抗体/抗体片段抗原产生特异性和高效结合性，在生化、治疗和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术，由于其自身研发周期比较长，生产的成本相对较高，已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来，随着基因重组和生物工程技术的不断进步，高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。抗原结合片段 （Fab） 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段（scFv），其大小只有Fab片段的一半，但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段，单域抗体，又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb，是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段，缺少常规的轻链和重链的CH结构域。泰克生物是一家专业的CRO服务提供商，能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务，如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外，泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心，能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。 █ 抗体片段特性   抗体类型组分分子量（kDa）化合价半衰期（h）FabVH+CH1+VL+CL（轻重链利用二硫键连接）50-55单体12-20scFvVH+VL30单体2-4sdAbVHH15单体0.5Fc融合抗体（抗体+CH2+CH3）*2/二聚体/di-scFvscFv*260二聚体4-8█ 抗体片段表达系统常用宿主  表达系统菌株/细胞特点E.coliBL21（DE3）Ion-ompT，有效防止重组蛋白在胞内被水解Rosetta（DE3）菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA，能够提供更加“通用”的蛋白质表达，从而提升目的蛋白表达水平，该质粒具有氯霉素抗性。Rosetta哺乳动物细胞CHO-S是实验室常用的细胞系，作为贴壁和悬浮培养生长良好，生产率高，是大规模培养和GMP程序的理想选择；可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药，显示出卓越的生物相容性和药物活性；适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件，并具有更好的稳定性和安全性。CHO-K1Freestyle 293F是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系，可以高效表达蛋白。Expi 293F具有高度可转染行，展示出较高的蛋白表达水平，相比标准的悬浮适应293细胞，表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。█ 抗体片段高表达策略优化方式特性融合抗体Fab 基因表达时，5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因，可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达，形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上，然后共转染细胞，也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。抗体序列本身的修饰经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸，从而优化其稳定性，增强与抗原的亲和性，提高表达产量。表达系统的选择应考虑的因素有：实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。