细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变可分为三个时期：I期，细胞核呈波纹状或折缝样，部分染色质浓缩；II期，细胞核染色质高度凝聚、边缘化；III期，细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。Hoechst为一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，与双链DNA结合后在荧光显微镜下能够观察细胞核的形态变化，常被应用于细胞凋亡的检测。细胞的保存于运输；复苏好的细胞，灌满培养基常温运输；冻存细胞液氮保存运输；实验外包: 1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

茜素红（Alizarin Red,AR）是众多染料中的一种，属于蒽醌类化合物，被广泛用于染料、酸碱指示剂，具有较高毒性、复杂结构以及化学需氧量（COD）值大等特点，是有代表性的染料之一。实验步骤1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。2、茜素红染色：切片用茜素红染液染5-10min，自来水洗，将切片放置烤箱内烤干。3、透明封片：切片入干净的二甲苯透明5min，中性树胶封片。4、显微镜镜检，图像采集分析。结果判读：钙盐沉积处呈深红色，背景淡红色或者近无色。实验外包: 1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

transwell侵袭实验，其实原理简单地说就是用一层膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开，细胞放在低营养的培养液里，为了找吃的，细胞会往高营养的培养液里面跑，但是有膜挡着，所以要穿过膜才行。在膜上涂上一层基质胶，模仿细胞外基质，细胞要把基质消化了才可以从低营养的培养液跑到高营养的培养液里面，最后检测高营养的培养液里细胞量就可以知道细胞的侵袭能力。实验材料（1）Matrigel (BD 5mg/ml)，-20℃保存（2）其余材料同迁移实验 操作步骤（1）Matrigel在4℃过夜融化；（2）用4℃预冷的无血清培养基稀释Matrigel至终浓度1mg/ml，冰上操作；（3）在chamber上室底部中央垂直加入100μl稀释后的Matrigel，37℃温育4－5小时使其干成胶状；（4）后续步骤同迁移实验（1-8）。 注意事项（1）Matrigel在过高或过低的温度均易凝固，因此操作所需枪头和离心管应提前在4℃预冷；（2）铺胶时保证液面水平，胶的厚度均匀一致，切勿产生气泡；（3）其他注意事项同迁移试验实验外包: 1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

一、细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。检测细胞迁移能力的实验包括划痕实验和Transwell实验。 二、实验原理 细胞划痕实验是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法，在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细胞至实验设定的时间是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。Transwell的基本原理是将transwell小室放入培养板中，小室内称为上室，培养板内称为下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，上室内添加上层培养液，下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内，由于膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 三、实验流程Transwell实验 1. 采用未铺 Matrigel 胶的 Transwell 小室用于实验； 2. 制备细胞悬液； 3. 接种细胞； 4. 检测穿过的细胞数； 5. 结果统计分析。 四、服务说明 1. 客户提供：细胞株(冻存株或培养好的细胞)，所需药品，药物处理方式和浓度。 2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果、剩余药品。 3. 实验周期：大约2-3周左右，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。注意事项（1）根据待测细胞体积大小选择合适孔径的chamber。常用的为8.0-μm孔径（如AGS细胞），如果细胞体积较大可以考虑用10-μm孔径；（2）根据待测细胞的迁移能力强弱调整细胞数和迁移时间。常规24-well chamber接种细胞数约为2≈5×104/well，迁移时间12≈36小时；（3）由于Corning公司的24-Transwell内含12个独立的chamber，为了避免操作污染，每次实验可预先另准备一块24孔普通培养板（Corning）；（4）如果细胞迁移能力较弱，下室液体可用3T3细胞无血清培养24小时获得的上清加50μg/ml FN（Fibronectin），具体可查阅相关文献；（5）细胞悬液加入膜中央，尽量保证液面水平；（6）固定染色擦洗时动作小心，避免擦去膜底面的细胞。但一定要充分擦净膜表面上未迁移的细胞，以免影响读数。尤其是膜周边上可用细牙签或小镊子缠上湿棉花擦洗，但要小心避免将膜戳破；（7）Chamber和膜上都无法标记，操作时应小心避免混淆实验组和对照组；（8）充分晾干，避免残留水分导致镜下聚焦不一致。 

