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【评价原理】苯肼导致红细胞外翻和氧化应激产生,红细胞外翻能够引起血细胞聚集,氧化应激产生导致内皮细胞损伤,进而导致血小板聚集、纤维蛋白原形成,最终诱导血栓发生。斑马鱼的造血遗传网络在进化上和人类高度保守,适合于血栓形成机制和治疗药物的评价。躯干出现血栓后,回心血量便会减少。经过血红细胞特异性染色(呈红色),患有血栓的斑马鱼心脏红细胞比正常斑马鱼心脏红细胞明显减少,由于斑马鱼血液系统发育过程透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用血管疏通剂组。其中正常对照组未摄入苯肼,模型对照组与服用血管疏通剂组都摄入了等量的苯肼(苯肼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用血管疏通剂组在加入苯肼的同时摄入阿司匹林、氯吡格雷之类的血管疏通剂。服用一段时间血管疏通剂后,我们对斑马鱼整体做血红细胞特异性染色,观察心脏红细胞变化。【结果展示】图1. 斑马鱼血栓表型图黄色虚线区域为心脏,心脏内红色为红细胞可以看到,服用血管疏通剂组的肝脏情况与未摄入苯肼的正常对照组比较相似,没有明显的红细胞减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用血管疏通剂组的心脏红细胞数量与未摄入苯肼的正常对照组相似,并未出现模型对照组的心脏红细胞数量减少的情况。2.本实验证实了阿司匹林、氯吡格雷和养血清脑颗粒具有显著的疏通血管(抗血栓)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号) 查看详情
【评价原理】静脉注射给予长春瑞滨造模斑马鱼免疫力低下模型。大剂量长春瑞滨骨髓抑制明显,导致血小板、红细胞及白细胞数目(中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞等)减少和贫血,最终导致免疫力低下人类与斑马鱼在免疫系统的细胞组成上极为相似,而且斑马鱼是目前所有同时具有特异性免疫和非特异性免疫动物个体中体积最小的,适合高通量评价调节免疫功效。斑马鱼静脉注射大剂量长春瑞滨后可造成免疫低下。采用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,可在荧光显微镜在观察到免疫力低下的斑马鱼体内的中性粒细胞荧光强度明显减弱。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用免疫调节剂组。其中正常对照组未注射长春瑞滨,模型对照组与服用免疫调节剂组都注射了等量的长春瑞滨(长春瑞滨通过静脉注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用免疫调节剂组在注射长春瑞滨后摄入盐酸小檗胺等免疫调节剂。服用一段时间免疫调节剂后,我们观察中性粒细胞荧光强度变化。【结果展示】图1. 斑马鱼中性粒细胞表型图绿色荧光颗粒代表中性粒细胞可以看到,免疫调节剂组中性粒细胞荧光强度与正常对照组相似,没有出现中性粒细胞荧光强度明显减弱的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,免疫调节剂组中性粒细胞数量与正常对照组相似,并未出现模型对照组免疫力低下的情况。2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号) 查看详情
【评价原理】静脉注射给予长春瑞滨造模斑马鱼免疫力低下模型。大剂量长春瑞滨骨髓抑制明显,导致血小板、红细胞及白细胞数目(中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞等)减少和贫血,最终导致免疫力低下。人类与斑马鱼在免疫系统的细胞组成上极为相似,而且斑马鱼是目前所有同时具有特异性免疫和非特异性免疫动物个体中体积最小的,适合高通量评价调节免疫功效。斑马鱼静脉注射大剂量长春瑞滨后可造成免疫低下。采用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,可在荧光显微镜在观察到免疫力低下的斑马鱼体内的巨噬细胞荧光强度明显减弱。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用免疫调节剂组。其中正常对照组未注射长春瑞滨,模型对照组与服用免疫调节剂组都注射了等量的长春瑞滨(长春瑞滨通过静脉注射的方式摄入到斑马鱼体内)。服用免疫调节剂组在注射长春瑞滨后摄入盐酸小檗胺等免疫调节剂。服用一段时间免疫调节剂后,我们观察巨噬细胞荧光强度变化。【结果展示】图1. 斑马鱼巨噬细胞表型图绿色荧光颗粒代表巨噬细胞可以看到,免疫调节剂组巨噬细胞荧光强度与正常对照组相似,没有出现巨噬细胞荧光强度明显减弱的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,免疫调节剂组巨噬细胞数量与正常对照组相似,并未出现模型对照组免疫力低下的情况。2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号) 查看详情
