鸡趋化因子C-C-基元配体14(CCL14) ELISA 试剂盒操作说明
一、实验原理
本试剂盒采用间接酶联免疫吸附法(ELISA),利用鸡趋化因子C-C-基元配体14(CCL14)特异性抗体包被酶标板,加入标准品和待测样本,经过孵育、洗涤、加入酶标二抗,再经过孵育、洗涤、加入底物,最后通过酶标仪测量各孔的光密度值,计算样品中CCL14的浓度。
二、操作步骤
1. 包被:将特异性抗体包被酶标板,加入标准品和待测样本,封板,置于37℃孵育1小时。
2. 洗涤:用洗涤液充分洗涤酶标板,去除未结合的抗体和杂质。
3. 加入酶标二抗:加入酶标二抗,封板,置于37℃孵育1小时。
4. 洗涤:用洗涤液充分洗涤酶标板,去除未结合的酶标二抗和杂质。
5. 加入底物:加入底物溶液,封板,置于37℃孵育15-30分钟。
6. 终止反应:加入终止液,停止反应。
7. 检测:用酶标仪测量各孔的光密度值,记录数据。
三、注意事项
1. 试剂盒应存放于2-8℃,避免反复冻融。
2. 实验操作过程中应保持清洁卫生,避免交叉污染。
3. 包被抗体时应使用适量的包被缓冲液稀释抗体,以保持最佳的抗体浓度。
4. 加入酶标二抗时应使用适量的酶标二抗缓冲液稀释酶标二抗,以保持最佳的酶标二抗浓度。
5. 加入底物时应使用适量的底物缓冲液稀释底物,以保持最佳的底物浓度。
6. 终止反应时应使用适量的终止液停止反应,以保持最佳的终止效果。
7. 检测时应使用酶标仪测量各孔的光密度值,并记录数据。