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百泰派克生物结合MALDI-TOF质谱系统与LC-MS/MS质谱系统,提供专业准确的蛋白胶点、胶条、IP样品,CO-IP样品蛋白鉴定服务。可鉴定的样品包括:1D-SDS PAGE分离的蛋白胶条,2DE PAGE中的蛋白胶点,蛋白表达产物,免疫共沉淀(Co-IP)样品。其中,蛋白质样品的鉴定前处理过程严格按照Nature Methods发表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis进行,保证鉴定试验中得到更高的肽段覆盖率。质谱鉴定的原理则是基于鸟枪法(Shot-gun):将蛋白条带或者蛋白溶液酶切成肽段混合物,经高效液相色谱分离得到若干较为简单的组分,进入高分辨率质谱仪中进行分析。检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对,结合匹配度打分及错配过滤,可得到肽段的确切序列,进而拼接出各蛋白的完整序列,从而实现对蛋白的鉴定。蛋白质质谱鉴定流程基于鸟枪法(shot-gun)LC-MS的蛋白鉴定流程关于样品1D SDS PAGE /2D PAGE gels样品:1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain样品均可进行蛋白的鉴定试验;2. 银染的样品有可能与后续的质谱分析不兼容,我们推荐您使用下面的产品或者实验步骤进行银染实验:ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)3. 银染的样品请不要进行脱色处理液体样品(In solution format):1. 假如样品中蛋白量>10ug,我们对样品的缓冲体系没有要求;2. 假如样品中蛋白量<10ug,样品准备过程中尽量减少SDS等表面活性剂的使用,并注意降低盐浓度;3. 提交样品过程中,注意提供样品的缓冲体系和样品中蛋白的预估含量;Co-IP样品:1. 如果您洗脱的样品需要跑胶,请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可;2. 如果您直接提交洗脱样品,我们推荐使用HPH EB (0.5 M NH4OH, 0.5 mM EDTA) 缓冲体系进行蛋白洗脱,保证洗脱缓冲体系与后续的质谱实验兼容;样品运输:1. 我们推荐您将样品冻干后进行运输,冻干样品中蛋白非常稳定。2. 液体样品推荐干冰运输,短途运输冰袋也可以。注意事项: 利用质谱进行蛋白样品的鉴定,在样品准备过程中需佩戴手套和头套,尽量避免自身角蛋白(keratin)对样品的污染。研究案例该项目是中国科学院生物物理所一位老师将她的Co-IP的样品寄给我们进行蛋白鉴定。得到的部分结果如下图所示:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白鉴定研究案例从图中可以看出,我们提供的结果报告中包含鉴定到的蛋白的Accession Number, Peptide coverage, 鉴定出的肽段信息,鉴定出的肽段的修饰信息以及对鉴定到的蛋白的详细描述。中/英文项目报告:在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:1. 实验步骤(中英文)2. 相关的质谱参数(中英文)3. 质谱图片4. 原始数据5. 鉴定的蛋白质详细信息蛋白胶点、胶条、IP样品质谱鉴定一站式服务您只需下单-寄送样品百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告相关服务蛋白质质谱鉴定Shotgun鸟枪法蛋白质鉴定1D SDS-PAGE和IEF服务二维凝胶电泳服务CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack TechnologyCompany Ltd.简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物制品表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。1、公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测测分析服务:2、获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量量研究服务3、业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;4、七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;5、服务3000+企业,1000+客户的选择! 查看详情
武汉戴安生物技术有限公司成立于2015年,位于武汉光谷生物城生物技术研究院,是一家由资深免疫学专家和海外留学人员创建的高科技生物技术企业。公司专注于诊断试剂及其核心原料的研发生产及技术服务工作。公司拥有完善的蛋白质表达体系,抗体制备体系,诊断试剂研发体系,研发人员拥有十余年从业经验,技术积累深厚,设备精良完善,在重组蛋白质表达纯化、天然蛋白质提取、抗体研发和生产方面达到行业顶尖水平,已建立了从诊断试剂抗原抗体原料开发,到诊断试剂制备的研发生产路线,拥有诊断用抗原抗体的研发及放大生产技术平台,生化试剂大包装研发生产平台,核心产品包括SAA,AFP,PCT,铁蛋白等项目的抗体、校准品和生化试剂。公司也为客户提供专业的抗体定制及相关技术服务,包括科研用多克隆抗体和单克隆抗体定制,药物阻断用抗体筛选,中和抗体制备等技术服务。 抗体定制项目周期约3-4个月,具体价格请咨询客服,产品信息及服务说明请登录官网查找:http://www.dia-an.cn多克隆抗体能够识别多个抗原表位,同时具有制备周期短、成本低、应用广泛等优点已成为科研人员进行 免疫学研究不可或缺的重要工具。戴安生物凭借多年抗体研发和生产经验,可以提供兔、大鼠、小鼠、豚鼠、 羊等多个宿主在内的多抗制备。已成功定制过以下多种属蛋白质抗体:斑马鱼、鲫鱼、草鱼、线虫、病毒、拟 南芥、蓝藻、棉花、玉米、水稻、马铃薯、油菜等,实战经验丰富,充分保证抗体定制的成功率。服务特色(1)免费分析抗原序列,利用专业的抗原设计软件设计抗原,结合文献,综合选择免疫原序列;(2)提供优质重组蛋白质抗原,用于免疫的抗原保证可溶性上清表达(公司上清表达成功率>90%),纯度>80%,浓度>1mg/ml;(3)利用自主研发佐剂,保证抗原和佐剂充分混匀,多点皮下注射,最大程度上提高免疫原效价(4)构建第二套载体表达蛋白,用于纯化血清,减少标签蛋白对抗体特异性的影响,纯化出高特异性抗体。 定制路线我们承诺(1)客户进行Western Blot内源性或者IP过表达检测小样后能够检测到目的条带(说明抗体验证合格);(2)Western Blot内源性或者IP过表达检测阴性无法满足实验需要,等于此抗体订单验证失败,则甲方无需再付此项目剩余尾款;(3)间接ELISA检测抗血清效价,针对免疫原效价不低于1:160,000;(4)客户有权随时了解服务项目进展情况,并对成果拥有全部所有权。 交付结果(1)纯化的免疫原小样一份(100ug左右);(2)10ml抗血清的亲和纯化抗体5-10mg ;(3)200 μL兔免疫前阴性血清(有需要请备注);(4)质粒小样一份;(5) 兔抗血清90ml(其他宿主另计);(6)项目服务报告 。 查看详情
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