细菌具有5S, 16S, 23S三种rRNA,其中5S rRNA序列较短,包含的细菌遗传信息量少,不适合用于分析鉴定细菌种类,而23S rRNA序列较长,且碱基突变速率要比16S rRNA快得多,不适用对较远亲缘关系的细菌进行鉴定。16S rRNA其大小约1500 bp ,所代表的细菌遗传信息量适中,是进行细菌分类研究的理想材料。细菌16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA的DNA序列,存在于所有细菌染色体基因中,它由保守区序列及可变区序列两部分组成。细菌16S rDNA的可变区序列能够显示细菌间不同分类等级水平上的特异性,适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究,并可作为测量细菌进化和亲缘关系的良好工具,同时可以利用可变区序列的差异对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。★服务内容:提取客户提供的细菌菌株基因组总DNA,扩增细菌16S rDNA序列,对细菌16S rDNA序列进行序列测定,分析细菌16S rDNA序列信息,确定客户样品细菌种属关系。★您需要提供的信息:1. 试管菌、甘油菌、体积大于500ul的细菌菌液或细菌DNA。2. 所送样品可能的分类地位、已知生长性状、分离环境条件、所提供的DNA纯度等。3. 细菌样品是否具有致病性和潜在危险,如您对样品具有一定的致病性或均有潜在的危险,请您提供细菌DNA。★服务价格1. 细菌16S rDNA部分序列分析:350元/样品2. 细菌16S rDNA全序列分析:550元/样品★服务周期:30样品以下2-5个工作日内递交结果。如遇到特殊情况,我们会及时与您联系,保证尽早发货。30样品以上依据具体样品数量而定。★服务承诺:我们提供给您细菌样品的测序锋图,序列比对结果及完整的结果分析报告。★客户须知:1. 我们的一次性收费包括细菌DNA提取,细菌16S rDNA 序列扩增,扩增产物纯化及16S rDNA序列测序费用。2. 细菌鉴定服务完成后,相应的菌株为您保存1个月,一月后将统一销毁。3. 常温运输时间过长会导致菌体老化,细胞壁难以破碎,因此对于试管菌,建议您使用冰袋运输。4. 如果测序结果出现套峰,视为样品不纯,因实验样品不纯造成的测序套峰,将收取全额实验费用。5. 我们不接受有致病性菌种的鉴定。
一、技术原理RACE(rapid-amplification ofcDNA ends,RACE) 即cDNA末端快速扩增技术,是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,通过向两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5'和3'末端的有效方法,无需构建cDNA文库,即可在短时间内获得目的基因cDNA序列,具有简单、快速、廉价等优势,在cDNA文库的构建及筛选,新基因的发现等方面得到了广泛的应用。 二、服务流程1、3'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为引物反转录mRNA,形成cDNA链,然后以cDNA为模板,基因特异引物GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物,含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为下游引物,PCR扩增目的基因的3' 末端。 2、5'-RACE的技术利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为引物和反转录酶MMLV反转录mRNA,形成cDNA。反转录时,利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在cDNA的5'末端自动加上3-5个(dC)残基,退火时(dC)残基与含有寡核苷酸序列Oligo(dG)的通用接头引物配对,进而转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头.最后以含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为上游引物,目的基因特异引物2(GSP 2 genespecific primer,GSP)作为下游引物, SMART第一链cDNA为模板,PCR扩增目的基因的5'末端。 三、服务内容RNA提取、定量及反转录RACE(3'和 5'-RACE)结果分析及实验报告四、实验报告内容扩增片段的电泳图,含3'和 5'-RACE PCR片段的质粒载体及细菌一份;全长cDNA序列及测序报告;RACE实验步骤、使用仪器、引物序列等。 