KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶联蛋白 小肽/半抗原必须耦合到载体蛋白(KLH,BSA,Ova),才可以获得高效的抗体。一般来说,多肽可以与蛋白偶联的条件如下:1.有一个自由的氨基或羧基。2.半胱氨酸上的-SH也可以与载体蛋白偶联目前我公司提供高质量的偶联载体蛋白(KLH,BSA,OVA)。 载体蛋白KLH,BSA,OVA偶联-多肽修饰肽-载体蛋白偶联多用于制备抗多肽类抗体,单独的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反应,而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞,进一步诱导B细胞免疫反应。 免疫系统是将肽-蛋白作为一个整体来激起免疫反应的,因而产生的抗体中有针对多肽的,有针对链接剂的,也有针对载体蛋白的。其中最常见的载体蛋白有如下几种: KLH(KeyholeLimpetHemocyanin),即血蓝蛋白,是在某些软体动物、节肢动物(蜘蛛和甲壳虫)的血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子,与含铁的血红蛋白类似,它易于氧结合,也易与氧解离,是已知的惟一可与氧可逆结合的铜蛋白,氧化时呈青绿色,还原时呈白色。其分子量450000~130000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性,因而是最常被选用的载体蛋白。 BSA(BovineSerumAlbumin),即牛血清白蛋白,属于最稳定的和可溶的白蛋白。其分子量为67x103Da(含有59个Lys)。大约有30-35个主要氨基可用于与链接剂发生共轭反应,使得BSA成为一种很流行的弱抗原化合物载体蛋白。 BSA的不利之处在于在很多实验中,它被当作封闭剂使用,如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测分析中,通常会出现假阳性,因为这些血清含有抗BSA的抗体。 OVA(Ovalbumin),即鸡卵白蛋白,分子量为45x103Da。它可作为第二载体蛋白去验证抗体是否特异性地只针对多肽而并非载体蛋白(如BSA)。 巯基修饰(通过Cys的侧链)用于与KLH、BSA或OVA发生共轭反应 所有携带巯基反应的功能基团经修饰都可被用来发生共轭反应。其中最常见的有以下几种: 碘乙酰胺(Iodoacetamide) 马来酰亚胺(Maleimide) 烷基卤(Alkylhalide)合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
同位素技术,同位素标记随着多肽在生物医药领域越来越广泛和深入的应用,标记和修饰性的多肽种类的需求越来越多,质量需求也越来越高。稳定同位素标记就是其中典型的一种。稳定同位素标记示踪,可以实现肽类代谢途径研究,能够随时追踪含有同位素标记的多肽在体内或体外位置及数量的变化情况。同位素标记具有高灵敏度、定位简单、定量准确等优点,使得同位素修饰在医学及生物化学领域得到越来越广泛的关注。目前我们公司合成的同位素标记多肽主要为C13,N15两种同位素标记的多肽,通过直接在肽链中引入同位素标记的氨基酸达到有效标记整条肽链的目的,常用的同位素标记的氨基酸有Tyr,Thr,Lys,Arg,Glu等。同位素标记的多肽与普通肽的区别在于其结构中某一个或几个氨基酸中的C被C13取代或者N被N15取代。专业的团队,一流的合成纯化技术,严谨的工作态度,严格的质量要求,是我们能够满足客户对同位素标记多肽的不同纯度要求的重要保障。与此同时,同位素标记多肽的原料(同位素标记的氨基酸)价格昂贵,使得我们合成成本高,这就直接导致了这种多肽价格的高昂,秉着客户至上,竭力满足客户需求的经营理念,我们国肽生物提供微克,毫克到千克级别的质量服务。成功案例:序列WVQTLSEQVQEELLSSQVTQEL[13C-15N-R]HPLC分析:MS分析:合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
合成多肽是α-氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。 由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。合成多肽方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中,根据多肽片段的化学特定性或化学选择性,多肽片段能够自发进行连接,得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少,所以纯度较高,且易于纯化。