环特小鼠PDX技术服务 

环特小鼠PDX模型平台，作为优秀的肿瘤动物模型平台，其构建过程包括从患者体内获取原代肿瘤样本，将样本移植到实验动物体内培养，并进行连续传代。目前环特已成功构建了10多种小鼠PDX模型，对组织微环境中的分子及其相关因子进行全面分析，为客户提供仿临床药效评价、筛选新抑制剂/抗体/ADC耐药性模型、基于临床样本测试新药有效性及肿瘤免疫研究等深度科研服务解决方案，助力肿瘤研究！

▼ 小鼠PDX模型优势

在肿瘤研究中，环特鼠PDX模型作为一种优秀的体内药效模型，实现稳定性与效能融合，在筛选受试药物、适应症确定、机理研究等方面具有一系列优势：

● 同批次样本均质化建模；  ● 稳定性与同代传代一致性；  ● 早期均匀生长，优选药效实验窗口

 环特小鼠PDX应用 

▼ 小鼠PDX模型列表（部分）

▼ 用于肿瘤免疫研究

将环特鼠PDX体内药效模型与PBMC（即外周血单个核细胞）免疫系统人源化模型相结合，也是肿瘤免疫研究的理想模型。两者的融合可以实现对多种状态下病人来源的十余种肿瘤进行研究，有助于提高对恶性肿瘤治疗的认知，包括作用靶点及机制等，实现药物优化及提高临床的治疗效果，为研究人员提供了更全面、更真实的研究视角。

患者原代肿瘤细胞与PBMC共培养杀伤-免疫疗法体外药效评价，是通过将环特鼠PDX体内药效模型与PBMC免疫系统人源化模型相结合，来获取临床手术样本及患者外周血、消化肿瘤细胞，与患者免疫细胞共培养杀伤，检测免疫疗法在不同患者中的药效，并精准检测肿瘤细胞凋亡/死亡情况，是肿瘤免疫研究的理想模型。

如下图，体外检测临床结直肠癌患者及卵巢癌患者，不同的患者PD-1药效存在差异。

▼ 仿临床药效评价

小鼠PDX模型，保留了肿瘤组织原有的非肿瘤基质和微环境，能够保持肿瘤原有特性和异质性，更贴近临床患者肿瘤的原代细胞，可以提供更加可靠和真实的肿瘤生长环境，具有仿临床药效评价能力，可有效预测患者对特定药物的反应。

例如，最近的多项研究中均成功构建了小鼠PDX模型，并观察到小鼠PDX实验结果与临床结果之间的高度一致性。实验结果显示，小鼠PDX模型随着传代受到固定的筛选压力（下图1）；模型的CNA变化随着代次的增加逐步加大（下图2）；这种变化是由于特定细胞亚群增加或减少/丢失导致的（下图3）；减少细胞亚群丢失、减少不同小鼠间的异质性、减少传代次数，有助于提高PDX模型与临床患者肿瘤的一致性。

▼ 筛选新抑制剂/抗体/ADC耐药性模型

小鼠PDX模型，对特定药物的反应与临床用药效果相比有高度的相似性，可用于评估新药的疗效及安全性，筛选新抑制剂/抗体，判断ADC耐药性等，为临床试验的设计提供重要依据。

如下图，在小鼠PDX肺癌及肝癌模型中筛选AZD9291和DS8201耐药性，在长期使用会降低对恶性肿瘤的治疗效果。

▼ PBMC-NK双人源化药效评价

环特小鼠PDX模型，生长均匀，稳定建模，生长稳定性接近CDX模型，可体现出临床情况下低靶点阳性细胞率对药效的影响。PBMC-NK模型中，NK杀伤能够达到同靶点T细胞杀伤水平，肿瘤及免疫系统重建稳定，试验期间内GVHD可控。

如下图，利用小鼠PDX模型开展药效评价、免疫重建等，取得了较好的效果。

▼ 基于临床样本测试新药有效性

使用病人肿瘤组织构建的小鼠PDX模型，可基于临床样本，替代肿瘤患者对不同的新药开展体内药效学检测，测试新药有效性，是试药的完美替身。

 环特小鼠PDX平台简介 

环特小鼠PDX平台，依托于“类器官+基因编辑+哺乳动物+斑马鱼”SciPro™多元化，已成功构建了10多种鼠PDX模型，为肿瘤药效评价领域带来了稳定性与效能的完美融合。随着技术的不断进步和研究的深入，环特小鼠PDX模型将在肿瘤免疫研究、抗肿瘤药物筛选和评估、临床用药指导等方面取得更广泛的应用，为肿瘤研究与治疗带来更大的突破！

