数量:大量品牌:普洛麦格Cat.# G6280 体系为100ml,含有的HaloLinkTM 树脂、TEV 蛋白酶和HisLinkTM 树脂悬浮液,占总体积的25%。Cat.# G6270 体系为10ml,含有的HaloLinkTM 树脂、TEV 蛋白酶和HisLink™ 树脂悬浮液,占总体积的25%。对于批量订购(如大于100ml)HaloLinkTM 树脂的客户,我们提供有竞争力的价格。请询价。组分列表说明 HaloTag® Protein Purification System (HaloTag®蛋白纯化系统)被设计用于纯化HaloTag® 融合蛋白,HaloTag® 是一种新型蛋白标签,能够增强重组蛋白的表达产率和可溶性。HaloTag® 技术能够将目的蛋白以共价结合的形式、高效并特异地捕获到HaloLink™ 树脂上,因此克服了其它使用亲和标签进行蛋白纯化的方法所带来的、基于平衡反应的限制因素( 例如,低水平表达蛋白的低效捕获和冲洗纯化树脂导致的蛋白流失)。可利用HaloTag® 技术快速、方便地检测HaloTag® 融合蛋白,也可监测HaloLink™ 树脂对蛋白的固定化效率,这是通过使用HaloTag® TMR 荧光配基进行标记,然后再进行SDS-PAGE 而实现的。实验指南可在下述技术手册中找到:HaloLink™ Resin 技术手册 #TM250, HaloLink™ Protein Array 技术手册 #TM310, 和HaloCHIP™ System 技术手册 #TM075。实验过程概述HaloTag® 蛋白是一个34kDa 的突变水解酶,通过一个被固化的氯化烷配基与HaloLink™ 树脂发生共价结合。TEV 蛋白酶可从HaloLink™ 树脂上将目的蛋白切下。TEV 蛋白酶具有一个N 端HQ标签,可以使用HisLink™ 树脂与目的蛋白分离开,这样就得到了纯化的目的蛋白。编码HaloTag® 蛋白并能够在大肠杆菌中使目的蛋白达到最优表达的最适载体是pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector(G2751) 和pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector (G2681)。这些载体可以单独购买。 特点 • 与His-Tag, GST 和MBP 亲和标签相比较,本系统产量大、纯度高、能够获得具有功能的可溶性蛋白:HaloLink™ 树脂以共价结合的方式捕获和固定HaloTag® 融合蛋白,特异性高。• 在原核、哺乳动物细胞和无细胞表达系统中,目的蛋白的表达得到增强:蛋白以HaloTag® 融合蛋白的形式表达。• 纯化表达量少的融合蛋白:HaloLink™ 树脂能快速、特异性地以共价结合的方式捕获HaloTag® 蛋白,这是一个非平衡过程。• 使用TEV 蛋白酶剪切,可高效回收目的蛋白:TEV 蛋白酶剪切HaloTag® 蛋白和目的蛋白之间的连接肽段,其识别位点已经经过优化。由于是共价连接,HaloTag® 蛋白仍固定在树脂上。• 节省时间:仅使用一种与下游应用兼容的缓冲液,即可支持所有的纯化步骤。• 使用HaloTag® 荧光配基可轻松实现凝胶内检测和蛋白表达水平的定量:HaloTag® 蛋白- 配基相互作用非常稳定,可以在含有SDS 的样品缓冲液中煮沸,并直接使用SDS-PAGE 分离。 操作手册 Technical Manual TM312 储存条件 将HaloLink™ 树脂和HisLink™ 树脂储存于4℃。不要将树脂冷冻。将TEV 蛋白酶储存于–20℃。 温馨提示:不可用于临床治疗。
数量:大量规格:高纯,99%说明:胰蛋白酶(Trypsin) 能够特异地水解赖氨酸和精氨酸残基的羧基端肽键。未经修饰的胰酶会自我水解,形成片段,从而干扰蛋白质测序、HPLC 或肽链的质谱分析。另外,自我水解将会导致假胰酶产生,表现出额外的胰凝乳蛋白酶的特性。Promega 的胰蛋白酶经过了甲基化还原反应修饰,极大程度的阻止自我水解。在功能稳定测试中,经过修饰的胰酶在37℃孵育3 小时后保留的活性至少是未修饰胰酶的2 倍。经过修饰的测序级胰蛋白酶进一步经过TPCK 处理和亲和层析纯化,得到高度活性和稳定的分子。测序级修饰胰酶以每瓶20mg 提供,使用方便,并配有优化了稳定性的重悬缓冲液。建议使用蛋白酶: 蛋白比例为1:100 到1:20(w/w)。温馨提示:不可用于临床治疗。