多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法,随着生物工程技术的发展,以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。合成多肽的原理 多肽合成就是如何把各种氨基酸单位按照天然物的氨基酸排列顺序和连接方式连接起来。由于氨基酸在中性条件下是以分子内的两性离子形式(H3+NCH(R)COO-)存在,因此,氨基酸之间直接缩合形成酰胺键的反应在一般条件下是难于进行的。氨基酸酯的反应活性较高。在100℃下加热或者室温下长时间放置都能聚合生成肽酯,但反应并没有定向性,两种氨基酸a1和a2的酯在聚合时将生成a1a2…、a1a1…、a2a1…等各种任意顺序的混合物。 为了得到具有特定顺序的合成多肽,采用任意聚合的方法是行不通的,而只能采用逐步缩合的定向多肽合成方法。一般是如下式所示,即先将不需要反应的氨基或羧基用适当的基团暂时保护起来,然后再进行连接反应,以保证多肽合成的定向进行。 式中的X和Q分别为氨基和羧基的保护基,它不仅可以防止乱接副反应的发生,还具有能消除氨基酸的两性离子形式,并使之易溶于有机溶剂的作用。 Q在有的情况下也可以不是共价连接的基团,而是由有机强碱(如三乙胺)同氨基酸的羧基氢离子组成的有机阳离子。Y为一强的吸电子基团,它能使羧基活化,而有利于另一氨基酸的自由氨基,对其活化羧基的羧基碳原子进行亲核进攻生成酰胺键。 由此所得的连接产物是N端和C端都带有保护基的保护肽,要脱去保护基后才能得到自由的肽。如果肽链不是到此为止,而是还需要从N端或C端延长肽链的话,则可以先选择性地脱去X或Q,然后再同新的N保护氨基酸(或肽)或C保护的氨基酸(或肽)进行第二次连接,并依次不断重复下去,直到所需要的肽链长度为止。 对于长肽的多肽合成来说,一般有逐步增长和片段缩合两种伸长肽链的方式,前者是由起始的氨基酸(或肽)开始。每连接一次,接长一个氨基酸,后者则是用N保护肽同C保护肽缩合来得到两者长度相加的新的长肽链。 对于多肽合成中含有谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、半胱氨酸等等带侧链功能团的氨基酸的肽来说,为了避免由于侧链功能团所带来的副反应,一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。 合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量低于10,000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);10~50个氨基酸组成的肽称为多肽;由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。生物体中广泛存在的一类生物大分子,由核酸编码的α氨基酸之间通过α氨基和α羧基形成的肽键连接而成的肽链,经翻译后加工而生成的具有特定立体结构的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链,再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合合而成的高分子化合物。我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务,定制出有针对性的合成肽。目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达150个氨基酸,在修饰肽合成上,能提供常见修饰,磷酸化(Ser/Thr/Tyr),环化(酰胺环/二硫键环),荧光标记(5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl等),生物素标记(Biotin,Lys(Biotin))/复合抗原(MAP)/含D型氨基酸,及各种氨基酸衍生物均可合成。多肽产物纯度选择常见的质谱级多肽纯度,一般要求>95%用于抗体筛选纯度,一般>85%即可NMR和结晶试验中,纯度一般>98%粗品肽,一般>50%即可用于多肽筛选国肽生物 提供 多肽合成、多肽修饰、cGMP多肽、目录肽、药物肽/化妆品肽、多肽文库构建、中间体定制及合成、抗体服务、氨基酸、糖肽、订书肽、多肽核酸等优越的领先技术合成方法(固相合成/液相合成)修饰性多肽(常见的N端修饰,C端修饰及其他特殊修饰)偶联技术(KLH,BSA,OVA偶联)首位环化技术,3个磷酸化,3对二硫键胰岛素工艺提供技术转让服务优质的产品服务合成质量:毫克至克级甚至kg合成纯度:Crude,脱盐,70%, 75%, 80%,85%, 90%, 95%,98%,99%定制长度:2-150个氨基酸免费提供:合格的HPLC和MS,COA文件,质量控制包含合格的纯度,合成的质量,分子量,溶解度等((如有特殊需要,可提供核磁,红外,紫外,元素分析,水分含量测定以及氨基酸分析服务))交货期限:1-30个长度最快1-2周交货合成数量:月通量可达8000-10000条药用肽,大批量肽。协助客户建立科研肽库。抗原多肽及其与蛋白的交联:KLH,BSA, OVA服务流程确定合成序列,我们将在12小时内容提供准确报价。详情请咨询合肥国肽生物合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