密码子优化天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好，使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。条件优化需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。█ 抗体表达服务内容 实验内容交付周期基因合成＆载体构建1. 重组抗体2. 表达载体3. 克隆菌株4. 实验报告6-8周质粒抽提细胞转染＆表达抗体抗体纯化（SDS-PAGE）█ 泰克可提供的服务 片段抗体构建和生产服务片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体（驼源纳米抗体）等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列，交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息，则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。 重组抗体293F/CHO细胞表达服务全套Gibco无血清哺乳细胞培养，适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求，如糖基化修饰，磷酸化修饰等。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程，全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。 █ 服务优势 ✔ 详细的实验设计和论证：包含稀有密码子分析，抗体序列分析，表达系统的选择，表达载体构建方案，抗体修饰等✔ 多种标记抗体表达：His标签融合表达，同位素标记表达、生物素标记表达✔ 多个种属的重组抗体制备：包括人源，鼠源，兔源，羊源，犬源，骆驼源，羊驼源，牛源等✔ 抗体修饰控制：糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制✔ 多重表达模式：稳定表达和瞬时表达✔ 配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系✔ 低内毒素水平：LAL检测法<0.1EU/ug✔ 完整的文件追溯体系，保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯

近年来随着mRNA合成、化学修饰mRNA和递送技术的发展，mRNA稳定性和翻译效率大幅提高，免疫原性逐步可控，其在肿瘤免疫治疗领域显示了巨大的商业价值。mRNA技术产品是基于mRNA指导蛋白合成的“中心法则”，在体外设计合成含有编码特定抗原的mRNA序列，经过序列优化、化学修饰和纯化等加工，采用不同方式递送至人体细胞，利用机体细胞翻译产生蛋白、诱导免疫应答、补充机体蛋白、调节免疫等作用，从而预防或治疗疾病。人类90%以上的疾病与蛋白质相关，基于mRNA特性，mRNA技术在预防与治疗疾病方面前景广阔。Fig1 mRNA 免疫泰克生物能够为客户提供多种抗原（包括但不限于PTM蛋白、细胞内蛋白、分泌蛋白）的mRNA免疫抗体制备服务，此外，泰克生物拥有包括从基因合成与修饰、AAV载体构建、动物免疫、杂交瘤细胞的融合与筛选、抗体生产等一站式技术服务，并且有配套的抗原抗体结合分析、抗原抗体BLI亲和力测定、抗体细胞系验证、等许多下游配套服务，为客户的抗体药研发与生产提供有力的支撑。 █ mRNA的免疫原性 纯化的mRNA仅包含单链RNA （single-stranded RNA, ssRNA）分子，通过递送系统包裹并以內吞方式进入核内体，进入核内体后mRNA从递送系统中释放出来并被定位在膜上的Toll样受体（Toll-like receptor, TLR)）7和TLR-8识别，导致下游的髓样分化标记物88 （myeloid differentiation marker 88, MyD88）被激活，引起I型干扰素（interferon, IFN）激活和炎症因子的分泌。 █ mRNA疫苗制备过程  1. 制备IVT mRNA：抗原选择、线性DNA模板合成、体外转录和mRNA纯化。在对病原体的基因组进行测序后选择目标抗原时，将其插入质粒 DNA 模板中。生产 DNA 模板应包含抗原序列、5′和3′ UTR以及5′UTR上游的T7启动子。体外转录过程需要 DNA 模板、修饰或未修饰的核苷和 T7 RNA 聚合酶。