masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。
Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。
试剂:
Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液: 丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液: 冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤
1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
3. 依次自来水和蒸馏水洗。
4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5. 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6. 蒸馏水洗。
7. 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。
体会与说明:
1.控制好染色步骤。
2.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3.0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。
4.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。