抗菌肽产业是一个新兴的高科技生物工程和生物技术产业。由于早期生物工程方法不完善,抗菌肽的提取极为昂贵,限制了在医药、农业、工业上的应用。随着转基因技术的进一步发展,现已可以使用工程细菌或酵母菌进行抗菌肽的大量生产,但其核心技术仅被为数不多的科学家和公司掌握。其市场应用广泛,在农业上,可用于饲料添加剂,并且适合各种动物的饲养;医药上,可以作为优秀的抗菌素替代品,也被认为是将来能克服癌症、艾滋病很有希望的药物;工业上,可以作为绿色防腐剂;人类生活上,可作为保健品与抗菌物的替代品。现在大多数临床试验是用于局部治疗,这种治疗应该是安全和有效的,因为一些毒性更强的多肽和脂多肽,如短杆菌肽S,多粘菌素B已被用于制造皮肤软膏。这些多肽也可用于那些常规抗生素和常规疗法无效的地方。利用粉剂的方法治疗肺部感染是一个很有前途的发展方向。口服药物可能会被用于治疗肠道感染,nisin正在进行抗螺旋杆菌的临床试验。至少有两个公司正在开发非肠道给药的治疗方法。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com
国肽生物是一家专业从事多肽产品的研发、生产和销售以及多肽技术转让的高新技术企业。BP公司成立之初,便成功收购了国内几家多肽、抗体公司,是目前国内的专业多肽合成、抗体制备、蛋白表达的规模型生产企业。一、特殊类别多肽:订书肽、同位素标记多肽、磷酸肽、环肽、二硫键多肽、糖肽、药物肽、化妆品肽等二、修饰肽:磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC、CMK、FMK等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、RGD环肽等三、特殊氨基酸多肽:可以将种类繁多的非天然氨基酸合成到多肽上。四、合成方法:多肽固相合成、多肽液相合成、点击化学、一锅法合成等服务内容标准肽:链长至 150个氨基酸,毫克至克级,纯度最高可达99%。不同纯度范围:粗肽、脱盐、>75% 、> 85% 、>90%、>95%、>98%、>99%。常规修饰肽:乙酰化,酰胺化,生物素标记肽,磷酸化肽,D型氨基酸修饰肽等。特殊修饰肽:磺酸化肽(Sulfated-tyrosine),环肽(二硫键环化,首尾环化),荧光标记肽(FITC,Dabcyl/Edans,Dansyl,FAM,Abz/Dnp,Rhodamine等),甲基化多肽(Lys(Me2),Lys(Me),Lys(Me3),Arg(Me),Arg(Me2) -Symetrical,Arg(Me2) –Asymetrical),同位素标记肽(Heavy Isotope Labeled Peptides)、拟肽(peptoid)和点击化学用多肽(Peptides for Click Chemistry)。药用肽,大批量肽。协助客户建立科研肽库。抗原多肽及其与蛋白的交联:KLH,BSA, OVA国肽生物按照客户定制要求供应高品质普通多肽。我们拥有成熟的多肽合成纯化方法,利用SPPS方法和液相合成方法为客户提供高品质多肽。我们的服务特点是:1. 纯度:我们提供粗品肽和纯度纯度为70%,75%,80%,85%,90%,95%,98%,99%的纯品多肽。2.脱盐和转盐:根据客户要求,我们可以对多肽进行脱TFA盐处理,也可以转为醋酸盐。3.交货期限:30个氨基酸之内,一般2-3周,最快1-2周。4.质量控制:每条多肽都免费提供合格的HPLC,MS和COA文件。5.售后服务:1-2周内可以提出异议,我们免费复测,不合格免费退货,1-3个月内使用不合格可以免费提供复测,样品免费保存3个月。国肽生物根据客户要求,供应各种修饰型多肽。1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽:我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务,目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。2.5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽:荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术,我们的这项技术已经相当成熟。3.生物素Biotin,Lys(Biotin)修饰的多肽:生物素是维生素B2的组成部分,Biotin,Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽:二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用,目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。