五、客户提供组织或细胞等材料(不接受RNA样本,除非有足够证据证明您的RNA是高质量);尽可能多的背景资料,如已知序列、丰度、估计长度、种属同源情况等。 六、实验周期及收费标准服务项目基础费用(500bp以内)超过部分周期(工作日)3'RACE技术服务 3000元200元/100bp15-20工作日5'RACE技术服务 4000元400元/100bp15-20工作日上述收费标准是针对正常基因,对于基因含量低于正常的样品,我们会使用特殊的方法,具体情况请与技术人员沟通协商。服务说明 1、如果您的样品为原核生物,我们无法保证序列为3'端或5'端全长。 2、由于mRNA存在个体和组织差异,PCR产物测序或许会有套峰存在,此种情况之下我们会提供2个克隆的测序结果,由客户最终确认其准确性。
载体构建是分子生物学研究中最常用到的手段之一。但由于影响因素较多,对研究者经验要求较高,因而往往费时费力。我公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验,为您提供高效、快捷的服务。可根据已有载体进行改造方案的设计,完成现有载体不同功能元件的改造,也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体。★ 服务内容:1. 构建或改造特定的载体,将目的基因装载到特定的载体上。2. 已有载体多克隆位点(MCS)的改造;启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造。★ 您需要提供的信息:1. 克隆要求及相关的实验材料,图谱,以及构建方案。克隆完成后如需测序并且要求序列完全匹配,则需提供全序列。2. 载体改造的具体要求,预进行改造的质粒(序列经测序验证正确)及其图谱和序列,能够获得所需元件或基因的模板(质粒或其它)及其相关图谱和序列。3. 对于载体改造和基因片段克隆,客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。4. 对于表达载体、报道基因载体与病毒载体的构建,您需要提供含有目的基因的质粒或cDNA克隆模板、序列资料、目标蛋白的基因序列与酶切位点、以及载体等资料。5. 若客户只提供组织或细胞样本,请提供所需克隆基因的NCBI登录号或电子版全序列。6. 客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息。★ 服务价格具体价格面谈,根据实验难易及客户要求而定。参考报价如下:服务项目收费标准基因表达载体构建(<500bp)1200元基因表达载体构建(500bp-2000bp)1600元基因表达载体构建(>2000bp)2200元起★ 服务周期:20个工作日。★ 服务承诺:我们提供给您详细的实验报告(包括实验方法、照片图片等)、测序结果(测序彩色波形图、测序方向图、序列碱基图)、酶切位点图、电泳图谱,测序图谱,酶切图、构建好的重组质粒及含该质粒的穿刺菌等。★ 客户须知:1. 若客户提供组织或细胞样本,我们公司将额外收取RNA提取及逆转录的费用。2. 我们公司可以免费提供常见的克隆载体,如pMD18等。
原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统,能快速表达纯 化各种不同来源蛋白。所制备的重组蛋白可用于药物筛选、结构生物学研究、细胞生物学研究、蛋白质组学研究等的一系列生物医学领域的研究。本公司拥有完整的杆菌原核表达技术平台:根据客户的需求,提供从质粒构建,基因表达,蛋白纯化等一系列服务。★ 服务内容:1. 靶基因序列设计,密码子优化2. 靶蛋白cDNA阅读框的设计和全长基因合成3. 表达载体的构建4. 质粒的转化和高表达菌株的筛选5. 转化菌摇瓶培养,诱导表达6. 目标蛋白纯化7. SDS-PAGE 检测表达及纯化情况★ 您需要提供的信息:1. 提出具体可行的实验方案提供含有目的基因序列2. 确认的质粒或带有此质粒的菌株提供测序确认的目的基因PCR产物3. 提供目的蛋白编码基因信息(序列或NCBI登陆号),与客户共同分析后提出 具体可行的实验方案并付诸实施。★ 服务价格具体价格面谈,根据实验难易及客户要求而定。★ 服务周期:20个工作日。★ 服务承诺:1. 初步的培养条件和合理的纯化工艺;纯化后的蛋白2. SDS-PAGE蛋白电泳结果和详细的实验记录。3. 详细的实验报告(包括实验方法,步骤,照片,相关数据、SDS-PAGE及质粒测序结 果等)测序彩色波形图,测序方向图,序列碱基图,酶切位点图,含有目的基因的质粒及甘油菌。★ 客户须知:1. 客户需要提供尽量详细的背景资料。2. 如果提供给我们质粒或PCR产物请提供给我们测序结果峰图。