类风湿性关节炎(RA)的病因与病理一直是医药工作者研究的热点,建立起理想的动物模型是十分必要的。近年来报道较多的是Ⅱ型胶原(CⅡ)和不完全弗氏佐剂(IFA)混合注射所致的关节炎模型(CIA)及弗氏完全佐剂诱导的佐剂动物关节炎模型。胶原关节炎模型比佐剂关节炎模型更接近人类RA的病理特征。本实验根据文献[1]的研究结果,为了更有效地观察到关节骨破坏模型,对传统的方法进行改良后得到大鼠类风湿颞下颌关节炎动物模型。  1 材料与方法  1.1 实验动物:Wistar大鼠48只,雌性,5周龄,体重约(120±15)g,随机分成两组,正常对照组、实验组各24只。  1.2 主要试剂:牛源性Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ),弗氏不完全佐剂(Incomplete Freund’s Adjuvant,IFA),美国Sigma公司产品。  1.3 方法  1.3.1 诱导产生大鼠类风湿颞下颌关节炎模型:剃除大鼠背部周围毛,取配置好的乳剂100μl,自鼠尾部开始,在脊柱两旁皮下多点注射,每只鼠注射1.0ml,1周后加强免疫1次,注射0.5ml/只。建立胶原诱导的大鼠实验性关节炎动物模型。对照组用生理盐水同期注射。实验热线：19931682702

模型制作方法:SD大鼠,7日龄,体重11-17g。新生大鼠清醒局部麻醉状态下,行右侧颈总动脉结扎术,再将动物置于恒温密闭玻璃容器中,通以8%O2+92%N2的混合气体,2h后取出,造成幼鼠窒息脑瘫模型。观察指标与分析:症状观察;头部血流量测定;脑组织水含量测定;脑组织中NO含量测定;脑组织中丙二醛含量测定。实验热线：19931682702

简介:梅尼埃病(Ménières disease)是一种特发性内耳疾病,该病主要的病理改变为膜迷路积水,临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。已知的病因包括以下因素:各种感染因素(细菌、病毒等)、损伤(包括机械性损伤或声损伤)、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免疫病等。豚鼠自身免疫免疫性梅尼埃病模型采用同种内耳抗原免疫豚鼠,部分动物能够对同种内耳抗原产生免疫应答,导致了单侧或双侧听力受损,并出现眼震等梅尼埃病症状。 模型制作方法:豚鼠,体重350g-400g,雌雄兼用。抗原制备 同种内耳抗原(GPCAG)取自豚鼠新鲜期骨。处死豚鼠后立即在解剖显微镜下取出迷路组织,置放与4℃0.01mol/l PH7.2的PBS中捣碎,匀浆,2500r/min离心10min,取上清液在751紫外分光光度计测定蛋白的含量,将蛋白浓度调到1200ug/ml。制成后立即免疫动物或加1/10000NaN3低温保存。豚鼠免疫方法 以同种内抗原400ug/0.05ml+CFA0.5ML,于豚鼠后足及背部皮下注射,第14天重复注射1次;第28天GPCAG 400ug/0.5ml+CFA0.5ml,于豚鼠背部多点皮下注射,第42天重复第28天注射1次。免疫后第9周检测动物模型是否成功。观测指标与分析: (1)、白细胞移动抑制试验;(2)、血清抗特异性内耳抗体;(3)循环免疫复合物;(4)、耳蜗电图测试耳蜗微音电位和AP;(5)内耳石蜡切片;(6)、内耳酶免疫组化学。如实验动物出现符合四个条件,即判断为动物模型成功。实验热线：19931682702

细胞株移植瘤模型(CDX)，即将体外传代培养的肿瘤细胞接种至免疫缺陷小鼠，也就是我们平时所说的裸鼠成瘤。裸鼠成瘤实验,即在裸鼠皮下注入肿瘤细胞，观察肿瘤的形成、发展及抗肿瘤药物的效果。动物选择一般选择4-6周龄Nude裸鼠,需要提前到SPF环境中适应1周。接种部位与接种细胞量接种部位常为皮下,静脉或原位;细胞量一般是5*106个/200ul,但是不同的细胞系的接种量略有差别。成瘤时间皮下接种的细胞一般会在1-2周成瘤,一般不会超过1个月;尾静脉和腹腔接种的细胞一般也是1周左右,需要密切观察动物的体重与状态进行判断。为什么肿瘤不长?如果细胞接种后超过预期的观察时间仍未成瘤,需要从以下方面进行排查原因:一是细胞活力,细胞活力是影响肿瘤形成的重要原因,活力不够不能成瘤,因此细胞消化下来PBS清洗后要尽快接种;二是动物选择,选择的裸鼠周龄不宜过大,否则也会增大成瘤难度(如果还未成瘤建议更换缺陷程度更高的Nod-scid小鼠,NOG小鼠);三是饲养环境,环境影响动物状态,状态差的鼠容易发生死亡,不易成瘤。为什么瘤子长起来又消失?很可能开始我们观察到的肿瘤是炎症反应,到后来肿瘤细胞被小鼠自身吸收,需要继续观察肿瘤细胞吸收之后是否还能长出来,长不出来建议分析上述原因重新实验。需要观察什么?在肿瘤长出后，需要密切观察动物的状态，体重和瘤体积。瘤体积的测量一般采用公式V=ab2/2进行计算。动物体重的增加活着减少量，直接反应着动物的整体状态，评估肿瘤是否出现转移等。如何判断肿瘤是否出现了转移?小动物活体成像。如果接种的肿瘤细胞带有荧光标签或者荧光素酶,可以借助小动物活体成像仪进行观察瘤细胞的大小和转移情况。小动物核磁。小动物核磁技术可以更明细的观察到肿瘤细胞在肝脏,肺脏或者其他器官的转移情况。实验热线：19931682702（同微信）

