PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。 [1]
原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。
固定液
Carnoy固定液: 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml,也可以选用75%酒精。
液配制
1) 过碘酸酒清夜配法:
过碘酸(HIO4·2H2O) 0.4g 95%酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml。
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周。
2)Schiff氏液:
0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解。冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸,冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。
3) Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯酒精 23ml
4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。
5)哈瑞或迈耶苏木精
染色步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗);
2. 蒸馏水洗;
3. 过碘酸酒清夜10min;
4. 自来水冲洗10min;
5. Schiff氏液10min;
6. 流水冲洗5min;
7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化);
8. 流水冲洗5min;
9. 常规脱水、透明、封固。
结果
PAS阳性为红色,细胞核蓝色。