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辉骏生物在液相途径的蛋白质组学方面具有强大的实力和丰富的经验,已为各地科研单位提供数千例iTRAQ技术服务。一、iTRAQ实验原理        iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation,iTRAQ)定量分析蛋白质的基本原理是利用iTRAQ试剂是可与氨基酸末端氨基及赖氨酸侧链氨基连接而标记上肽段,经过色谱分离,一级质谱和二级质谱分析,在质谱图中,被标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中,信号离子表现为不同质荷比(114~121)的峰,因此根据波峰的高度及面积,可以鉴定出蛋白质和分析出同一蛋白质不同处理的定量信息。  二、与传统双向电泳定量分析相比,iTRAQ具有以下技术优势    1、灵敏度高,检测限低,可检测出低丰度蛋白;    2、分离能力强,分析范围广,iTRAQ可以对任何类型的蛋白质进行鉴定,包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白,膜蛋白和不溶性蛋白;   3、 高通量:同时对8个样本进行分析,提高了实验通量,可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析;     4、结果可靠:定性与定量分析结果更加可靠;   5、自动化程度高:液相与质谱连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。 三、iTRAQ技术服务内容   1、样本制备与定量;iTRAQ试剂标记;   2、液相分离和质谱分析;数据库检索;   3、蛋白质定量分析;   4、相关生物信息分析;   5、实验报告提交。 四、送样须知   1、技术咨询:在您开始实验之前,本公司将为您竭诚提供最有效的iTRAQ实验设计方案;   2、为了保证iTRAQ实验能顺利进行,样品寄送需满足以下要求:        基本要求:iTRAQ试剂可以标记任何类型的样本,如组织、细胞、细菌等材料。因此本公司接受任何类型的样本,对于不同的样本需要的量有所不同,具体需要量请咨询本公司。       运输要求:液氮或干冰保存寄送,广州本地客户可上门收样。       注:样本应避免各类污染和反复冻融。 五、iTRAQ实验报告内容   1、蛋白鉴定和定量分析结果;   2、顾客指定蛋白质对应的质谱峰图;   3、实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。 六、服务质量承诺   1、辉骏生物将为您提供严谨的iTRAQ实验设计方案   2、提供客观的iTRAQ实验分析结果。电话:400-699-1663邮箱: service@fitgene.com  官网:www.fitgene.com地址:广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506                提供商:辉骏生物服务名称:iTRAQ实验技术服务

规格:RNA pull down_WB产品价格:¥12000.0-¥15000.0规格:RNA pull down_MS产品价格:¥17600.0-¥22000.0一、技术概述        RNA pull down是体外研究RNA与蛋白互作的重要技术。该技术通过体外转录靶RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素磁珠结合,从而把靶RNA结合蛋白从蛋白提取液中分离出来。复合物从磁珠上洗脱下来,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与靶RNA结合;通过质谱仪检测,可以筛选到与靶RNA结合的蛋白。 二、技术原理        生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用;其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此用生物素标记核酸后,利用生物素和链霉亲和素之间的亲和作用,可以纯化出各种生物大分子复合物。        RNA pull down实验是用生物素标记体外转录的靶RNA分子,再用链霉亲和素纯化出与靶RNA结合的蛋白复合体,洗脱得到RNA结合蛋白质。 三、RNA pull down_MS       简介:体外转录目的RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与链霉亲和素磁珠孵育使之固定在磁珠上,用以“pull down”互作蛋白,纯化的产物蛋白经质谱鉴定,即可筛选到与目的RNA可能互作的蛋白。应用:筛选与目的RNA互作的蛋白。      优势:1、体外直接转录目的RNA作为诱饵,避免了RNA互补探针导致的非特异性结果;2、高效、通量大,一次性获得可能与目的RNA互作的蛋白。