土贝母苷甲标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。土贝母苷甲操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。土贝母苷甲洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
笃玛 绵羊补体C3转化酶(C3c) ELISA 试剂盒 产品简介ELISA 实验步骤:1.包被抗原:稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液,多肽浓度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC过夜,洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭,0.1ml/孔,37oC1h,洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔,37oC 30分钟,洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔,37oC 40分钟,洗净。5.显色:TMB显色A液:四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液:5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液:2N硫酸A液、B液各一滴,比光显色10分钟,终止液一滴。6.450nm 波长测OD值笃玛 绵羊补体C3转化酶(C3c) ELISA 试剂盒 产品简介酶联免疫试验步骤 将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 加样反应:加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。 显 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。 终 止:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,终止反应。 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。笃玛 绵羊补体C3转化酶(C3c) ELISA 试剂盒 产品简介操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。500ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液250ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液125ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液62.5ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液31.25ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
鸡蛋白聚糖(PG)ELISA试剂盒产品说明书一、产品简介本试剂盒采用双抗体夹心法,利用纯化的抗原包被酶标板,加入标准品及待测样本,孵育后与特异性抗体结合形成抗原-抗体复合物,再与酶标二抗结合形成复合物,最后通过底物显色反应,测量光密度值,计算抗原浓度。二、产品特点1. 特异性:针对鸡蛋白聚糖(PG)抗原设计,具有高特异性,能准确检测样品中鸡蛋白聚糖(PG)抗原。2. 灵敏度高:本试剂盒灵敏度高达pg/ml水平,可满足大多数实验需求。3. 稳定性好:经过严格的质量控制,试剂盒稳定性好,批内批间误差小。4. 操作简便:本试剂盒操作简便,仅需加入标准品及待测样本,无需特殊设备及技能。5. 安全性高:本试剂盒采用纯化的抗原包被酶标板,不含任何可能对实验产生干扰的成分。三、实验原理本试剂盒采用双抗体夹心法,将纯化的鸡蛋白聚糖(PG)抗原包被在酶标板上,加入标准品及待测样本,孵育后与特异性抗体结合形成抗原-抗体复合物,再与酶标二抗结合形成复合物,最后通过底物显色反应,测量光密度值,计算抗原浓度。四、实验步骤1. 包被:将纯化的鸡蛋白聚糖(PG)抗原加入到酶标板中,包被抗原浓度为10μg/ml。2. 封闭:加入适量封闭液,封闭未结合的位点。3. 清洗:清洗酶标板以去除未结合的物质。4. 加标准品及待测样本:加入标准品及待测样本,每个孔加入100μl。5. 孵育:在37℃下孵育1小时。6. 清洗:清洗酶标板以去除未结合的物质。7. 加酶标二抗:加入酶标二抗,每个孔加入100μl。8. 孵育:在37℃下孵育30分钟。9. 显色反应:加入底物溶液,在37℃下孵育15-30分钟。10. 终止反应:加入终止液,停止显色反应。11. 检测:用酶标仪测量各孔的光密度值,记录数据。12. 分析:根据标准品浓度及光密度值绘制标准曲线,根据待测样本的光密度值计算其抗原浓度。
绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒产品包装:盒装性状:瓶装液体规格:96T/48T保存条件:2-8℃保存期限:6个月运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者生物冰袋低温运输。上海笃玛生物科技有限公司现货国产/进口常温保存低温保存咨询客服待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等ELISA人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0 pg/mL。3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒ELISA的样本实验准备在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3. 尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。5. 培养细胞 检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6. 组织标本 切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 笃玛代测服务:技术服务内容: 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。寄标本时需注明以下情况:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;4、联系方式;5、实验后标本是否寄回。
豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒笃玛生物试剂盒操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒标本要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液:用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒ELISA 实验步骤:1.包被抗原:稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液,多肽浓度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC过夜,洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭,0.1ml/孔,37oC1h,洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔,37oC 30分钟,洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔,37oC 40分钟,洗净。5.显色:TMB显色A液:四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液:5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液:2N硫酸A液、B液各一滴,比光显色10分钟,终止液一滴。6.450nm 波长测OD值