2. mRNA进入细胞质需要借助载体，mRNA疫苗的递送载体包括病毒载体和非病毒载体两种：病毒载体以慢病毒、腺病毒相关病毒和仙台病毒等为主，病毒载体在进行核酸递送的同时也可能会引起免疫反应，从而影响疫苗的效果，非病毒载体主要包括脂质体、树突状细胞(dendritic cell, DC)、无机纳米粒子、阳离子细胞穿膜肽等。 █ mRNA递送系统 1.裸mRNA直接注射法：直接注射至组织中，通常使用蔗糖、海藻糖溶液等缓冲液对mRNA进行一定的稀释处理。优点是成本低、方便快捷、缺点是mRNA极易被RNA酶降解，且难以穿过细胞膜。2.体外DC负载：将mRNA离体加载或电穿孔入树突状细胞（Dendritic cells，DCs），体外负载树突状细胞有利于抗原呈递细胞的有效靶向。3.阳离子纳米乳：一种基于水包油的递送方式，由角鲨烯和表面活性剂如吐温、生育酚等组成，MF59和AS03是2种水包油乳剂佐剂，应用于2009年的流感疫苗研究中。4.阳离子肽和聚合物：Curevac公司利用鱼精蛋白开发了狂犬和甲型流感的m RNA疫苗递送，鱼精蛋白富含精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸残基，能够与带有负电荷的m RNA复合使其稳定。5.LNP：LNP含有4种组分：阳离子可电离脂质、聚乙二醇（PEG）脂质、磷脂、胆固醇。阳离子可电离脂质是LNP中最重要的一种组分，其电离系数与胞内内体基本保持一致，不仅能够促进m RNA顺利包装至LNP中，还在胞内参与mRNA从内体中释放；PEG脂质提供胶体稳定性，防止蛋白与纳米粒结合，从而减少网状内皮系统对LNP的清除作用，增加体循环时长；中性磷脂如二硬脂酰基卵磷脂（distearoyl‐sn‐glycero‐phosphocho‐line，DSPC）和二棕榈酰磷脂酰胆碱（dipalmitoyl‐phosphatidylcholine,DPPC），提供双层磷脂稳定性结构；胆固醇提供刚性，提高LNP的硬度以及防止LNP成分泄露。 █ mRNA药物优势 （1）易在体外生产和纯化，除去蛋白药物及病毒载体制备的复杂过程，同时可避免宿主蛋白及病毒源性污染；（2）IVT mRNA的生产工艺通用性强,可以快速应用于生产不同的目的蛋白,节省药物研发时间,提高效率；（3）mRNA仅需进入细胞质即可翻译成蛋白质，无需进入细胞核，因此不存在基因的插入和整合，提高药物的安全性；（4）通过调节序列修饰和递送载体可以改变其半衰期；（5）临床试验发现，虽然mRNA的蛋白质表达是短暂性的，但其对于肿瘤的免疫治疗应用有效，且有利于药代动力学和剂量的控制。 █ mRNA免疫服务流程 服务项目内容周期mRNA合成mRNA合成、修饰与组装4-6周动物免疫皮下多点注射，标准免疫流程，ELISA测血清效价10周融合与筛选脾细胞与骨髓瘤细胞融合，ELISA筛选阳性克隆，扩增4-6周抗体生产杂交瘤细胞生产，抗体纯化可选 █ 服务优势 ✔ 无需重组蛋白或多肽，省时省力✔ 无抗原污染风险✔ 生成具有高亲和力和特异性的抗体✔ 阳性的杂交瘤细胞株3-5株（小鼠单抗）✔ 可提供抗体人源化服务并获得的与原抗体具有相同的亲和力的人源化抗体✔ 可提供一系列抗体体外验证服务✔ 从基因合成与修饰、AAV载体构建、动物免疫、杂交瘤细胞的融合与筛选、抗体生产等一站式技术服务

抗体的结合亲和力是决定抗体药物疗效和剂量的关键参数之一。目前，提高抗体结合亲和力的方法主要集中在位点突变、CDR重排、DNA重组等方面。通过我们有效的亲和力成熟技术，我们可以快速发现抗体域中的关键氨基酸位点。这反过来又增加了抗体的结合亲和力，至少达到 nM 水平。█ 服务内容内容交付周期DNA改组抗体序列及测序报告优化抗体的 1-3 个完整分析报告 (PDF)24-28周文库构建与筛选抗体生产与验证█ 基于噬菌体的选择的好处 噬菌体选择非常通用，可以定制以获得所需的抗原特异性或亲和力参数。选项包括(1) 与阴性对照抗原竞争以对交叉反应结合剂进行阴性选择(2) 通过以较低浓度包被抗原或通过改变孵育和洗涤时间进行基于解离速率的动力学选择(3) 抗原构象特异性选择与重组和基于细胞的抗原兼容(4) 最后噬菌体病毒在 80°C 下稳定，允许选择热稳定、高表达的克隆我们在噬菌体淘选后进行快速筛选，选择后，产生数百个随机挑选的克隆，并从细菌上清液中筛选出可溶性 Fab。在进入耗时的 IgG 生产阶段之前，以高通量筛选先导候选物可节省大量时间和资源。除了全序列分析外，还可以通过ELISA、流式细胞术、功能测定和 BLI以高通量筛选重组或基于细胞的蛋白质。 █ 服务优势  ✔  通过 DNA 改组进行有效的随机突变✔  成熟的噬菌体展示平台，确保高质量的亲和力成熟服务✔  亲和力评估

