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  • 北京百奥赛图基因生物技术有限公司
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    人免疫系统重建模型及药效评价

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      北京百奥赛图基因生物技术有限公司
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      CRO服务
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    利用人外周血单个核细胞(hPBMC)获得人免疫系统重建的B-NDG®小鼠


    很多灵长类特异性病毒,如人HBV, HIV等由于其宿主特异性,无法在在小鼠上进行临床前药效评价,严重阻碍了其药物开发进程。此外,细胞免疫治疗正成为肿瘤治疗的一大趋势,但具备人免疫系统的动物模型的缺乏一直是细胞免疫治疗药效评价的一大阻碍。

    百奥赛图自主开发的B-NDG®小鼠,是目前公认的免疫缺陷程度高、适合人源细胞或组织移植的工具小鼠。利用B-NDG®小鼠可以通过移植人外周血细胞、人造血干细胞,实现在小鼠体内重塑免疫系统,为人免疫系统及相关灵长类特异型病毒的研究和细胞免疫治疗的临床前评估提供了有力工具。


    利用人外周血单个核细胞(hPBMC)获得人免疫系统重建的B-NDG®小鼠


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    图1. 人外周血单个核细胞(hPBMC, human peripheral blood mononuclear cells) 在B-NDG®小鼠的成功接种。通过尾静脉注射5x106人外周血单个核细胞(hPBMC)进B-NDG®小鼠,24天后取血流式检测hCD45+和mCD45+的比例。

    结果表明:人外周血细胞(hPBMC)在3只B-NDG®小鼠都得到了较好的重建,且进一步分析表明,外周血细胞重建以T细胞为主。


    利用人造血干细胞(CD34+)获得人免疫系统重建的B-NDG®小鼠


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    图2. 利用人造血干细胞(CD34+)在B-NDG小鼠体内重建免疫系统。 B-NDG小鼠经辐照后,尾静脉注射CD34+细胞,检测小鼠存活率与体重变化(n=5)。

    结果表明:重建的CD34+细胞有效延长了辐照后B-NDG小鼠的生存时间。

      

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    图3.B-NDG小鼠经过辐照,尾静脉接种2x105 CD34+细胞,流式分析统计,CD34+细胞重建B-NDG小鼠免疫系统后,人源细胞随时间变化曲线。

    结果表明,人免疫细胞在B-NDG小鼠上得到了成功重建。


     

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    图4. 流式分析统计, CD34+细胞重建B-NDG小鼠免疫系统后,人源细胞随时间的分化趋势。

    结果表明:CD34+细胞移植10周后,小鼠体内人源B细胞、T细胞和NK细胞都成功重建,而对照组(未注射CD34+细胞)的小鼠无人源细胞(结果未展示)。


    基于B-NDG®人源化小鼠的PD-1抗体药效实验


    B-NDG®小鼠是百奥赛图公司开发具有高度免疫缺陷背景的小鼠,在B-NDG®小鼠上移植人的肿瘤细胞,再利用人的抗体药物进行验证,不仅可以达到验证人的抗体药物药效的作用,而且由于其使用的是人源细胞系,且免疫系统环境高度人源化,实验结果具有更高的可靠性和参考价值。

    利用B-NDG®小鼠进行移植人恶性胶质瘤U-87MG细胞系,并进行PD-1抗体药效对比试验,结果表明B-NDG®鼠给药后15d 抑瘤率为52.55%(p<0.05),明显优于NOD-scid小鼠模型。

    B-NDG®小鼠模型在肿瘤免疫相关的体内药效模型中优于NOD-scid小鼠。


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    图5. PD-1 抗体在B-NDG®小鼠中对人恶性胶质瘤U-87 MG小鼠皮下移植瘤的疗效。将U-87细胞接种于B-NDG®小鼠右肋部皮下,两周后肿瘤体积约30mm3时将动物入组至对照组和治疗组(n=6)。然后将经CD3抗体刺激的志愿者hPBMCs注射到肿瘤组织中,同时开始腹腔给与各抗体,一周三次,给药两周,给药后15d 抑瘤率为52.55%(p<0.05 ),肿瘤抑制效果明显。


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    图6. PD-1 抗体在NOD-scid小鼠中对人恶性胶质瘤U-87 MG小鼠皮下移植瘤的疗效。将U-87细胞接种于NOD-scid小鼠右肋部皮下,两周后肿瘤体积约40mm3时将动物入组至对照组和治疗组(n=7)。然后将经CD3抗体刺激的志愿者PBMCs注射到肿瘤组织中,同时开始腹腔给与各抗体,一周三次,给药共两周,PD-1 抗体给药后没有表现出肿瘤抑制效果。





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