环特生物致力于为客户提供高质量的小鼠PDX模型，助力肿瘤研究，开创药效评价领域的创新时代！

▼ 资 质 荣 誉

环特已拥有实验动物生产与使用双许可证，通过CNAS、CMA和AAALAC认证，自有10300m²实验室。

环特在技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准17项，申请发明专利81项，自主开发斑马鱼模型170多种，大小鼠模型200多种，发表SCI及核心期刊论文220多篇，已有7个新药项目成功将环特斑马鱼实验数据用于NMPA（国家药监局）的临床试验申报，累计完成项目20000多个，长期合作客户800多家。

 项 目 咨 询 

更多小鼠PDX技术服务项目，请拨电话咨询：0571-83782130，手机 17364531293（微信同号）。

【评价原理】

普纳替尼通过影响人血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成等正常功能而造成血管内皮损伤，从而引起血管堵塞，发生血栓。斑马鱼心血管系统在分子信号通路上与人和哺乳动物的同源性达到85％以上，近年来斑马鱼广泛地被用于心血管疾病研究领域，如心力衰竭、血栓、心律失常、心肌病、动脉粥样硬化等。

躯干出现血栓后，回心血量便会减少，血管直径将会减小，血流速度降低，经过血红细胞特异性染色（呈红色），患有血栓的斑马鱼心脏红细胞比正常斑马鱼心脏红细胞明显减少，由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点，可以明显被观察到；利用血管荧光斑马鱼结合显微镜，可以明显观察到患有血栓的斑马鱼血管直径减小；利用血流分析仪，可明显观察到患有血栓的斑马鱼血流速度减慢。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用抗血栓药物组。其中正常对照组未摄入普纳替尼，模型对照组与服用抗血栓药物组都摄入了等量的普纳替尼（普纳替尼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用抗血栓药物组在加入普纳替尼的同时摄入阿司匹林和二十五味珍珠片之类的抗血栓药物。

服用一段时间抗血栓药物后，（1）对斑马鱼整体做血红细胞特异性染色，观察血栓发生情况、心脏红细胞信号强度变化；（2）在荧光显微镜下分析斑马鱼血管直径变化；（3）在血流分析仪下观察斑马鱼血流速度变化情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼心脏红细胞表型图

黄色虚线区域为心脏，心脏内红色为红细胞

可以看到，服用抗血栓药物组的心脏红细胞数量与模型对照组比较明显增多。

图2. 斑马鱼血管直径表型图

可以看到，服用抗血栓药物组的血管直径与未摄入普纳替尼的正常对照组比较相似，未出现模型对照组血管直径显著减小的情况。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗血栓药物组的与模型对照组比较，心脏红细胞明显增多、血管直径明显增大、血流速度明显加快。

2.本实验证实了阿司匹林和二十五味珍珠片具有显著的抗血栓作用。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

 服 务 内 容 

● 基础研究  ● 品系构建  ● 基因编辑  ● 行为学分析

● 药效与安全评价  ● 保健食品功效与毒理评价  ● 病理学和影像学分析  ● 生化和分子生物学分析

一、哺乳动物品系

● 小鼠常规品系：C57BL/6J，ICR，BLAB/C-Nude（裸鼠）等。

● 小鼠疾病品系：代谢紊乱（糖尿病、三高），免疫缺陷，神经退化，自发性肿瘤，人源化模型等。

● 其它哺乳动物常规品系：大鼠SD/Wistar，新西兰白兔，青紫蓝兔，比格犬等。

● 体外模型：大小鼠原代神经元模型，原代神经干细胞模型，原代胶质细胞模型等。

● 特色 - 转基因猪定制服务：环特具备全国领先的基因编辑猪技术。根据客户构建基因编辑克隆胚胎，以业内顶尖妊娠率与出产率提供成体的基因编辑猪模型。

● 特色 - 基因编辑金黄地鼠定制服务：环特具备特色基因编辑金黄地鼠技术平台，拥有全国最尖端的基因敲除、定点突变和大片段插入技术，成功建立多种转基因品系，包括免疫缺陷、代谢紊乱、激素调节异常和条件性敲除模型等。