我实验室自有动物实验中心，可以对候选药物进行筛选，用来提高新药研发的成功率，减少研发费用，缩短新药的研发时间。细胞水平的药物筛选是种简单易行的检测药物在细胞中功能的方法。实验成本低、周期短、重复性好，可作为早期药物筛选的有效方法。建立的多种药物体外筛选模型，可为药物的药效提供有效的评价，作为早期药物筛选的有效方法。实验热线：19931682702（同微信）

细胞划痕愈合法是测定细胞迁移运动与愈合能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长(修复)至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移及修复能力。特点: 1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。4. 研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。传统实验方法 实验步骤: 1. 培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记(方便拍照时定位同一 个视野)。2. 细胞消化后接入12孔板,数量以贴壁后铺满板底为宜(数量少时可培养一段时间至铺满板底)。3. 细胞铺满板底后,用1 ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕,尽量保证各个划痕宽度一致。(人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果,这也是该方法最大的缺陷。)4. 吸去细胞培养液,用PBS冲洗孔板三次,洗去划痕产生的细胞碎片。 5. 加入无血清培养基,拍照记录。6. 将培养板放入培养箱培养,每隔4-6小时取出拍照。7. 根据收集图片数据分析实验结果。

脊髓损伤是一种致残率很高的疾 病, 给家庭、社会均带来沉重的负担。 随着工业、建筑业和交通 运输的飞速发展, 脊髓损伤患者数量呈逐年上升趋势。常用的造模方法有以下几种:1)脊髓撞击伤模型2)脊髓压迫伤模型3)脊髓横断损伤4)脊髓牵拉损伤模型5)脊髓缺血性损伤整体课题实验外包：19931682702（同微信）

比格犬是最常用的实验用犬，已成为实验研究型中最标准的动物，在国外，它已被广泛用于生物化学、微生物学、病理学、病毒学、药理学以及肿瘤学(如癌的病因学和癌的治疗学等)等基础医学的研究工作中，而农药的各种安全性试验，特别是农药工业中的各种实验，使用该犬最多。性情温和，易于驯服和抓捕，亲人。遗传性能稳定，在研究工作中为了得到重复性好而稳定，Beagle 品种固定且优良，一般无遗传性神经疾患。反应的一致性，形态体质均一，由于它血液循环系统很发达，且器官功能也是一致的，表现在体温稳定，又比杂种犬体温低0.5C，因此在实验中反应一致性好，尤其在实验中对环境的适应力、抗病力较强。性成熟期早，约8~12个月，产仔数多。由于该犬性格温顺，容易调教，遗传性疾病少，实验重复性好，尤其适合药理、循环生理、眼科、毒理、外科学等的研究，被国际医学、生物学界公认为较理想的实验用犬。实验专线：19931682702（同微信）

模型制作方法  新西兰白兔,体重2-2.5kg,雌雄兼用。参照图开胸冠状动脉左室支结扎/开放为心肌缺血再灌注模型的分法予以改进。实验前禁食12小时,耳缘静脉麻醉,将其仰卧固定预实验台上。沿颈部正中剪开,实施气管插管。沿胸骨左缘逐层切开胸壁软组织,剪断2-4肋骨,扩开切口,暴露心脏,剪开心包膜,用自制拉钩将心包膜对称、均匀牵拉并固定,在冠状动脉左室支离主动脉根部约8-10mm处,用眼科圆形弯针穿1根2-0丝线以备结扎。观察45min以上,使血液动力学各项指标稳定,收紧结扎线是动脉左室支缺血40min,然后放松结扎线,在灌注120min。观察160min.观测指标与分析1、心肌中INOS反转录PCR测定;2、心肌iNOS蛋白表达水平的检测;3、心肌细胞中iNOSmRNA原位杂交观察。实验专线：19931682702（同微信）

细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞的生长需要营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。优点1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动。2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广。5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化。6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产。实验热线：19931682702（同微信）