泰克生物多年来致力于噬菌体展示技术和抗体领域研究，拥有丰富的抗体工程构造经验和成熟的抗体人源化技术。基于噬菌体展示技术平台，泰克生物能够提供高亲和力和低免疫原性的嵌合抗体改造服务，并且能对抗体序列进行人源化改造并确保改造后的人源化抗体亲和力能与人源化之后的抗体维持在同一数量级水平，为客户的后续项目研究带来便利。图1 基于噬菌体技术平台的驼源VHH抗体发现服务抗体人源化和抗体表征可以降低源自异种来源的单克隆抗体的免疫原性，同时保留亲本异种来源的单克隆抗体的亲和力和特异性，通过DNA重组技术和蛋白质工程技术，用人类抗体框架替换非人类抗体框架以提高它们对人类免疫系统的激活能力，这是治疗性抗体发现过程中非常重要的一步。为进一步减弱人源化抗体的免疫原性，泰克生物利用丙氨酸突变以及联合位点直接突变技术进行抗体超变区CDR高通量筛选，以进行人源氨基酸替换。目前为止，泰克生物已经成功为客户提供了上百种抗体人源化服务。泰克生物致力于打造完善的一站式抗体人源化技术服务平台，为客户提供从生物信息学分析，人源化抗体设计，高表达载体构建，抗体表达及纯化，亲和力测定，到抗体体外验证（包含阻断验证），抗体亲和力成熟等一系列相关服务，以满足不同客户的需求。█ 抗体人源化优点 (1) 降低机体的免疫排斥反应；(2) 体内的半衰期较非人源化抗体变长，改善了抗体药代动力学；(3) 更有效地募集机体效应因子或效应细胞；(4) 抗体亲和力和特异性与人源化之前相当。█ 抗体人源化服务内容 泰克生物能够提供以下三类人源化抗体定制服务：类型特点改型抗体将非人源抗体CDR区域移植到缺少CDR区域的人源抗体，如将鼠源抗体的CDR移植到人抗体支架中，使人源抗体获得鼠源单抗的抗原结合特异性，同时减少其异源性嵌合抗体利用DNA重组技术，将非人源抗体的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转染哺乳动物细胞进行重组抗体表达全人源化抗体利用基因编辑技术，将动物体细胞中抗体基因进行人抗体基因替换，动物免疫后直接产生全人源化的抗体杂交瘤测序客户需提供两管杂交瘤细胞（5×106个/管，冻存液冻存，细胞活率>90%）。泰克生物将通过RACE制备mRNA并制作与重链和轻链相对应的cDNA，为客户提供可变区、天然分泌信号和抗体同种型亚类的序列。重组抗体表达泰克生物可根据客户的具体需求获取可变区域的序列并将它们转化为真正的分子。可变区可以与原始恒定区或新恒定区组合以产生人源化或同种型转换抗体。泰克生物可应用现有的设计平台来优化表达和平衡链比率，从而更大限度地提高功能性抗体的产量。泰克生物提供一系列分析服务来分析客户的抗体的特性、亲和力、纯度、数量和质量。包括使用 ForteBio Octets 进行滴度和亲和力测量的生物层干涉测量法、通过尺寸排阻色谱法进行的聚集检测、通过qPCR机器测量的熔解温度和抗体稳定性、通过HPLC进行聚糖分析和使用质谱法进行分子质量测定。抗体人源化泰克生物通过计算机建模方法来将某些框架残基随机化到CDR嫁接，嫁接的CDR被克隆到噬菌体展示文库，通过筛选该噬菌体文库，筛选出亲和力较好的人源化抗体。为了进一步降低CDR移植的人源化抗体的免疫原性，泰克生物可以通过特异性决定残基(SDR)移植来更大限度地减少鼠源的含量。除此之外，泰克生物还可以从我们预制的人源抗体库中直接筛选得到人源抗体。 除以上传统抗体人源化的的方法之外，泰克生物还基于噬菌体展示技术平台和酵母展示平台，为客户提供抗体深度人源化服务。█ 服务内容 内容交付周期嵌合抗体构建5种人源化抗体变体及基因序列信息；至少 1 个人源化抗体变体具有与亲本抗体相当的结合亲和力；实验报告16-20周抗原抗体结合分析抗体模型库构建噬菌体展示抗体文库构建抗体高通量筛选人源化抗体检测生产█ 抗体人源化服务优势 ✔ 拥有深厚的抗体人源化专业知识科研团队，成功研制多个人源化抗体✔  灵活的人源化抗体制备策略，针对客户需求进行一对一方案定制✔  高亲和力和高特异性人源化抗体开发✔  高通量筛选与灵活的文库淘筛策略✔ 拥有自主研发的高表达载体✔ 从生物信息学分析，人源化抗体设计，抗体表达及纯化，到亲和力测定，抗体亲和力成熟等一系列服务✔ 专注于提供具有强大可制造性的人源化抗体，从而实现临床使用所需的优化大规模生产

