是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术。其基本原理是在电场的作用下将SDS-PAGE电泳分离的蛋白质转移至一种固相支持物，然后用特异性抗体来检测目的蛋白在样本中的表达情况。其检测蛋白质的灵敏度为ng级，并可以对目标蛋白进行定性和半定量的分析。主要实验步骤如下：a.  样本准备：样本背景分析，蛋白质的抽提和定量。b.  SDS-PAGE电泳。c.  蛋白质转移至一种固相支持物（NC膜或PVDF膜）。d.  封闭，一抗，二抗孵育。e.  化学发光法显色蛋白，分析结果。f.  提供详细的实验报告。客户需要提供的物品：a.  待检样本及相关背景说明。b. 特异性一抗及对应的二抗。

简介：瑞金特生物实验中心引进美国安捷伦公司的液相色谱质谱联用仪。形成了高通量、高灵敏度和高分辨率的规模化蛋白质分析支撑技术体系，为促进蛋白质组学及相关研究的发展，共享先进的技术资源，近年来生物质谱实验室蛋白质/多肽质谱鉴定、生物工程药物结构确证和蛋白质组学多项成熟的分析技术已为国内外客户提供了广泛的服务。设备仪器：美国安捷伦公司Agilent （xct-6330） 型号的液相色谱仪，MS为美国热电公司的TSQ型号质谱仪；质谱仪采用ESI（电喷雾电离）离子源，MS/MS 串连四极杆分析器。可在线检测极性有机化合物、核酸、多肽、小分子蛋白质及其化学修饰产品的实际分子量，并对送检样品进行分子量鉴定，纯度及修饰效果分析。质量范围M/Z 10～2,000 分辨率R=2M设备应用：芯片/质谱 (HPLC-Chip/MS) ——显著提高了纳流液-质联用分析结果的灵敏度，可靠性和分析速度 安捷伦推出了世界第一台的基于微流控技术的纳流液相色谱芯片-质谱平台。 这项技术将主要用于蛋白质组学和药物分析方面。其核心是采用可重复使用的聚合物液相色谱芯片取代传统的液相色谱柱。这个平台将多维色谱集成在一块芯片上，采用插拔式设计，操作简单与标准液相色谱/质谱联用仪相比， 它的其灵敏度提高了3,500倍。尽管芯片的体积很小，但是可以容纳最长20 厘米的有C18填料的色谱柱。液相色谱/芯片作为一个模块与安捷伦的所有6000系列液-质联用仪完全兼容。 液相色谱-芯片技术主要应用蛋白质组学研究和药物标靶研究等领域。有关 的应用发表在许多国际知名的杂志上，如Analytical Chemistry; Electrophoresis, PNS上液相色谱芯片产品主要包括七种类型的芯片涵盖大分子和小分子的应用：* 酶解蛋白质鉴定芯片 #1 * 酶解蛋白质鉴定芯片#2 * 寡聚糖的芯片 * 直接进样芯片* 小分子芯片 * 质谱校正和诊断芯片 * 全蛋白质分析芯片测试范围：多肽、蛋白质的电喷雾质谱分子量测定以及天然产物分子、生物大分子、有机分子的质谱测试和研究送检样品要求：样品应尽量不含盐份、离子表面活性剂、去垢剂及一些难挥发性盐。样品送检量、溶解方式以及未知可否做质谱检测的样品可与我们的工作人员联系以便提高检测效率。（送样单请附带检测样品的品名及精确计算分子量）送样须知：A：样品量：50pmol干粉或1ug/uL以上（一般测试）、100pmol干粉或1ug/uL以上（MALDI串联质谱分析）、100ug干粉以上（二硫键分析、糖基化分析，磷酸化分析，其他修饰分析）、10ug干粉以上（SDS-PAGE或IEF）；B：盐含量：挥发性无机盐，<20mM，请勿使用PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质；C：考马斯亮蓝染色样品可全部接收，银染过程中不得使用戊二醛作为固定剂；D：请告知样品是否有修饰，并请注明修饰方式。主要应用 :* 蛋白质组学研究 * 寡聚糖和糖蛋白的研究 * 小分子化合物分析* 药物发现和研发 * 食品和环境样品分析检测报告：从收到样品起1-2个工作日内可给出样品的检测报告，以电子邮件的形式发给您并附带检测结果分析。包括结果有：一级质谱：质谱图、肽段分子量、数据库检索结果； 二级质谱：质谱图、肽段分子量、数据库检索结果、肽段氨基酸序列、修饰位点等；

