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石榴皮鞣素操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。石榴皮鞣素标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。石榴皮鞣素试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法    1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。    3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。    4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。    5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。    6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。 温馨提示：不可用于临床治疗。 

笃玛 鸡生长分化因子1(GDF1) ELISA 试剂盒  产品简介Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法    1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。    3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。    4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。    5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。    6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。笃玛 鸡生长分化因子1(GDF1) ELISA 试剂盒  产品简介ELISA 实验步骤：1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。5.显色：TMB显色A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液：2N硫酸A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。6.450nm 波长测OD值笃玛 鸡生长分化因子1(GDF1) ELISA 试剂盒  产品简介操作注意事项1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

笃玛 鸡血管生成素(ANG) ELISA 试剂盒  产品信息标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。笃玛 鸡血管生成素(ANG) ELISA 试剂盒  产品信息ELISA 实验步骤：1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。5.显色：TMB显色A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液：2N硫酸A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。6.450nm 波长测OD值笃玛 鸡血管生成素(ANG) ELISA 试剂盒  产品信息样品收集、处理及保存方法1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 

小鼠血清胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体等很少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要新生牛和小牛要好。血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。小鼠血清10270-106胎牛血清   血清的主要成分：血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。10270-106胎牛血清   其他血清产品推荐：Gibco  16000-044胎牛血清(澳洲）优级胎牛血清最受欢迎的FBS产品。高品质，高价值，适用于更娇贵的细胞培养和部分干细胞的培养。小鼠血清试剂及配制1、缓冲生理盐水：（ 1） 贮存液： Na2HPO4.12H2O 2.85g                KH2PO4 0.27g                NaCl 17.00g                蒸馏水定容至 100ml                4℃保存备用（ 2）应用液： 5ml 贮存液加 95ml 蒸馏水，再加 10%硫酸镁 0.1ml， 当日配制， 12 小时内使用。2、2%绵羊红细胞：无菌采取绵羊血液，于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以缓冲液洗 3次，并配成 2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。3、溶血素：将绵羊红细胞溶血素（效价 1:4000），用应用液做 1:2000 倍稀释（即 1ml 溶血素加 1999ml 应用液）。4、待测血清：新鲜血液室温放置 30min，再 4℃放置 60min，使血块收缩， 4℃离心（ 3000r/min）10min，取上清， -20℃保存。

羊抗马IgG血清操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。羊抗马IgG血清胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体等很少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要新生牛和小牛要好。血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。羊抗马IgG血清相关热卖血清： 品牌：Serana 南美源胎牛血清（货号：S-FBS-SA-015）         规格：500ML                        品牌：BOVOGEN南美源胎牛血清（货号：SFBS）        规格：500ML                        品牌：BOVOGEN澳洲源胎牛血清（货号：SFBS）        规格：500ML                        品牌：Hyclone南美源胎牛血清（货号：SV30087.01）  规格：100ML                        品牌: Hyclone南美源胎牛血清（货号：SV30087.02）  规格：500ML                        品牌：Hyclone澳洲源胎牛血清（货号：SH30084.03）  规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30070.03）  规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30070.03E） 规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30068.03）  规格：500ML                        品牌：Gibco南美源胎牛血清（货号：10270106）      规格：500ML                        品牌：Gibco巴西源胎牛血清（货号：12657029）      规格：500ML                        品牌：Gibco南美源胎牛血清（货号：C20270）        规格：500ML                        品牌：Gibco墨西哥源胎牛血清（货号：10437028）    规格：500ML                        品牌：Gibco美国源胎牛血清（货号：16000044）      规格：500ML                        品牌：Gibco澳洲源胎牛血清（货号：160099133）     规格：100ML                        品牌：Gibco澳洲源胎牛血清（货号：160099141）     规格：500ML

 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒实验原理   试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被生长因子受体结合蛋白14(Grb14)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长因子受体结合蛋白14(Grb14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。保存条件及有效期本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中生长因子受体结合蛋白14(Grb14)的含量。有效期：6个月保存条件：2-8℃鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒一、标本的采集及保存 1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒二、标本的稀释原则   首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 1.标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。2.生物素标记抗体的稀释原则： 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。3.辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则： 临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 操作步骤 实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒三、操作步骤1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。 3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。 4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。 5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。 6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒四、试剂盒使用小技巧1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。 洗板方法 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒五、技术小提示1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。 3. 一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。 5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。 6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。 7. 底物请避光保存。 8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒六、注意事项1.收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本， 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。2.标本2 -8 ℃可保存48 小时，-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。3.部分激素类标本需添加抑肽酶。 4.计算方法：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒七、试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒八、保存条件及有效期1.试剂盒保存：2-8℃。 2．有效期：6个