哺乳动物细胞表达系统是复杂糖基化蛋白的表达系统,哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰功能,其表达的重组蛋白在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子,更有可能获得与天然分子相同的生物活性。义翘神州的哺乳动物瞬时表达系统以HEK293细胞和CHO细胞为表达宿主,可提供灵活的服务以满足不同的定制需求,包括标签去除、内毒素去除、SEC-HPLC检测、糖基化分析等。专有的高密度细胞培养技术,结合自主产权的转染试剂和培养基配方,以及高效表达载体,实现降本增效,提高表达成功率,帮助客户节省成本。哺乳动物细胞蛋白表达服务内容 1、基因合成及密码子优化(可选) 周期:1-2 周客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。  2、载体构建 周期:1-2 周克隆至义翘优化的高效表达载体质粒测序质粒制备 交付内容测序报告 (若客户要求) 3、蛋白表达及纯化  周期:2-3 周瞬时转染HEK293/CHO细胞蛋白纯化QC分析 (SDS-PAGE, UV等) 交付内容0.1-0.5mg纯化蛋白样品 (如蛋白表达可行)质量检验报告 (CoA)4、大量表达及纯化(可选)周期:3-4 周100mg或更多蛋白QC检测交付内容纯化蛋白质量检验报告 (CoA)哺乳动物蛋白表达服务流程:①双方沟通确定蛋白表达要求 ②签订技术服务合同并收取预付款 ③进行蛋白表达可行性实验 ④反馈蛋白表达可行性实验结果 / 寄送样品 (如有)⑤根据可行性实验结果进行蛋白表达大量生产报价⑥根据客户要求进行蛋白的大量生产 更多详情可以关注:https://cn.sinobiological.com/services/transient-protein-expression-service义翘神州:蛋白与抗体的专业引-领者,欢迎通过百-度搜索“义翘神州”与我们取得联系。 查看详情
无细胞蛋白合成系统(Cell-Free Protein Synthesis system,CFPS)是以外源DNA或mRNA为模板,通过在细胞抽提物的酶系中添加氨基酸、能量物质等实现蛋白的体外合成。将原本需要几天完成的表达过程缩短至几小时,整体过程更加快速、高效。义翘神州自主研发的无细胞表达系统,经过充分验证,可为您提供优质的VHH及scFv快速表达服务,加速您的研发进程。无细胞蛋白合成服务优势:①快速、高效3h即可完成表达②高成功率> 99%③一致性具有与哺乳动物细胞表达一致活性④高难度抗体表达可实现细胞中表达困难抗体的成功表达无细胞合成服务内容:①基因合成和密码子优化 (可选)    周期:2-6天客户提供目的抗体的序列信息或质粒。②载体构建及质粒制备(可选)周期:2天载体构建质粒测序质粒制备③合成及纯化可行性实验  周期:1-2天无细胞蛋白合成及纯化QC检测SDS-PAGEUVSEC-HPLC分析(可选)④交付内容如表达可行,提供 0.2-1.5 mg样品质量检验报告 (CoA)更多无细胞蛋白合成服务详情可关注:https://cn.sinobiological.com/services/cell-free-protein-synthesis-service 查看详情
将动物机体的各种组织从机体中取出,采用酶消化、机械法等途径使其分散成单细胞,并置于合适的培养基中培养。细胞得以存活、生长、繁殖。原代细胞相比较细胞系更能反应机体原有的特性,用于科学研究时更具有针对性和说服力。原代动物细胞分离培养包括上皮来源(表皮、乳腺上皮、子宫颈上皮、肝、胃上皮、胰腺、肾小管上皮、气管及支气管上皮、前列腺、口腔上皮、内皮等)细胞分离培养。结缔组织来源(成纤维、巨噬、脂肪组织、软骨、骨、破骨、血液等)细胞分离培养。神经组织来源及肌肉组织来源(骨骼肌、肌肉)细胞分离培养。实验热线:19931682702(同微信) 查看详情
研究某个基因的功能最常用的手段是在宿主细胞中过量表达或者通过RNA干扰的方法knock-down该基因,常规手段有瞬时转染和筛选稳定细胞系。筛选出该基因的过表达或者RNA干扰的稳定细胞系会给您的实验带来极大的便利。有了稳定细胞系,后期的Co-IP或者Pull-Down实验会非常便利;稳定表达重组荧光蛋白的细胞系可以让您动态的观察分子在细胞中的运动。 构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。筛选稳定细胞系的方法1)转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系2)慢病毒感染筛选稳定细胞系慢病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。实验专线:19931682702 查看详情
