实验原理miRNA是在真核生物中发现的具有调控功能的内源性非编码RNA，大小约20~25个核苷酸。我们根据成熟miRNA序列信息，合成含有茎环结构的前体miRNA连接至含侧翼序列的表达载体中，将其转染/病毒包装感染进入细胞后，由II型启动子（CMV）启动表达，经核酸酶的剪切加工，组装RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。实验流程

简介：单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。实验步骤：1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性4. 抗体亚类鉴定5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务单抗制备标准流程：抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。客户需提供的材料及信息:a.客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白b.如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%结果提供：实验报告 免疫前血清（20μl） 免疫后血清（20μl）抗体上清（至少3株,1ml/株） 杂交瘤细胞（3株） 抗体亚型如需要纯化的客户增加如下结果：纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg） 免疫效价 抗体亲和力常数相关说明：A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。B、客户需要承诺外的细胞株。（联系我们老师）C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化。（联系我们老师）D、如客户需要非IgG类的其他细胞株。（联系我们老师）

实验原理ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA，反转录，设计合成特异性引物后，通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列，获得编码全长蛋白质序列的DNA序列：即从起始密码ATG到终止密码子，不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。实验流程

实验原理通过qPCR准确进行miRNA在细胞或组织样本中的表达分析是研究miRNA功能的基础。将小片段的miRNA通过聚合酶A加尾，再通过含有通用序列的Oligo序列进行反转录，合成特异性的miRNA引物及通用引物即可对miRNA进行qPCR检测工作。实验流程