泰克生物一直致力于开发单克隆抗体，在抗体开发和工程抗体所需的平台方面拥有超过8年的经验，已经开发出了不同的抗体库，用于抗体筛选、抗体测序、抗体人源化等。泰克生物投资了尖端技术，使用复杂的工程、计算机3-D 建模和合成生物学技术生产定制的双特异性抗体。从客户的需求出发，泰克生物可以帮助客户设计、开发和验证用于研究和临床前的双特异性抗体。双特异性抗体（bsAbs）是抗体含有不同的表位（通常在两个单独的抗原表位）即两个抗原结合位点。通常，一种结合特异性针对靶细胞的特定细胞表面抗原，而另一种针对效应细胞表面上的“触发”分子，例如FcγR或CD3/T细胞受体复合物之一。双特异性抗体可以超越效应细胞对其天然靶标的特异性，并将其重定向以杀死原本会忽略的靶标。不同的细胞毒性表达不同的触发分子（受体）。因此，通过改变靶标和效应子结合域的特异性，可以针对大多数类型的靶细胞产生多种效应子反应。或者，可以通过将一种结合特异性靶向血清免疫球蛋白来赋予全范围的效应子功能（即 ADCC、吞噬作用、补体激活和延长的血清半衰期）。目前，市场上有两种用于治疗的双特异性抗体。由于其不同的作用机制，双特异性抗体越来越受到关注，更多的双特异性抗体正在进行临床试验，不仅针对癌症，还针对其他疾病。█ 如何制备双特异性抗体 泰克生物已经开发了许多方法来产生双特异性抗体。杂交瘤是较早用于生产双特异性抗体的技术。它基于表达所需特异性鼠 IgG 的两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合。然而，功能性双特异性抗体的真实百分比是不可预测的，并且需要复杂的过程来从副产物中分离双特异性抗体。通过使用分子克隆技术，可以从同一生产细胞中表达两条不同的重链和轻链组装双特异性 IgG 抗体。双特异性抗体的生产需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于共同轻链的质粒或两个轻链质粒（如果使用两条不同的轻链）。值得注意的是，建议在不同的质粒上表达 HC 和 LC，因为控制质粒比例是一种简单有效的方法，可以优化所需产品的蛋白质组装。随后，通常需要一个费力且耗时的过程来从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系，以进行大规模抗体生产。与稳定转染相比，瞬时转染可以在几天内获得结果，而无需将重组 DNA 整合到宿主基因组中。人类胚胎肾 (HEK293) 和基于 HEK 的 Expi 293 细胞是用于瞬时表达的人类细胞，已在bsAb 开发的早期使用。█ 服务内容 步骤内容基因合成生成多达 3 个不同设计的序列，从头生成重组抗体 DNA 质粒小试双特异性抗体蛋白的产生→小规模表达到哺乳动物细胞系中→通过 SDS-PAGE验证→通过ELISA与重组蛋白抗原的结合分析→将克隆与亲本抗体进行比较。鉴定前 2 个全长双特异性抗体的表达→通过ELISA进行结合分析→抗小鼠抗体识别的抗体的ELISA评估。生产大规模抗体生产█ 附加检测服务 步骤内容流式细胞仪分析FACS与抗原阳性细胞系的结合分析BLI 结合分析  通过 Octet 系统生物层干涉法进行抗体结合亲和力分析Biacore TM SPR 生物传感器 使用 Biacore TM SPR 生物传感器进行结合和动力学分析以确定抗体亲和力、Ka、Kd、KD 值█ 服务优势 ✔  CHO 细胞中的高蛋白表达✔  非常稳定：在 37 °C 的血清中 >2 周✔  无溶解度问题：> 30 mg/ml✔  开发了许多不同的具有肿瘤抗原的稳定细胞系，以验证许多双特异性抗体

嵌合抗体（Chimeric Antibody）是指来源于一种物种的抗体可变区与另外一种物种的恒定区片段进行嵌合后形成完整的IgG抗体，如人-鼠，人-兔，鼠-兔，人-羊驼嵌合抗体等。不同物种的嵌合抗体改造主要是为了改善亲本抗体的免疫原性，种属特性，半衰期等特性，其核心诉求是获得抗体的可变区序列，借助于噬菌体展示技术和酵母抗体展示技术，可以发现多种物种的单克隆抗体，进而获得不同来源的嵌合抗体。2014 年，WHO（世界卫生组织）发布了新指南，重新定义了不同类别的治疗性抗体。其 INN（国际非专有名称）抗体药物命名法将治疗性抗体分为 3 类：嵌合型或"-ximab，人源化或"-zumab，全人源或"-umab。根据世卫组织命名法对特定抗体进行分类，来源于小鼠（或更普遍的非人类）序列的抗体将被归类为-祖马抗体，而来源于人类（噬菌体展示、转基因小鼠或 B 细胞克隆技术）的抗体将被归类为-乌马单抗。在一个标准项目中，与 IMGT 数据库进行 BLAST 的小鼠抗体通常会在 VL 结构域显示出与最接近的人类种系约 65-80% 的同一性，在 VH 结构域显示出 60-75% 的同一性。因此，要想在 VH 结构域达到所需的同一率，通常需要对 CDR 中的一些残基进行突变。