大鼠血清10270-106胎牛血清c2027-050胎牛血清 c2027-050 gibco 乌拉圭            胎牛血清 500ml12657-029胎牛血清 12657-029 gibco 巴西              胎牛血清 500ml12676-029胎牛血清 12676-029 gibco 墨西哥活性炭处理    胎牛血清 500ml26140-079胎牛血清 26140-079 gibco 美国 优级           胎牛血清 500ml30044-333胎牛血清 30044-333 gibco 新西兰  胚胎干细胞专用 胎牛血清 500ml30067-334胎牛血清 30067-334 gibco 新西兰 透析型       胎牛血清 500ml10082-147胎牛血清 10082-147 gibco 美国 特级.热灭活    胎牛血清 500ml12484-028胎牛血清 12484-028 gibco 加拿大 优级 热灭活  胎牛血清 500ml10437-028胎牛血清 10437-028 gibco 墨西哥 优等级       胎牛血清 500ml10100-147胎牛血清 10100-147 gibco 澳洲 优等级.热灭活  胎牛血清 500ml16140-071胎牛血清 16140-071 gibco 美国 优等级.热灭活  胎牛血清 500ml10438-026胎牛血清 10438-026 gibco    优等级.热灭活  胎牛血清 500ml26400-044胎牛血清 26400-044 gibco 美国 透析型         胎牛血清 500ml16141-079胎牛血清 16141-079 gibco 美国 胚胎干细胞专用 胎牛血清 500ml10439-024胎牛血清 10439-024 gibco 墨西哥和中美洲 胚胎干细胞专用 胎牛血清 500ml12664-025胎牛血清 12664-025 gibco 澳洲 间充质干细胞专用大鼠血清操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。大鼠血清纯正澳洲进口原料，经3次100nm过滤分装，内毒素<10,产品质量符合《美国药典》具有非常卓越的促细胞生长能力，适合干细胞和娇贵细胞培养采用国内采集的胎牛血清原料（心脏穿刺取血），经3次100nm过滤分装，内毒素<10,产品质量符合《美国药典》，国内真正意义的胎牛血清促细胞生长能力优于进口南美胎牛血清，适合细胞株的保藏和娇贵细胞的培养采用国内采集的胎牛血清原料，经3次100nm过滤分装，内毒素<25,产品质量符合《美国药典》具有良好的促细胞生长能力，堪比进口南美胎牛血清适用于科学研究机构和制药企业新产品研发

牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒ELISA试剂盒常见问题解析：1.加样量不一致？解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒样品测定1． 移取xx微升 去干扰液（Reagent C）到上述待测样品或标准样品管里，混匀2． 加入xx微升 反应液（Reagent D）3． 加入xx微升 显色液（Reagent E），混匀4． 室温下孵育20分钟5． 放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g6． 移取1毫升上清液到比色皿7． 即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PB（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

牛载脂蛋白A1(ApoA1) ELISA 试剂盒 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。500ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液250ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液125ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液62.5ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液31.25ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  4. 配液：将30倍（48T的20倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。牛载脂蛋白A1(ApoA1) ELISA 试剂盒 酶联免疫试验步骤     将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。     编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。     加样反应：加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。      洗    涤：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。      显    色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。      终    止：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，终止反应。      测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完牛载脂蛋白A1(ApoA1) ELISA 试剂盒 注意事项1． 本产品为20次操作，包括标准样品2． 本产品检测范围在0.1毫克/升（10微摩尔/升）至8.5毫克/升（250微摩尔/升）3． 操作时，须戴手套4． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全5． 系统操作过程中，标准样品测定只需1次6． 试剂出现沉淀可以离心去除后检测7． 测定值由低到高变化8． 用户可以使用664nm至670nm波长范围的任一波长进行检测9． 比色测定后，比色皿须清洗彻底10． 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品量11． 样品中碘（iodine）大于2毫克/升、（thiosulfate）或（sulfite）大于10毫克/升、亚铁酸盐等可能干扰检测12．浓度换算：1毫克/升=29.4微摩尔/升13． 本公司提供系列生化学检测试剂产品