简介:瑞金特生物合成多肽采用逐步固相合成方法服务,利用微波技术处理反应体系,可以合成较长的复杂多肽。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,多肽的一个末端固定在特殊支持物上,通过循环步骤最终形成一条完整的多肽。肽链的设计:多肽是复杂的大分子,每条序列在物理和化学特性上都是独特的,研究人员设计多肽时应考虑到合成,纯化以及溶解等过程中的难度,从而能够使用该多肽达到自己的实验目的。以下是设计过程中的一些建议:如何降低肽链合成的难度: •减少序列长度 •减少疏水性残基数 •减少困难残基如何增强肽链的可溶性: •改变N端或C端 •缩短或加长序列 •加入可溶性残基 •通过置换一个或多个残基改变序列 •通过选用不同框架来改变序列多肽保存: •冻干多肽可在-20度保存或室温保存 •溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性PH(5-7)-20度保存。 •为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。多肽的溶解:大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水,稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也有帮助。如果这些方法用过后还不溶解的多肽,建议用DMF,脲,guanidiniam,chloride,acetonitnle来溶解。多肽的用途:主要用于抗体的制备,多肽疫苗,多肽微注射剂对基因结构与功能关系的研究。本中心提供不同纯度的多肽,多粗提产物到98%的医药级别,客户可根据需求进行选择。>80% :免疫学应用,多克隆抗体制备>90%:SAR研究,生物测定>95%:NMR,结晶化,体外生物测定>98%:NMR,结晶化,敏感的生物测定服务范围:a. 普通线性肽,链长至189个氨基酸,毫克至克级,纯度可达99%b. 简单修饰肽:免费提供N端乙酰化,末端酰胺化c. 复杂修饰肽:脂肽,磷酸肽(Ser、Thr、Tyr),环肽(酰胺环、二硫键环),荧光标记肽(FAM、FITC),生物素标记肽(BIOTIN)、复合抗原肽(MAP)等 ┄d. 蛋白交联:KLH,BSA,OVAe. 含特殊氨基酸肽:含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物f. 不同纯度范围(粗肽、>70%、>80%、>90%、>95%、>98%、>99%)
简介:瑞金特生物合成多肽采用逐步固相合成方法服务,利用微波技术处理反应体系,可以合成较长的复杂多肽。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,多肽的一个末端固定在特殊支持物上,通过循环步骤最终形成一条完整的多肽。肽链的设计:多肽是复杂的大分子,每条序列在物理和化学特性上都是独特的,研究人员设计多肽时应考虑到合成,纯化以及溶解等过程中的难度,从而能够使用该多肽达到自己的实验目的。以下是设计过程中的一些建议:如何降低肽链合成的难度: •减少序列长度 •减少疏水性残基数 •减少困难残基如何增强肽链的可溶性: •改变N端或C端 •缩短或加长序列 •加入可溶性残基 •通过置换一个或多个残基改变序列 •通过选用不同框架来改变序列多肽保存: •冻干多肽可在-20度保存或室温保存 •溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性PH(5-7)-20度保存。 •为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。多肽的溶解:大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水,稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也有帮助。如果这些方法用过后还不溶解的多肽,建议用DMF,脲,guanidiniam,chloride,acetonitnle来溶解。多肽的用途:主要用于抗体的制备,多肽疫苗,多肽微注射剂对基因结构与功能关系的研究。本中心提供不同纯度的多肽,多粗提产物到98%的医药级别,客户可根据需求进行选择。>80% :免疫学应用,多克隆抗体制备>90%:SAR研究,生物测定>95%:NMR,结晶化,体外生物测定>98%:NMR,结晶化,敏感的生物测定服务范围:a. 普通线性肽,链长至189个氨基酸,毫克至克级,纯度可达99%b. 简单修饰肽:免费提供N端乙酰化,末端酰胺化c. 复杂修饰肽:脂肽,磷酸肽(Ser、Thr、Tyr),环肽(酰胺环、二硫键环),荧光标记肽(FAM、FITC),生物素标记肽(BIOTIN)、复合抗原肽(MAP)等 ┄d. 蛋白交联:KLH,BSA,OVAe. 含特殊氨基酸肽:含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物f. 不同纯度范围(粗肽、>70%、>80%、>90%、>95%、>98%、>99%)
实验原理早期的shRNA载体多采用RNA聚合酶III型启动子介导shRNA的表达,RNA聚合酶III型启动子如鼠源的U6启动子和人源的H1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子RNA。随着miRNA干扰机制的深入研究,发展出第二代shRNA载体,即采用RNA聚合酶II型启动子CMV表达含侧翼序列的miRNA模拟物。该载体模拟miRNA的加工,表达出来的shRNA进入RISC沉默复合物的效率要比RNA聚合酶III型启动子表达的shRNA高数十倍,抑制效率更好,且可以和EGFP协同表达,方便观察转染效率。实验流程