血液基因组DNA提取试剂盒

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发布时间：

2016-07-29 09:13:52
供应商：

南京生兴生物技术有限公司
供应分类：

实验用品

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产品说明：

生兴生物血液基因组DNA提取试剂盒（SunShineclean^TM Blood Genomic DNA Isolation kit）采用特异性结合DNA的疏水膜离心吸附柱和独特的缓冲液系统，彻底去除血细胞蛋白和大部分RNA等各种干扰物，从全血中提取高纯度的DNA，可从多种不同类型的血液中快速提取基因组DNA (15-20 min)，适用于从0.1-0.5 ml 血液中提取基因组总DNA。疏水膜离心吸附柱可高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA可以用于下游酶切、PCR及qPCR等实验。

产品特色：

※ 快速：10～25 min内可获得高纯度的基因组DNA

※ 操作简便：具备独特的缓冲液系统，不需要蛋白酶K消化样品

※ 纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游酶切、PCR及qPCR等实验

试剂盒组成：

成份数量/规格（50T）数量/规格（100T）SunShinecleanTM Mini Column 50个100个2ml Collection Tube50个100个Buffer KBL1 (Lysis solution) 50 ml100 mlBuffer KB (Column balance solution)30 ml 60 mlBuffer KW (Wash solution)20 ml (使用前加入50 ml无水乙醇)40 ml (使用前加入100 ml无水乙醇)Buffer KE (Elution solution)5 ml 10 ml

储存条件：

该试剂盒应保存于室温（15℃～25℃）干燥条件，可保证在购买之日起至少一年内有效。
常温运输。

需要的材料及配套设备：

无水乙醇，1.5 ml、2 ml 离心管，所需规格的移液器和无菌移液枪头，离心机（离心力>10,000 rpm）。

操作步骤及流程(以50 T为例)：

1. 取一SunShineclean^TM Mini Column 柱裝在一个2 ml 收集试管上(已备)。加入500 μl Buffer KB平衡液至柱子內，室温下13,000 rpm 离心1 min，使平衡液完全流过柱子。弃去收集管中的平衡液（保留空的收集管，继续往下使用）。

         特别注意：柱子不平衡，将导致DNA产率和纯度降低。
     2. 按200 μl全血（适合各种抗凝剂，EDTA较好）加入1000 μl KBL1 的比例加入裂解缓冲液，混匀，静置3 min。
         特别注意：时间超过3 min 也不影响DNA抽提。人血以100-300 μl，小鼠以50-100 μl为最佳，当全血体积小于200 μl时，KBL1体积按比例缩小，但KBL1的体积不能小于700 μl（如50 μl血液加入700 μl KBL1）。如果样品是无细胞的血清等，应按比例增加体积。
    3. 将混合液转移至已平衡的吸附柱內，室温下13,000 rpm 离心30 s，使裂解液完全流过柱子。保留柱，弃去收集管中的过滤液，将柱重新放入收集管。
       特别注意：如混合液体积过大，可以分成数次上柱，每次上样量不要超过700 μl。
    4. 把柱装入2 ml 收集管中，加入700 μl Buffer KW，室温下13,000 rpm 离心30 s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。
      特别注意： Buffer KW在首次使用之前必须加入50 ml 无水乙醇，并置于室温下保存。
    5.（可选）重复用700 μl 70%乙醇（室温）洗涤柱子。室温下12,000 rpm离心1min。
    6. 弃收集管中的滤液，将空柱子套回2 ml收集管内收集管。室温下，最高转速或13,000 rpm离心2 min以甩干柱子基质残余的液体。
      特别注意：此步骤不可省，否则将导致DNA中残留乙醇，影响后续反应。
     7. 把柱子装在一个干净的1.5 ml 离心管上，加入30～50 μl Buffer KE (或者用灭菌的TE 10 mM tris-HCl（pH 8.0）或纯水代替，纯水可能影响DNA洗脱效率)，65℃放置5-10min, 13,000 rpm离心1 min以洗脱DNA。
      特别注意：小心加KE到柱中吸附膜的中间部位，并确保液体将膜全部覆盖。
     8. DNA可保存于4℃，若长时间保存，可冻存于-20℃。

注意事项：

可以采用任何抗凝的全血，如果用血块，注意分散。