二、功效和安全性分析

三、行为学分析

四、病理学和影像学分析

五、生化和分子生物学分析

● 分子生物学检测：原位杂交、质粒构建、基因组提取与测序、彗星电泳、Real-Time PCR等。

● 生物化学和组学检测：酶联免疫吸附试验、流式细胞仪检测、肠道菌群组学分析、代谢组学分析、蛋白质组学分析等。

 服 务 案 例 

 平 台 简 介 

环特哺乳动物技术平台，专注于药物/保健食品相关研究和基因编辑服务，通过定制动物模型与服务方案以支持各类药物/保健食品的开发、临床前研究和临床研究。平台具备大量的技术经验和专业知识，以SPF级标准饲养环境下的大鼠、小鼠、兔、犬、金黄地鼠以及专业的基因编辑猪为模型基础，为客户提供高质量的转基因动物品系、疾病造模、功效与安全性评价以及行为学分析等专业服务。

环特哺乳动物技术平台提供“设计-实验-分析”等各方面的全面支持和服务：

（1）方案设计：平台可以根据需求提供合适的动物模型与服务方案策划，以确保能获得最佳的研究结果。

（2）体内/外研究：平台可以提供动物模型的繁育和饲养、实验过程中各项体征的观察记录、以及对血液/组织/器官样品的提取、处理和相关分子生物学、生物化学、免疫组化/荧光、蛋白质组学、代谢组学等指标检测。

（3）专业数据分析：平台提供行为学实验等结果的全面数据分析和统计服务，以确保研究成果准确可靠。

环特哺乳动物技术平台致力于为客户提供高质量、全面和个性化的动物模型和研究服务，以支持各种药物和保健食品的研发和临床应用。

 服 务 咨 询 

更多大小鼠等动物实验服务内容，请拨电话咨询：0571-83782130，手机 17364531293（微信同号）。

环特拥有实验动物生产和使用许可证，已通过CNAS、CMA、AAALAC认证，自有8500m²动物试验实验室。

【评价原理】

甲萘醌能产生活性氧自由基，当自由基产生量大于机体清除能力时就发生氧化应激反应,最终导致皮肤色素沉积，出现黄褐斑、老年斑。抗氧化成分能够减少皮肤内自由基的生成，对皮肤色素沉着有着良好的抑制作用。

斑马鱼通体透明，发生氧化应激反应后的斑马鱼皮肤色素沉着可以被明显观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成四组，分别是正常对照组、模型对照组、提亮肤色产品组。其中正常对照组未加入甲萘醌，模型对照组和提亮肤色产品组都摄入了等量的甲萘醌（甲萘醌通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。提亮肤色产品组在加入甲萘醌的同时摄入了N-乙酰-L半胱氨酸、燕窝酸等提亮肤色产品。

服用一段时间提亮肤色产品后，我们对斑马鱼皮肤进行拍照，观察皮肤的色素沉着的情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼提亮肤色表型图

从表型图可以看到，提亮肤色产品组的斑马鱼色素沉着和正常对照组没有明显的差别，未出现模型对照组斑马鱼色素沉着严重的情况。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，提亮肤色产品组色素沉着情况与正常对照组相似，并未出现模型对照组色素沉着严重的情况。

2.本实验证实了N-乙酰-L半胱氨酸、燕窝酸具有提亮肤色功效。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】

十二烷基磺酸钠（SLS）是人体皮肤刺激物模型斑贴试验常见的阳性对照物，SLS刺激后能诱发表皮炎症细胞浸润，中性粒细胞向皮肤表皮迁移，诱发皮肤炎症。中性粒细胞在斑马鱼的固有免疫与人类相似，主要依靠中性粒细胞和巨噬细胞发挥作用，而中性粒细胞在体内数量最多。

采用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，可在荧光显微镜在观察到免疫力低下的斑马鱼体内的中性粒细胞荧光强度明显减弱。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和舒缓剂组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与使用舒缓剂组都摄入了等量的SLS（SLS通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。舒缓剂组在摄入SLS的同时摄入阿司匹林和地塞米松之类的舒缓剂。

皮肤吸收一段时间舒缓剂后，我们观察斑马鱼卵黄囊皮肤上中性粒细胞数量。

【结果展示】

图1. 斑马鱼舒缓（炎症修复）表型图

黄色区域为分析区域，绿色光点为中性粒细胞

可以看到，模型对照组卵黄囊的中性粒细胞数量较正常对照组明显增多，而舒缓剂组中性粒细胞数量比模型对照组明显减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，使用舒缓剂组的皮肤中性粒细胞数量比模型对照组明显减少。