四、RNA pull down_WB简介:RNA pull down-WB用于RNA pull down-MS筛选到的RNA互作蛋白验证。五、技术应用        靶RNA结合蛋白的验证或筛选。 六、技术流程        RNA体外转录→与细胞/细胞核裂解液孵育→纯化互作蛋白→洗涤、洗脱互作蛋白→western-blot检测或质谱鉴定。 七、服务信息项目名称客户提供结果交付RNA pull -down  1. 基因信息(物种、序列或ID) 2. 细胞系及培养信息 3. 待验证的蛋白信息 4. 蛋白抗体1. 原始结果图(包括Input、阳性及阴性对照结果) 2. 完整实验报告(包括实验材料、方法、结果分析)RNA pull down_MS  1. 基因信息(物种、序列或ID) 2. 细胞系及培养信息  1. 原始结果图(input和洗脱液的SDS-PAGE图) 2. 质谱检索结果 3. 完整实验报告(包括实验材料、方法、结果分析)八、RNA pull down服务须知服务项目服务内容原价折扣价RNA pull down_WB       探针:5000,Pull-down:9000,WB:1000,细胞由客户提供或培养额外收费15000    12000   RNA pull down_MS        探针:5000,Pull-down:9000,MS:8000,细胞由客户提供或培养额外收费    2200017600参考文献        1.Identification of RNA-Protein Interactions Through In Vitro RNA Pull-Down Assays. Methods MolBiol 1480:99-113(2016).       2.The long noncoding RNA ASNR regulates degradation of Bcl-2 mRNA through its interaction with AUF1. Sci Rep 6:32189 (2016).       3.Silencing of the mRNA-binding protein HuR increases the sensitivity of colorectal cancer cells to ionizing radiation through upregulation of caspase-2. Cancer  Lett 393:103-112(2017).更多实验项目请联系我们:电话:400-699-1663 邮箱: service@fitgene.com  官网:www.fitgene.com地址:广州市萝岗区科学城广州国际企业孵化器D506货号:RNA pull down供应商:广州辉骏生物科技有限公司英文名:Fitgene规格:RNA pull down_WB /RNA pull down_MS

荧光素酶服务简介    荧光素酶 (Luciferase)报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测Luciferase活性的一种报告系统。Luciferase可以催化luciferin为氧化荧光素,并发出生物荧光。    双荧光素酶报告基因系统指的是在同一细胞中同时表达两种荧光素酶——萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶,利用一个报告基因作为内参来校正另一个报告基因,从而减少细胞活性和转染效率对实验结果的影响,使数据更准确。荧光素酶技术应用    1、将待测启动子构建至荧光素酶基因的上游,检测启动子活性;    2、在转染启动子荧光报告基因载体的同时转染转录因子的表达载体,检测转录因子与目标启动子的相互作用; 荧光素酶服务内容-辉骏生物   1、构建荧光素酶载体(或客户自备载体);   2、细胞培养与转染;   3、荧光素酶检测;   4、数据分析。辉骏生物技术优势-荧光素酶实验服务1、灵敏度高,细胞内均无两种荧光素酶的底物,无内源性干扰;2、检测范围宽,大于7个数量级;3、检测速度快,样品无需孵育等预处理;4、操作简便,可以在同一管内完成2个荧光素酶的检测。服务须知服务项目客户提供交付产物实验周期启动子活性检测1、待测启动子序列 2、含待测启动子的质粒模板 3、待转染的细胞和培养信息1、构建好载体的质粒和甘油菌 2、荧光素酶检测原始数据 3、数据分析结果3-5周转录因子与目的基因启动子区相互作用检测1、待测启动子、转录因子序列 2、含待测启动子的质粒模板 3、含待测待转录因子的质粒(可由我方构建) 4、待转染的细胞和培养信息1、构建好载体的质粒和甘油菌 2、荧光素酶检测原始数据 3、数据分析结果3-5周 实验周期及实验费用:请咨询我司全国免费热线电话400 699 1663,或者登陆我司网址查询:www.fitgene.com更多实验项目请联系我们:电话:400-699-1663邮箱: service@fitgene.com  官网:www.fitgene.com地址:广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506 提供商:广州辉骏生物科技股份有限公司服务名称:启动子分析