简介：单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。实验步骤：1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性4. 抗体亚类鉴定5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务单抗制备标准流程：抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。客户需提供的材料及信息:a.客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白b.如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%结果提供：实验报告 免疫前血清（20μl） 免疫后血清（20μl）抗体上清（至少3株,1ml/株） 杂交瘤细胞（3株） 抗体亚型如需要纯化的客户增加如下结果：纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg） 免疫效价 抗体亲和力常数相关说明：A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。B、客户需要承诺外的细胞株。（联系我们老师）C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化。（联系我们老师）D、如客户需要非IgG类的其他细胞株。（联系我们老师）

短串联重复序列（short tandem repeat，STR），它广泛并均匀地存在于真核生物基因组中，一般由一个长2～6bp的核心序列经多次串联重复排列而成，重复次数大多在10～60次之间。个体间核心序列的重复次数呈高度变异性，构成了STR的遗传多态性。由于STR具有分布广泛均匀、多态性丰富、信息量大、检测简便等优点，已广泛应用于遗传图谱绘制、基因定位、法医鉴定、遗传病诊断等诸多领域。瑞金特生物可为您提供特定区域扫描、人致病基因定位（全基因组扫描）两种STR分型检测服务。特定区域扫描瑞金特生物可根据客户指定的染色体区域寻找微卫星标记，进行定点扫描技术路线优势：a.  可以提供荧光引物的合成。b.  实验周期短：正常情况下，3~4天就可以出结果。c.  结题报告数据明显，通过表格和峰图可以清楚的看到片段大小、丰度、纯合杂合等分型信息。送样要求a.  送样要求，PCR产物或基因组DNA：浓度≥50ng/μl，总体积≥20μl；新鲜组织样品：总量≥100mg的新鲜组织样品或1～2ml血液样品；b.   送样时，请注意避光保存，同时在订单上标注好是STR样本；c.  我们默认使用的内参为ROX500和LIZ500，如需使用其他内参，请自行提供；d.  建议使用Fam、Hex、Tamra三种荧光标记；为尽量避免多种荧光信号的相互干扰，不建议同管检测使用的荧光多于2种；多种荧光同管检测，PCR产物大小需相差50bp以上；常见问题（1）你们是怎么区分出我送的未知荧光呢？答：我们使用ROX500作为红色内标时，可以鉴别出蓝色荧光和绿色荧光；LIZ500作为橙色内标时，四种荧光都可以鉴别的出来。（2）STR 检测用的仪器是什么？名字与型号，厂家， 最多能测多少个 bp？答：我们使用的仪器是 ABI3730XL Analyzer (美国），最多能测 1500bp。（3）上样量（分子量内标、 甲酰胺及 PCR 产物各需要多少）？答：先对 PCR 产物进行纯化，随后取 1ulPCR 产物和 10ul 的内标[加入1000 ul HIDI 和5ul ROX500/LIZ500，震荡、混匀（ 96 个样品用量）]进行上样。（4）公司能否提供 Genemapper  软件？答：这个软件是正版软件，不能随意安装，不便提供。另外老师您可以在发送给您结果的邮件中下载分析软件 Genemarker（在英文操作环境下进行）。（5）其中 Allele， Size， Height， Peak Area, Data Point 分别代表什么？如何解释？答：Allele ： Displays the label of the allele according to the Label settings of the analysis methodSize ： Displays the calculated size (in bp) of the associated peak.Height ： Displays the height (in RFU) of the associated peak.Peak Area ： Displays the calculated area underneath the associated peak.Data Point ：Displays the data point that defines the center of the associated peak in the sample data

实验原理继植物中发现基因沉默现象后，动物细胞中的双链RNA诱导的基因沉默现象也被阐明，并于2006年获得诺贝尔医学奖的肯定，足以说明RNAi技术在医学领域即将发挥的开创性作用。siRNA（Small interfering RNA)是21-25核苷酸的小分子RNA，由Dicer酶加工双链RNA而成。siRNA与体内多种酶类结合形成RNA诱导的沉默复合物（RISC），从而激发与之互补的目标mRNA的降解。天然的RNAi现象存在于包括人类在内的动植物体内，在调节基因表达和预防病毒感染方面起到重要作用。实验流程

实验原理ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA，反转录，设计合成特异性引物后，通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列，获得编码全长蛋白质序列的DNA序列：即从起始密码ATG到终止密码子，不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。实验流程

实验原理通过qPCR准确进行miRNA在细胞或组织样本中的表达分析是研究miRNA功能的基础。将小片段的miRNA通过聚合酶A加尾，再通过含有通用序列的Oligo序列进行反转录，合成特异性的miRNA引物及通用引物即可对miRNA进行qPCR检测工作。实验流程