笃玛 鸡泛素结合酶E2C(UBE2C) ELISA 试剂盒 产品介绍样品准备1. 手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量 2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管3. (选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次4. 即刻用刀片切碎组织5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管6. 加入预冷的xx毫升 清理液(Reagent A)7. 涡旋震荡5秒,充分混匀8. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约40至80下)9. 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管10. 放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g11. 移取500微升到新的1.5毫升离心管12. 加入xx微升 稳定液(Reagent B),混匀13. 放在冰槽里待测(注意:须1周内使用)笃玛 鸡泛素结合酶E2C(UBE2C) ELISA 试剂盒 产品介绍笃玛生物试剂盒操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。笃玛 鸡泛素结合酶E2C(UBE2C) ELISA 试剂盒 产品介绍注意事项1. 本产品为20次操作,包括标准样品2. 本产品检测范围在0.1毫克/升(10微摩尔/升)至8.5毫克/升(250微摩尔/升)3. 操作时,须戴手套4. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全5. 系统操作过程中,标准样品测定只需1次6. 试剂出现沉淀可以离心去除后检测7. 测定值由低到高变化8. 用户可以使用664nm至670nm波长范围的任一波长进行检测9. 比色测定后,比色皿须清洗彻底10. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品量11. 样品中碘(iodine)大于2毫克/升、硫代硫酸盐(thiosulfate)或亚硫酸盐(sulfite)大于10毫克/升、氰亚铁酸盐等可能干扰检测12. 硫化氢浓度换算:1毫克/升=29.4微摩尔/升13. 本公司提供系列生化学检测试剂产品
羊抗人IgM血清相关热卖血清: 品牌:Serana 南美源胎牛血清(货号:S-FBS-SA-015)规格:500ML 品牌:BOVOGEN南美源胎牛血清(货号:SFBS)规格:500ML 品牌:BOVOGEN澳洲源胎牛血清(货号:SFBS)规格:500ML 品牌:Hyclone南美源胎牛血清(货号:SV30087.01)规格:100ML 品牌Hyclone南美源胎牛血清(货号:SV30087.02)规格:500ML 品牌:Hyclone澳洲源胎牛血清(货号:SH30084.03)规格:500ML 品牌:Hyclone美国源胎牛血清(货号:SH30070.03)规格:500ML 品牌:Hyclone美国源胎牛血清(货号:SH30070.03E)规格:500ML 品牌:Hyclone美国源胎牛血清(货号:SH30068.03)规格:500ML 品牌:Gibco南美源胎牛血清(货号:10270106)规格:500ML 品牌:Gibco巴西源胎牛血清(货号:12657029)规格:500ML 品牌:Gibco南美源胎牛血清(货号:C20270)规格:500ML 品牌:Gibco墨西哥源胎牛血清(货号:10437028)规格:500ML 品牌:Gibco美国源胎牛血清(货号:16000044)规格:500ML 品牌:Gibco澳洲源胎牛血清(货号:160099133)规格:100ML 品牌:Gibco澳洲源胎牛血清(货号:160099141)规格:500ML羊抗人IgM血清10270-106胎牛血清 血清的主要成分:血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。10270-106胎牛血清 其他血清产品推荐:Gibco 16000-044胎牛血清(澳洲)优级胎牛血清最受欢迎的FBS产品。高品质,高价值,适用于更娇贵的细胞培养和部分干细胞的培养。羊抗人IgM血清试剂及配制1、缓冲生理盐水:( 1) 贮存液: Na2HPO4.12H2O 2.85g KH2PO4 0.27g NaCl 17.00g 蒸馏水定容至 100ml 4℃保存备用( 2)应用液: 5ml 贮存液加 95ml 蒸馏水,再加 10%硫酸镁 0.1ml, 当日配制, 12 小时内使用。2、2%绵羊红细胞:无菌采取绵羊血液,于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以缓冲液洗 3次,并配成 2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。3、溶血素:将绵羊红细胞溶血素(效价 1:4000),用应用液做 1:2000 倍稀释(即 1ml 溶血素加 1999ml 应用液)。4、待测血清:新鲜血液室温放置 30min,再 4℃放置 60min,使血块收缩, 4℃离心( 3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。
鸡集落刺激因子(CSF) ELISA 试剂盒笃玛生物试剂盒操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。鸡集落刺激因子(CSF) ELISA 试剂盒操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。鸡集落刺激因子(CSF) ELISA 试剂盒酶联免疫试验步骤 将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 加样反应:加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。 显 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。 终 止:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,终止反应。 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。
笃玛 鸡神经特异性烯醇化酶(NSE) ELISA 试剂盒 产品介绍样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。笃玛 鸡神经特异性烯醇化酶(NSE) ELISA 试剂盒 产品介绍Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。 2 加样 可能原因: 1)血清或血浆标本分离不好即进行加样; 2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法: 1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时,请分批操作。 3 孵育 可能原因: 1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。解决办法: 1) 贴封片或加盖; 2) 按说明步骤严格控制操作时间。 4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法: 1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干; 2) 合理安排,或多用几台洗板机。 5 显色 可能原因: 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法: 1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流; 3) A、B液应避免接触金属器械。 6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时做好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。笃玛 鸡神经特异性烯醇化酶(NSE) ELISA 试剂盒 产品介绍如果您对我司产品感兴趣可通过以下方式咨询订购:1.来电向我司直接咨询及订购2.点击本页上方“QQ交谈"与我司在线客服联系3.发送咨询邮件至我司邮箱,索取相关产品说明书4.在本页下方留言,我司工作人员会在半个工作日内联系您!
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