实验原理早期的shRNA载体多采用RNA聚合酶III型启动子介导shRNA的表达，RNA聚合酶III型启动子如鼠源的U6启动子和人源的H1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子RNA。随着miRNA干扰机制的深入研究，发展出第二代shRNA载体，即采用RNA聚合酶II型启动子CMV表达含侧翼序列的miRNA模拟物。该载体模拟miRNA的加工，表达出来的shRNA进入RISC沉默复合物的效率要比RNA聚合酶III型启动子表达的shRNA高数十倍，抑制效率更好，且可以和EGFP协同表达，方便观察转染效率。实验流程

实验原理miRNA通过碱基配对结合到靶mRNA的3’UTR区，抑制靶基因的翻译或对靶基因mRNA的降解达到调控基因表达的目的。将靶mRNA的3’UTR区构建至萤火虫荧光素酶报告基因的3’端，与miRNA表达载体及海肾荧光素酶报告基因载体共转染细胞，先后加入两种底物荧光素，通过对荧光素酶报告基因的表达检测确认miRNA对靶基因的调控效果。实验流程

实验原理基因的化学合成即人工合成寡核甘酸片段，通过PCR拼接的方法，获得所需要的基因表达序列或者启动子等功能性元件片段。基因化学合成使合成任何基因序列成为可能。实验流程

ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务技术流程1、把抗原或抗体包被在固相载体上2、加入受检标本反应3、加入酶标抗原或抗体4、加入底物催化酶显色5、加入终止液终止显色反应6、通过比色进行抗原或抗体的定性定量分析客户须知a.液体类标本（细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等）；b.样本量：每个样本收集体积=120ul*检测指标数；c.样本保存：请尽早检测，2-8℃保存一天；需更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集样本，请将样本及时分装标号后，置-20℃或-70℃保存；d.请提前告诉我们：您样本的种属（人、大鼠、小鼠、兔、猪等）、样本数量、待测指标。报告内容及标准a.ELISA标准曲线；b.详细的实验步骤；c.完整的实验报告（试剂耗材，实验方法，实验结果及结果说明）。收费标准及服务周期收费标准及服务周期因根据客户提供的样品不同而有所改变，详细请跟客服专员联系或参考所签署的合作合同。质量保证：适合检测包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆，细胞裂解液等标本灵敏度极高。

SNP（single nucleotide polymorphism），即单核苷酸多态性，是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态，已广泛应用于群体遗传学和疾病相关基因的研究，在药物基因组学、诊断学和生物医学研究中发挥着重要作用。直接法测序在SNP的检测方法中，通过PCR扩增后直接测序是十分有效的方法，被公认为是SNP检测的“金标准”。在测序峰图中，纯合型SNP的测序峰为单一峰型，而杂合型的为双峰，所以非常容易区分。采用这种方法，SNP检出率接近100%。技术路线优势a.  检出率接近100%。b.  免费提供SNP位点查找，可以发现新的SNP位点。c.  实验周期短：正常情况下一周内出结果。d.   结题报告送样要求a.  请提供血液、组织或DNA样品，及准确的基因名称（基因ID）、序列或者详细的SNP位点信息。b.  血液：样品需用EDTA抗凝，总量大于1 ml，采集后于－20℃或－80℃保存。c.  组织：样品可为新鲜组织（最好保存于－80℃）、石蜡包埋的组织或95%乙醇中固定的组织，总量≥10mg。样品－70℃邮寄至本公司（干冰或液氮运送）以保证样品质量。d.   基因组DNA：浓度≥20ng/μl，总体积≥20μl。所需样品量根据实验要求做相应调整。

实验原理与化学合成的siRNA和shRNA质粒载体相比，利用慢病毒或腺病毒表达shRNA，一方面可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞，提高shRNA导入细胞的效率，另一方面病毒介导可延长RNAi的时间，尤其慢病毒感染后可以整合到宿主细胞基因组，进行稳转筛选。实验流程

实验原理miRNA是在真核生物中发现的具有调控功能的内源性非编码RNA，大小约20~25个核苷酸。我们根据成熟miRNA序列信息，合成含有茎环结构的前体miRNA连接至含侧翼序列的表达载体中，将其转染/病毒包装感染进入细胞后，由II型启动子（CMV）启动表达，经核酸酶的剪切加工，组装RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。实验流程

简介：单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。实验步骤：1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性4. 抗体亚类鉴定5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务单抗制备标准流程：抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。客户需提供的材料及信息:a.客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白b.如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%结果提供：实验报告 免疫前血清（20μl） 免疫后血清（20μl）抗体上清（至少3株,1ml/株） 杂交瘤细胞（3株） 抗体亚型如需要纯化的客户增加如下结果：纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg） 免疫效价 抗体亲和力常数相关说明：A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。B、客户需要承诺外的细胞株。（联系我们老师）C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化。（联系我们老师）D、如客户需要非IgG类的其他细胞株。（联系我们老师）