细胞划痕愈合法是测定细胞迁移运动与愈合能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长(修复)至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移及修复能力。特点: 1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。4. 研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。传统实验方法 实验步骤: 1. 培养板接种细胞之前先用marker笔在12孔板背面画横线标记(方便拍照时定位同一 个视野)。2. 细胞消化后接入12孔板,数量以贴壁后铺满板底为宜(数量少时可培养一段时间至铺满板底)。3. 细胞铺满板底后,用1 ml枪头垂直于孔板制造细胞划痕,尽量保证各个划痕宽度一致。(人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性,影响实验结果,这也是该方法最大的缺陷。)4. 吸去细胞培养液,用PBS冲洗孔板三次,洗去划痕产生的细胞碎片。 5. 加入无血清培养基,拍照记录。6. 将培养板放入培养箱培养,每隔4-6小时取出拍照。7. 根据收集图片数据分析实验结果。 查看详情
产品介绍: 我们提供多种动物疾病模型:代谢系统疾病(糖尿病、高血压、高血脂、肝肾疾病模型)神经退行性疾病(脑卒中、脊髓损伤、阿尔兹海默症、帕金森)呼吸系统疾病(COPD、 支气管扩张、气喘、肺化脓)运动系统疾病(骨折、骨缺损、骨关节炎等)皮肤修复(烧伤、烫伤等多种皮肤损伤)肿瘤疾病(PDX、CDX)。我们提供的服务:在临床前研究方案中,设计和提出与适应证相关的疾病动物模型,用于探索干细胞在人体内可能的治疗效果、作用机制、不良反应、适宜的输入或植入途径等临床研究所需的信息。在合适的动物模型基础上,研究和建立干细胞有效标记技术和在体干细胞示踪技术,提供干细胞的在体存活、分布、归巢、分化和组织整合等功能评价的研究。提供干细胞制剂毒性实验、免疫异常反应、致瘤性、非预期分化等检测服务,提供干细胞的体内存活、分布、归巢、分化和组织整合、疾病治疗、免疫调节等服务。提供提供多种PDX、CDX模型以及多种免疫细胞筛选、分离培养等服务。 查看详情
伙伴们,亿鸣复兴十年的技术服务经验,各种细胞实验亲情放送! 查看详情
TUNEL细胞凋亡检测 (TUNEL Apoptosis Assay) 是一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现 180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞。服务内容1.      组织切片/细胞爬片2.      常规TUNEL检测3.      荧光TUNEL试剂盒检测4.      数据整理及结果分析*根据客户需要对细胞核进行荧光染色客户须知:1.      由客户提供荧光TUNEL检测试剂盒2.      本公司保证数据的客观性、准确性,但不保证与客户预期吻合服务价格及周期:服务项目服务内容 价格组织切片常规切片20元/片常规TUNELDAB显色法TUNEL检测,成像分析400元/样本荧光TUNEL使用荧光TUNEL检测试剂盒,荧光成像分析300元/样本数据分析成像分析及数据统计套餐内(免费)交货时间: 15~20天 提供结果:1.      成像图片(或按客户需要排列图片,达到可直接发表水平)2.      实验详细流程3.      原始数据4.      标记后(处理后)的样本样本要求:1.      悬浮生长培养细胞的甩片或涂片2.      贴壁生长的培养细胞 3.      冰冻切片 4.      常规石蜡切片 取材保持组织新鲜(组织块以小于50px×37.5px×7.5px为宜),立即放入固定液(固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液,体积为组织块的10倍以上)中,避免干燥;对于有血迹的样本,可用PBS液或生理盐水冲洗后直接放入固定液中;经固定后的样本必须在48小时内处理。注意事项:1.      结果分析时注意:在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA片断,从而引起假阳性结果;而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全,以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应,进而产生假阴性结果。2.      初次检测细胞凋亡,最好设置阳性对照片。血细胞含量高的组织,尽可能延长过氧化氢的灭活时间。苏木素的复染时间需要摸索。3.      每片所加试剂可调整,一般30~100 ul不等,但也要防止液体挥发而干片,且反应均在放置湿盒内。  查看详情
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