因此，在人源化过程中需要对 CDR（根据 Kabat 的定义）进行突变，以达到 VH 结构域 85% 的同一性。泰克生物是一家专业的嵌合抗体的构建与生产公司，拥有成熟的重组抗体哺乳表达平台，能为客户提供高质量的嵌合抗体表达定制服务。全套Gibco无血清哺乳细胞培养，配合来源清晰的293F，CHO悬浮细胞系，整个体系满足于不同客户对天然构象蛋白的体外重组表达需求。泰克生物为客户提供的全套高性价比研究服务满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程等。█ 嵌合抗体的分类  嵌合抗体种类简介嵌合原理嵌合IgG抗体在免疫过程中，抗体Fc段能与效应细胞发生相互作用，从而发挥特异的生物学功能；IgG1和IgG3与Fc受体的结合能力最强，IgG4次之，IgG2几乎检测不到结合。构建嵌合抗体首先需从生产鼠源单抗的杂交瘤细胞中得到V区基因，再与人类的C区基因重组并克隆到合适载体中，然后转入受体细胞表达。嵌合Fab和F（ab'）2抗体该种抗体最大的优势是渗透力强，由于该类型抗体的亲和力较低，分子量小，很容易被肾小球过滤而从血液中消失，因此，大多数不适合单独用于临床治疗。将功能性抗体L，H链的V区基因与人的轻链K和H进行重组，然后再转入宿主细胞中表达。█ 人鼠嵌合抗体构建策略 1.模板替换：与鼠对应部分有较大同源性的人抗体FR替换鼠FR，利用已有晶体结构数据的人源抗体的可变区框架（VH如NEW，KOL，VL如REI等)用作替换的基本模板或在已有的抗体序列库中搜寻与鼠McAb FR有最大同源性的人源FR用于替换。2.表面重塑：对鼠CDR及FR表面残基进行镶饰（veneering）或重塑（resurfacing），以使之类似于人抗体CDR的轮廓（profile）或人 FR 的型式。3.补偿变换：在人FR选择与CDR有相互作用、与抗体的亲和力有密切关系或对FR空间结构折叠起关键作用的残基进行改变，以补偿完全的CDR移植。4.定位保留：人源化McAb保留了鼠源McAb可变区中参与抗原结合的氨基酸残基，包括CDR和FR中的一些关键残基。 █ 嵌合抗体设计与表达服务周期  步骤服务内容周期基因克隆及载体构建* 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因，插入哺乳动物细胞表达质粒* PCR及测序检测确定亚克隆基因* 交付：测序数据和实验方案1-2周瞬时蛋白表达* 重组质粒转染细胞(293F， CHO) ：瞬时表达* SDS-PAGE和WB检测* 交付：表达载体，克隆菌株，重组抗体，纯度>85%2–3周稳定表达（可选）* 重组蛋白CHO稳定表达细胞系构建和筛选* 交付：稳定细胞系，构建报告；边际产物，3个克隆，每个克隆50ml发酵产物及纯化产物12–14周 █ 泰克服务优势✔ 可变区多种属选择：人、小/大鼠、犬、鸡、骆驼等✔ 免费重组嵌合抗体表达方案设计✔ 有自主优化的HEK293/CHO平台能够进行更好的糖基化及翻译后修饰✔ 自主设计哺乳体系表达载体✔ 过重规格的放大表达体系可供选择✔ 恒定区有多种属选择：人、大/小鼠、犬、恒河猴、兔等✔ 具有多亚型构建的经验：IgG、IgA、IgM和IgE

产品编号：TKPLS103产品名称：噬菌体展示十二肽库筛选试剂盒产品描述：The Phage Display 12 Peptide Library is a combinatorial library of random 12-mer peptides fused to the N-terminus of a minor coat protein (pIII) of M13 phage. The ready to use complex phage library can be used to discover peptide binders in less than one week with straight-forward molecular biology and sterile culture techniques.规格：1 set展示肽：X12-GGG-native M13 pIII特异性序列：~10^9浓度：1 x 10^13 pfu/ml试剂盒成分：噬菌体展示十二肽库   E. coli K12 ER2738保存条件：Store at -20°C. Avoid repeated freezing and thawing cycles.运输条件：Shipped on ice packs.Note：研究使用，不能用于其他用途

