组和化妆品组分别进行紫外光多次照射,随后化妆品组中定量加入受试化妆品,孵育一段时间后,三组斑马鱼分别进行尾鳍拍照处理,分析斑马鱼尾鳍面积,从而评价抗光老化功效。【结果展示】图1. 斑马鱼尾鳍损伤面积表型图(红色为分析区域)【评价结论】1.经过各组斑马鱼对比实验,与模型对照组尾鳍面积相比,化妆品组具有明显改善作用。2.本实验证实了该化妆品具有抗光老化的作用。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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暴露于生活环境中的皮肤,接触到有毒有害物质后可能引起一定程度的皮肤炎症,出现皮肤红肿、瘙痒等现象。一些医美类化妆品除具有常规护肤功效外还能起到抗炎舒缓作用。通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料抗炎舒缓功效。【评价原理】化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症,炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。十二烷基磺酸钠(SLS)是人体皮肤刺激物模型斑贴试验常见的阳性对照物,SLS刺激后能诱发表皮炎症细胞浸润,刺激物进入斑马鱼体内,诱导炎症反应,中性粒细胞发生免疫应答,向皮肤表皮迁移并聚集。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组(供试品通过溶解到标准稀释水中的方式接触到斑马鱼皮肤)。正常对照组不做处理,模型对照组仅用SLS处理,供试品组在用SLS的同时添加受试化妆品。孵育一段时间后,我们将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照,以皮肤表面中性粒细胞数量评价供试品的抗炎舒缓功效。【结果展示】图1 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域,绿色荧光点为中性粒细胞可以看到,供试品组斑马鱼的中性粒细胞数目比模型对照组少,与正常对照组相似。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,水溶给予供试品组的斑马鱼中性粒细胞数目比模型对照组少,与正常对照组相似。。2.本实验证实了该供试品具有抗炎舒缓功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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过敏反应通常会引起许多皮肤症状,比如皮肤发红、发痒,严重的患者还会出现刺痛或者面部出现红斑、风团、丘疹或丘疱疹等症状。一些医美类化妆品除具有常规护肤功效外还能起到抗过敏作用。通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料对过敏反应的抑制作用。【评价原理】过敏反应的主要原因是过敏原/致敏因子诱导组织学上肥大细胞脱颗粒,释放多种活性介质进而诱发各种过敏症状。其中类胰蛋白酶是肥大细胞内预先合成的中性蛋白酶,是临床上检验人体是否过敏的重要指标。斑马鱼产生过敏反应时,同样会诱导肥大细胞分泌类胰蛋白酶。因此,通过检测斑马鱼整体类胰蛋白酶水平可以判断化妆品及其原料的抗过敏作用。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成若干组,分别含正常对照组、模型对照组和化妆品组。其中正常对照组未经C48/80处理,模型对照组和化妆品组都用C48/80处理(C48/80通过溶解到标准稀释水中的方式摄入到斑马鱼体内,C48/80是一种能让皮肤表面产生过敏反应的物质),化妆品组另需加入相应浓度的化妆品样品。处理24 h后,利用酶标仪检测各组吸光度值(OD值),以类胰蛋白酶的表达水平评价化妆品抗过敏作用。此外,可以通过斑马鱼病理切片,用PAS染色后观察肠道壁上肥大细胞的状况反映化妆品的抗敏作用。【结果展示】(展示图片仅供参考,实际实验组别依据合同而定)图1. 化妆品处理后斑马鱼吸光度值与模型对照组比较,*p < 0.05图2. 化妆品处理后斑马鱼的致敏作用与模型对照组比较,*p < 0.05可以看到,使用化妆品的浓度组类胰蛋白酶含量与模型对照组比较明显降低。图3. 斑马鱼体内肥大细胞染色典型图(箭头指示为肥大细胞,PAS 1000×)从病理切片中也能看出来,模型对照组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量显著上升,而经色甘酸钠和化妆品处理的斑马鱼肠道肥大细胞相对于模型对照组明显减少。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验,模型对照组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量显著上升,而经色甘酸钠和化妆品处理的斑马鱼肠道肥大细胞相对于模型对照组明显减少。2.本实验证实了色甘酸钠和该化妆品具有抗过敏功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

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