动物:小鼠,SD大鼠(1)造模试剂:高脂饲料+STZ(链脲佐菌素)造模方法:小鼠喂食高脂饲料,4周后,禁食不禁水12h,腹腔注射1.1%的链脲佐菌素溶液110mg/kg 2-3次,正常对照组注射等体积生理盐水,2天后,禁食不禁水12h,尾部取血,测小鼠空腹血糖,选择高于11.1mmol/L的小鼠作为II型糖尿病小鼠模型。死亡率:0%,成功率:90%左右(2)造模试剂:STZ(链脲佐菌素)造模方法:将一定量的链脲霉素(STZ)溶于0.05 M柠檬酸缓冲溶液中(pH 4.5),配成特定浓度的溶液。将链脲霉素溶液腹腔内注射到SD大鼠中,STZ的注射剂量100mg/kg,分两次给药,连续两天注射,每次注射的STZ剂量为50mg/kg。注射后24 h,给大鼠提供5%的饮用糖水以避免其血糖过低(这一步酌情而定)。STZ注射约4天后,(在第5天开始检测老鼠血糖,连续检测两天)测量老鼠的血糖浓度(每只老鼠都要测血糖,通过尾静脉取血),第6,7天血糖上升到200mg/ml以上即认为形成高血糖(需要记录有具体值)。死亡率:0%,成功率:90%左右
动物:SD大鼠造模试剂:手术造模方法:大鼠采用3.5%水合氯醛(1ml/100g)腹腔注射麻醉,将大鼠固定于大鼠固定架上,剪掉右后肢鼠毛,碘伏消毒二次,铺孔巾,暴露右后肢,再消毒2次,于右侧后肢股后外侧处行纵行长约6-8mm切口,暴露股二头肌,经肌间钝性分离,游离出粗大的坐骨神经,距坐骨结节6mm处(定位),用小号持针器垂直钳夹坐骨神经,满扣2扣(定量),持续钳夹10秒,重复3次,每次间隔10秒(定时),钳夹操作由一人完成,分层缝合肌肉及皮肤,灌胃阿莫西林(100mg/100g)和腹腔注射庆大霉素(0.08万单位/100g)预防感染,连续3天。
动物类型:SD大鼠,Wistar大鼠造模试剂:尿酸钠造模方法:用6号注射针在受试大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌腱内侧,将0.2ml尿酸钠溶液(2.5g/100ml)注入到踝关节腔。死亡率:0%,造模成功率:100%
动物:大鼠造模试剂:阳离子牛血清白蛋白cationic bovine serum albumin,C-BSA造模方法:试剂准备:(1)将60mg的C-BSA用30ml的PBS充分溶解,制成2mg/ml的C-BSA溶液,再与等体积的弗氏不完全佐剂充分混匀为乳白色悬液,使乳化完全。(2)称取C-BSA 1625mg,与650mlPBS充分混匀,制成2.5mg/mlC-BSA溶液。(3)将C-BSA冷冻干燥后测等电点,使PI=10(4)造模前将大鼠放入代谢笼中,每笼一只,收取大鼠24h尿液,进行24h尿蛋白定量测定。先取1ml(1)中乳白色悬液,分别1次性注射于每只大鼠的双侧腋下、腹股沟处作多点皮下注射,观察1周,之后每只大鼠隔日尾静脉注射1ml(2)中2.5mg/mlC-BSA4mg,共3周。当造模大鼠出现大量蛋白尿,肾小球系膜细胞、系膜基质增加,肾小管上皮细胞明显水肿、部分小管腔内可见蛋白管型,并可见间质炎细胞浸润,判断造模成功
动物:SD大鼠造模试剂:手术造模方法:造模前禁食不禁水24h称重,以10%水合氯醛腹腔注射麻醉。麻醉大鼠仰卧固定于手术台上,常规备皮消毒后,颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,分离出颈内动脉、颈外动脉、结扎游离颈外动脉主干,分离颈内动脉主干至翼腭动脉,并在其起始部置一动脉夹。颈外动脉残端剪0.2mm小口,将栓线插入。轻推尼龙线尾端经颈总动脉分叉部沿颈内动脉入颅,至大脑中动脉。尼龙线插入深度由颈总动脉交叉部计18mm,缝合切口,栓塞30min后勿须再次麻醉,室温下禁食不禁水12h。在手术结束麻醉清醒后,观察神经症状,只有神经功能障碍在一级以上的大鼠才能保留下来。模型构建24h后TTC染色确定模型是否构建成功。
我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、完善的服务平台,为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前,协助发表的SCI及核心期刊上的学术文章达两千余篇,涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。更为可喜的是,公司于2015年投资建立了1800平方米的动物中心,能够为广大客户提供更为专业的实验动物饲养及造模服务。实验外包:1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建9.SCI文章:SCI文章评估建议、SCI文章设计咨询、SCI文章统计资料处理、SCI文章实验操作咨询、SCI文章编修翻译等