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模型制作方法:SD大鼠,7日龄,体重12-16g,雌雄兼用。模型组动物麻醉,结扎左侧颈总动脉,缝合切口,放回原饲养环境中回复2小时,置动物于2000ml密闭容器中,通入含有8%氧气的混合气体,流量为3l/min。2小时后恢复正常供氧。制成左侧大脑半球缺氧动物模型。观测指标与分析:(1)脑组织病理学检查;(2)脑组织细胞凋亡检测;(3)闹组织缺氧诱导因子(HIF)-1amRNA表达水平检测;(4)脑组织半胱天冬酶表达水平的检测;(5)脑组织碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的检测;(6)脑神经干细胞的检测;(7)脑组织胶原纤维酸性蛋白检测;(8)脑组织c-fos基因表达水平;(9)学习、记忆功能检查;(10)脑组织单胺类神经递质含量测定;(11)脑组织MDA和SOD水平测定;(12)脑纹状体组织Par-4蛋白表达水平检测;(13)脑组织钙离子含量测定;(14)热休克蛋白70表达水平检测;(15)脑组织白介素-1β含量测定;(16)脑组织一氧化氮含量测定。实验热线:19931682702(同微信)

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肿瘤细胞皮下接种成瘤模型操作流程: 1. 挑选合适成瘤的细胞进行培养; 2. 按照一定的细胞量(1×106-107cells)注射裸鼠; 3. 饲养裸鼠至肉眼可见瘤体; 4. 测量瘤体大小(长径,短径,连续2-4周,2-3天一次); 5. 裸鼠拍照、摘取瘤体,进行后续处理。

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B16小鼠黑色素瘤人工肺移植模型【实验原理】 B16是C57BL/6小鼠耳根部皮肤上发现的自发性黑色素瘤,以后又在该瘤株中筛选出肺部高转移的集落株,小鼠静脉内移植后主要形成肺转移瘤,肺外转移极少。该瘤细胞注入静脉内,在短时间内直接把大量瘤细胞输入血液循环,不经过癌转移的前几个过程,故称为“人工转移”模型,以区别于“自发性转移”模型。该模型体现了肿瘤细胞进入血液循环后癌转移的几个步骤,对于研究肿瘤细胞在循环系统中的生成能力,瘤细胞附着、穿越靶器官血管的能力和探讨癌转移的器官特异性则有其独特的优势。【操作步骤】 取体外对数生长期的B16小鼠黑色素瘤细胞,经胰酶消化,以磷酸缓冲液配置成瘤细胞悬液,浓度为2.5*105/ml,,相应宿主尾静脉接种0.2ml/只。随机分组进行实验,3周后以颈椎脱臼法处死小鼠,称小鼠体重,剖取肺,称肺重,用解剖显微镜计数各肺叶的转移集落数,转移集落成黑色或灰黑色,相互间不融合。【结果计算】 计算给药组平均肺集落数与阴性对照组的平均肺集落数,计算肺转移抑制率。实验热线:19931682702(同微信)

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6-OHDA损毁MFB造成的大鼠PD模型有两个明显的弊端:一是神经元急性死亡。6-OHDA注入后15分钟即可检测到DA含量的下降,在第30-60分钟时更加明显,3-5天内绝大多数神经元死亡。二是损伤严重。经APO诱发旋转7圈/分以上者,黑质内多巴胺能神经元的死亡率已经超过90%。可见这种模型对于研究多巴胺能神经元慢性进行性病变的全过程不甚理想。但由此得到启发,人们发现机械损伤MFB同样可以造成黑质内的多巴胺能神经元变性坏死,并且这种变化呈现慢性、进行性过程。已经建立的造模方法有MFB轴突切断术(medial forebrain bundle axotomy)和中脑半切术(hemitransection of midbrain)。(一)大鼠MFB切断术:1.操作步骤Wistar大鼠,雌性,体重185-210g。常规注射水合氯醛麻醉后,置于Kopf立体定位仪上固定。切开皮肤,暴露颅骨前囟。选择部位在前囟后3.8mm,中线旁开2.4mm处打孔。将Kopf公司(Kopf Instruments,Tuyunga,CA,USA)生产的可伸缩电线刀(retractable wire knife)垂直伸入孔内达颅骨平面下8mm处,固定外套管,将电线刀的刀刃由外套管中推出2.0-3.0mm。上提电线刀约2.5mm,然后下放回原处。再重复一次,以保证MFB充分切断。然后回收刀刃,退出电线刀。缝合皮肤(Lapchak PA等,1993)。2.模型检测(1)旋转行为学检测:术后4周,将大鼠腹腔内注射AMPH(5mg/kg)诱发大鼠旋转。计数90分钟内的旋转次数。(2)其它检测:病理和生化检测与6-OHDA损毁模型同。(二)中脑半切术(hemitransection of midbrain)1.操作步骤SD大鼠,雌雄不拘,体重200-250g。常规方法麻醉,立体定位仪上固定和暴露颅骨前后囟。在前囟后1mm,中线旁开0.5mm处打孔。将以特制的4mm宽的刀,沿与颅骨成68度角的方向,斜插入9mm,然后将刀退出。缝合皮肤。(Toffano G等,1984)2.模型检测(3)旋转行为学检测:术后8周,皮下注射APO(0.25mg/kg),诱发大鼠向健侧旋转。(4)其它检测:病理和生化检测与6-OHDA损毁模型相似。

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脊髓损伤是一种致残率很高的疾 病, 给家庭、社会均带来沉重的负担。 随着工业、建筑业和交通 运输的飞速发展, 脊髓损伤患者数量呈逐年上升趋势。常用的造模方法有以下几种:1)脊髓撞击伤模型2)脊髓压迫伤模型3)脊髓横断损伤4)脊髓牵拉损伤模型5)脊髓缺血性损伤整体课题实验外包:19931682702(同微信)

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比格犬是最常用的实验用犬,已成为实验研究型中最标准的动物,在国外,它已被广泛用于生物化学、微生物学、病理学、病毒学、药理学以及肿瘤学(如癌的病因学和癌的治疗学等)等基础医学的研究工作中,而农药的各种安全性试验,特别是农药工业中的各种实验,使用该犬最多。性情温和,易于驯服和抓捕,亲人。遗传性能稳定,在研究工作中为了得到重复性好而稳定,Beagle 品种固定且优良,一般无遗传性神经疾患。反应的一致性,形态体质均一,由于它血液循环系统很发达,且器官功能也是一致的,表现在体温稳定,又比杂种犬体温低0.5C,因此在实验中反应一致性好,尤其在实验中对环境的适应力、抗病力较强。性成熟期早,约8~12个月,产仔数多。由于该犬性格温顺,容易调教,遗传性疾病少,实验重复性好,尤其适合药理、循环生理、眼科、毒理、外科学等的研究,被国际医学、生物学界公认为较理想的实验用犬。实验专线:19931682702(同微信)

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我实验室自有动物实验中心,可以对候选药物进行筛选,用来提高新药研发的成功率,减少研发费用,缩短新药的研发时间。细胞水平的药物筛选是种简单易行的检测药物在细胞中功能的方法。实验成本低、周期短、重复性好,可作为早期药物筛选的有效方法。建立的多种药物体外筛选模型,可为药物的药效提供有效的评价,作为早期药物筛选的有效方法。实验热线:19931682702(同微信)

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