一、应用
用于检测未过滤啤酒中啤酒有害菌,或作为增菌培养基。
NBB-浓缩物(NBB-C)系一种即开即用、便于操作的液体培养基,用于酿酒业快速、安全检测啤酒变质微生物。NBB-培养基具有的选择性使无害伴随菌群及酵母的生长受到抑制,而啤酒有害菌会由一种特殊生长物质来维护。NBB- C可用于对浑浊啤酒试样,如嫩啤酒及未过滤啤酒进行微生物检测,用于酵母试样,及作为增菌培养基,进行进一步的分析。在成品保值期试验中,还可用作添加剂。
二、操作
所需材料
微生物工作台;
无菌卡箍式瓶(180毫升);
无菌试管带有可旋瓶盖或透气塞
锥形烧瓶或振荡器,用于核查酵母试样
实施
在无菌条件下,操作标本以避免二次污染。
核查浑浊啤酒试样时,使用无菌卡箍式瓶。原则上NBB-C只能和啤酒一起使用,否则它会丧失其特殊的啤酒选择性。
在用180毫升无菌卡箍式瓶收集的浑浊试样中,加入5%的NBB-C(约170毫升),若有必要,用无菌水将瓶子灌满至瓶口。该试验显示啤酒最高特定选择性,通过用无菌水稀释啤酒,培养基的选择性可单独体现(图一)。
必然啤酒有害菌 | 必然啤酒有害菌 潜在啤酒有害菌 | 必然啤酒有害菌 潜在啤酒有害菌 间接啤酒有害菌 | 必然啤酒有害菌 潜在啤酒有害菌 间接啤酒有害菌 指标菌 |
pH值:4.5~4.8 | pH值:<5.0 | pH值:>5.0 | pH值:>5.0 |
图一:依据危害程度对啤酒有害菌进行选择性检测
将所有瓶子灌注至瓶口,但用于检测指标菌的试样除外。
选择的酵母抑制剂在初始期进行作用,足够的时间让酵母开始发酵,然后得到抑制。为了避免过压,发酵停止后应旋转瓶塞以盖紧。
成品啤酒保值期的检测,添加3~7% NBB-C 作为啤酒的添加剂,使用无菌卡箍式瓶并灌注至瓶口。
至于酵母试样,用锥形烧瓶,将10毫升的酵母混于90毫升的无菌啤酒和5毫升的NBB-C,将其置于振动器上(图二),缓慢震动。
5毫升NBB-C 90毫升无菌啤酒 10毫升酵母 | |
振荡器 |
图2:检测酵母样品中的啤酒有害菌
培养
作为增菌培养基,在无菌卡箍式瓶(180毫升)中培养试样至少7天,最多12天,温度为27°C/81°F。
按通常方式进行成品保值期试验检测;
培养酵母试样5天,温度为27°C/81°F。
不必进行厌氧培养,因为瓶中啤酒量大,试样中酵母发酵有可能产生二氧化碳。
前增菌培养两天,以便进一步使用NBB-A;NBB- B或分子生物法(VIR、PCR)。
评价
反应快速取决于多种因素(起始染菌数,染菌种类,微生物在啤酒中的适应程度,微生物所处的生理状态及所染菌的来源),在较严重染菌的情况下一天的培养时间就足够,而在痕量污染或是污染了某些生长非常缓慢的微生物(如林特奈乳酸杆菌)时则通常需要基天的培养时间;培养期间,观察生长模型,以便获得待检测样品的准确报告, 培养7天后,进行评价以便最终比较结果。如果试样明显增加,可以对结果进行显微镜分析。由于试样中NBB-C比例小,且没有指标,颜色不会变化(由红变为黄),如其他NBB-产品。
对于最终结果,有必要对试样进行显微镜检。只有当每个视野中出现多个或无数可疑细菌时才能将这样明确的镜检结果判断为阳性,散在出现的杆菌或是球菌(例如:在600倍放大时每10个显微视野中出现1个细胞)通常是死或无害的潜在菌。在有疑问的情况下可以用NBB-B对样品进行二次增菌培养。
三、储藏与包装信息
包装与内容
单位 纸箱(9瓶×250毫升)
单位尺寸(箱) 约22公分×22公分×18公分,或8.7英寸×8.7英寸×7.1英寸
单位毛重(箱) 约4.1公斤或9磅
储藏
储藏温度:4~8°C/40~45°F,依据产品规范。
存放于干燥、阴凉处。
废物处理
无危险物品。
无危害材料。
请遵循当地废物管理规定。
警示
请勿对培养基加热或冷冻,加热可能抑制其功能性。
操作热培养基时,一定佩戴保护装备。
不可将发酵试样瓶盖死,否则有可能发生爆炸。
相关产品信息:
产品名称 | 产品编号 | 包装规格 | 备注 |
NBB-Agar (NBB-A) | 2.04709.782 | 9 x 250 ml | Filtered beer, rinsing water, ambient & compressed air, CO2 |
NBB-Broth (NBB-B) | 2.04710.782 | 9 x 250 ml | Beer yeast, industrial hygiene (focus lactic acid bacteria) |
NBB-Broth Enrichment Medium (NBB-B-AM) | 2.04706.782 | 9 x 250 ml | Industrial hygiene check (focus indicator germs) |
NBB-Concentrate (NBB-C) | 2.04711.782 | 9 x 250 ml | Unfi ltered beer samples mainly, and also other beer samples |
NBB-Powder (NBB-P) | 2.04716.462 | 300 g/alubag | See NBB-Agar and -Broth |
NBB-B-Tubes | 2.04723.646 | Box (20 p.) | See NBB-Broth |
VLB S7S Agar (VLB) | 2.04785.244 | 9 x 250 ml | Filtered beer, rinsing water, ambient & compressed air, CO2 |
VLB S7S Broth (VLB) | 2.04786.782 | 9 x 250 ml | Beer yeast, industrial hygiene (focus lactic acid bacteria) |
Wort Agar (VLB) | 2.04787.244 | 9 x 250 ml | Filtered beer |
Lysine Agar (VLB) | 2.04789.244 | 4 x 250 ml | Unfi ltered beer, beer yeast |
Copper sulphate Agar (VLB) | 2.04790.244 | 4 x 250 ml | Unfi ltered beer, beer yeast |
Standard Agar (VLB) | 2.04792.244 | 4 x 250 ml | Filtered beer, water
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Sterile swabs | 2.04725.244 | 100 p./bag |
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