5.含有同位素C13,N15修饰的多肽:同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域,通常价格较高,为了满足客户需要,我们接受微克级的同位素多肽定制。6.含有特殊氨基酸修饰的多肽:例如,D型氨基酸,氨基酸衍生物,脂肪族羧酸等等,都在我们接受的定制范围内。国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。多肽合成过程中,肽链过长时,经常会出现缺残基,氨基酸缩合困难等情况,基于这些现象,我们开发了三种有效提高反应成功率的方案:1. 微波合成法:对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸,我们采用微波法进行合成,该方法效果显著,并且大大缩短了反应时间。2. 片段合成法:当某些多肽用常规合成方法合成困难,我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去,这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。3.酰肼合成法:酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接,该方法根据肽链中Cys的位置,将整条肽链分成多条序列分别合成,最终经过液相缩合反应得到目标肽,显著地提高了最终产物纯度,广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺,能够根据客户定制的多肽序列,快速有效地设计合成方案并迅速开始合成,更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com 详情请咨询合肥国肽生物
蛋白质磷酸化是生物界最普遍,也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰,20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中,大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关,如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理,进一步认识生命活动的本质。近年来随着蛋白质组技术的不断发展,蛋白质磷酸化的研究越来越受到广泛的关注。蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用磷酸化多肽主要指肽链中的Ser、Tyr和Thr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白质磷酸化过程的必不可少的工具,因此研究蛋白质及多肽的磷酸化反应并确定成熟简便的合成路线就变得非常重要。目前为止,多肽的磷酸化修饰主要有后磷酸化法和单体法两种合成方法。后磷酸化法是多肽序列在树脂上合成完后,再对其中的Ser、Tyr或Thr的侧链羟基进行磷酸化;单体法则是将适当保护的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中,这种方法较后磷酸化法操作更为简便,已经成为多肽磷酸化修饰的主要方法。单体法修饰时,磷酸化的氨基酸由于侧链修饰的较大基团产生的位阻而导致难以与肽链缩合,并且之后的氨基酸引入都会比较困难,尤其在含有多个磷酸化位点修饰时,合成将变得异常困难,并且最终产物成分复杂,难以分离,产率极低。因此,当肽链中多个位点进行磷酸化时,可以考虑采用后磷酸化法,其合成过程主要就是在多肽合成结束之后,选择性的脱去要标记氨基酸的侧链保护基,对于Tyr,Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应。侧链保护基在1%TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化时,可以采用双苄基亚磷酰胺,四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体,连接到羟基上,然后在过氧酸条件下氧化生成磷酰基,完成反应。我们提供多肽进行两个,三个,四个,五个磷酸化位点修饰的高质量多肽。拥有成熟的合成纯化技术,不断进取的精英团队,国肽生物已经成为值得信赖的多肽供应品牌。成功案例:序列NH2-TERD(pS)D(pT)DVEEDSRPPGRPAEVHLERAQPFGFID(pS)D(pS)DAEEEY-CONH2,四个磷酸化修饰位点。HPLC分析:MS分析:合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com