2.本实验证实了阿司匹林和地塞米松具有明显舒缓（炎症修复）功效。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

环特生物，利用斑马鱼模型实验，为功能食品/保健食品企业提供产品功效评价、功能检测、毒理安全性评价、原料筛选验证及安全检测、微生物检测等服务，周期短、费用低、直观高效。助力企业做好研发、品控和推广。

食品/保健食品及原料 评价检测项目

功效评价检测

安全性评价-毒理评价检测

更多的食品/保健食品评价检测项目及内容，请拨电话咨询：0571-83782130

环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

斑马鱼实验模型定制服务流程：

1、接受咨询，了解基本信息；

2、客户填写样品信息表；

3、提供报价单和项目建议书；

4、共同协商并签署合同；

5、寄送样品并支付首付款；

6、开展实验及时沟通；

7、完成实验提供电子版报告；

8、支付尾款；

9、寄送发票和纸质报告；

10、根据客户需要处理样品。

　　环特生物：斑马鱼生物科技，赋能大健康产业! 环特生物是全球的以“水中小白鼠”斑马鱼生物科技为核心的产品功效及安全性解决方案提供商，致力于通过活性成分筛选、功效及安全性评价，面向全球化妆品、保健食品、药品和食品企业提供产品和质控解决方案，持续创新斑马鱼技术，服务好大健康产业。

　　目前，环特生物已通过国家CNAS、CMA实验室认证及AAALAC国际认证，先后荣获德国纽伦堡国际发明金奖、国家高新技术企业、浙江省省级高新技术企业研究中心等荣誉，并与中国农科院质标所联合成立了“农业农村部农产品治疗标准研究中心生物评价实验室”。

　　公司技术研发团队由麻省理工学院博士后、国家万人计划李春启博士牵头作为全职首席科学家，多名海归、中科院、浙大、中国药科大学等国内高等院校毕业的博士和硕士生组成，技术顾问团队由中国中医科学院首席研究员、浙江大学教授等多位享受国务院特殊津贴和食品与大健康产业专家组成。

　　成立至今，公司累计完成项目超过5000个，建立长期合作的国内外企业、研发机构和高等院校超过200家。

【评价原理】

斑马鱼为鲤科短担尼鱼属的小型硬骨鱼，1998年国际经济合作与发展组织将斑马鱼胚胎发育方法列入测定单一化学品毒性的标准方法。由于斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87％，近年来斑马鱼被广泛应用于人类疾病模型及药物筛选、毒理学与环境检测中，使其成为新型的脊椎模式生物。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/注射供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中或胚胎注射的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体进行观察评价，观察斑马鱼心脏、脑部、耳、下颌、眼、肝脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、鳍、体长、身体着色、循环系统、身体水肿和出血等毒性反应情况，统计毒性发生率。

【结果展示】

图1. 斑马鱼胚胎毒性表型图

可以看到，服用/注射供试品组的斑马鱼眼变小、心包水肿、肝脏变性、卵黄囊吸收延迟、胃肠道发育延迟。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的组织器官产生明显的毒性表型，与正常对照组存在明显的差别。

2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有胚胎毒性。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

【评价原理】

OECD近年大力推崇的“有害结局路径”（Adverse Outcome Pathway，AOP）毒性评估策略来测试类雌激素这一大类有害物质。本方法参照粮农组织和世界卫生组织（FAO/WHO，2000）关于雌激素物质最高日摄取量来评估测试物的安全性，通过转基因标记技术表达的绿色荧光蛋白含量来量化类雌激素物质含量，绿色荧光蛋白特异性地在肝脏表达，一旦供试品中含一定量的类雌激素化学物质，雌激素转基因斑马鱼暴露后肝脏部位会出现绿色荧光，可用绿色荧光量化供试品中的类雌激素物质含量，从而达到检测效果。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水或注射的方式摄入到斑马鱼体内）。

摄入供试品一段时间后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肝脏荧光。

【结果展示】

图1.含类雌激素物质的供试品处理后斑马鱼荧光表型图

黄色曲线部位为肝脏，绿色荧光量化类雌激素含量

可以看到，摄入供试品组肝脏部位有明显的绿色荧光。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，摄入含类雌激素物质的供试品组斑马鱼肝脏荧光明显，与正常对照组存在明显差别。

2.本实验证实了该供试品含有类雌激素物质。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）