产品编号：TKPLS102产品名称：噬菌体展示七肽库筛选试剂盒产品描述：The Phage Display 7 Peptide Library is a combinatorial library of random 7-mer peptides fused to the N-terminus of a minor coat protein (pIII) of M13 phage. The ready to use complex phage library can be used to discover peptide binders in less than one week with straight-forward molecular biology and sterile culture techniques.规格：1 set展示肽：X7-GGG-native M13 pIII特异性序列：~10^9浓度：1 x 10^13 pfu/ml  试剂盒成分：噬菌体展示七肽库   E. coli K12 ER2738保存条件：Store at -20°C. Avoid repeated freezing and thawing cycles. 运输条件：Shipped on ice packs.Note：研究使用，不能用于其他用途

产品编号：TKPLG102产品名称：T7噬菌体文库构建试剂盒产品描述：The T7 Cloning Kit could be used for phage display library construction and has the capacity to display peptides or proteins up to about 1200 amino acids in size in mid-copy number (5-15 per phage).  In vectors, coding sequences for the peptides or proteins to be displayed are cloned within a series of multiple cloning sites following aa 348 of the 10B protein.规格：1 set展示肽：peptides or proteins up to about 1200 amino acids特异性序列：浓度：试剂盒成分：    T7 Cloning EcoR I/Hind III Vector Arms    T7 Cloning Control Insert    T7 Packaging Extracts    T7 Cloning Packaging Control DNA    BL21 glycerol stock    T7 CloningUP primer    T7 CloningDOWN primer保存条件：Store at -80°C. Avoid repeated freezing and thawing cycles.运输条件：Shipped on dry ice.Note：研究使用，不能用于其他用途

产品编号：TKPLG101产品名称：M13噬菌体文库构建试剂盒产品描述：The M13 Cloning Kit could be used for phage display library construction and is best used to display small peptides, i.e. sequences of 50 amino acids or less. The M13KE Vector is based on M13mp18 containing the entire M13 genome, with specific cloning sites at the 5’gIII, encoding pIII coat protein. The short peptide sequences are displayed as N-terminal pIII fusions.规格：1 set展示肽：peptides about 50 amino acids or less试剂盒成分：M13KE gIII Cloning Vector   M13 Extension Primer保存条件：Store at -20°C. Avoid repeated freezing and thawing cycles.运输条件：Shipped on ice packs.Note：研究使用，不能用于其他用途