细胞粘附是指细胞之间及细胞与细胞外基质之间的粘附。细胞粘附是维持形态结构与功能的生物现象，是细胞间信息交流的一种形式。而信息交流的可溶递质称细胞粘附分子(Cell Adhesion Molecule，CAM)。CAM是一类独立的分子结构，是通过识别与其粘附的特异性受体而发生相互间的粘附现象。细胞的生长、发育、分化及代谢状态和外界细胞因子、免疫、动脉粥样硬化、炎症介质反应等均可影响细胞粘附，细胞粘附也可能是肿瘤细胞易发生浸润、转移等现象的分子基础。样本的保存与运输复苏好的细胞，灌满培养基常温运输；冻存细胞液氮保存运输；实验外包: 1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

在受到凋亡诱导后线粒体转膜电位会发生变化，导致膜穿透性的改变，线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件 。         JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针。线粒体膜电位较高时，JC-1在线粒体的基质中形成聚合物，可以产生红色荧光；线粒体膜电位较低时，JC-1以单体形式存在于线粒体的基质中，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化实验外包:1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

ROS活性氧检测 ROS活性氧检测利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF，检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。客户注意事项 1、 抗体：事先咨询长沙南科生物，明确抗体种属以及是否有该抗体可使用，如有一抗使用费300元每指标，如无可由双方协商而定，客户自己购买提供或我公司代购；2、 标本收集与保存： 组织样品  新鲜组织放入液氮或-70度保存，组织不少于100mg（约绿豆大小）； 培养细胞  通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-70℃，避免反复冻融）； 血液细胞标本  以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-70℃可长期保存，避免反复冻融） 血清或细胞培养液标本  离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（以上4℃可保存15-20天，-70℃可长期保存，避免反复冻融） 3 、 样本运输：可选以下任何的一种方式寄送标本 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输； 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶（密封保证不污染，培养液不漏出，细胞不要长得太满，50%左右，灌满培养液）； 血清或上清液直接加冰袋寄送（密封保证液体不漏出，视路途远近2-3天可到达）。 

实时荧光定量PCR的化学原理1、染料法：SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有激发波长的染料。在游离状态下，SYBR Green I不能发出荧光，一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。2、探针法：TaqMan 探针法是PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。PCR实验流程一、引物设计二、RNA提取三、CDNA逆转录四、PCR扩增五、数据导出和分析客户需要提供；基本检测信息：1、样本类型（组织、血液、细胞、DNA、RNA、cDNA）及种属；实验的目的（靶基因的mRNA、MicroRNA或lncRNA定量、单核苷酸多态性分析、甲基化检测）；需要检测基因的中英文名称。2、样本量：PCR检测样本根据不同组织中DNA和RNA丰度高低，所需要的样本量也不同，一般组织样本不低于50mg、细胞样本不低于10^5，全血样本不少于300ul就可以检测多个基因；（建议动物组织或临床样本每组不低于6例，细胞样本建议做三复孔（提取逆转录后扩增时同一样本加三个平行孔），便于统计分析）实验周期：PCR实验周期为10个工作日实验外包:1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，1894年首次合成用来检测种子的生存能力，1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。实验外包:1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

尼氏染色即Nissl染色法，用来鉴定神经元胞体中的尼氏体，是最常用的神经细胞染色，在该染色中，尼氏小体清晰可见，可区分轴突和树突等。染色结果：尼氏体呈紫色、细胞核呈蓝色。常用的碱性染料有Cresyl violet (焦油紫，甲酚紫，克紫）；thionine (硫荲)；tolridine blue (甲苯胺蓝)等尼氏染色步骤：1.常规脱蜡至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脱水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）2.蒸馏水冲洗3次，每次5min3.然后置于60℃温箱用1%甲苯胺蓝染色40 min(或用焦油紫染色30s)4.蒸馏水洗净染料后，于分别置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脱水，再用二甲苯透明5.最后用中性树胶封片。实验外包:1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等