单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1),也称CCL2,是吸引单核细胞、记忆性T细胞和树状突细胞到组织损伤和感染部位有重要作用的炎症细胞因子。 MCP-1通过脂肪组织的炎症反应(巨噬细胞浸润)参与肥胖症和胰岛素抵抗。 另外, MPC1可在风湿性关节炎人群的关节中找到,以吸引巨噬细胞使炎症持续。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人MCP-1的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: MCP-1试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人MCP-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人MCP-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品MCP-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。MCP-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
肥胖症增加代谢综合症、高血压、动脉粥样硬化和血栓形成的风险。 许多蛋白被认为是肥胖与代谢综合症和心血管疾病发展的相关蛋白,包括脂联素,瘦素, 肿瘤坏死因子—a, 胰岛素样生长因子-1, 抵抗素, 促生长因子-b, 白介素-6和纤溶酶原激活抑制因子-1。为同时测定这8种蛋白质的血浆浓度, 美国Signosis开发出复合酶免法平行检测试剂。 每一板条包被有针对肥胖症生物标记蛋白的特异抗体,每条上的8个孔可以测定8种不同蛋白。 二个样品之间蛋白质的区别可以通过数据比较加以测定,因此有助于发现不同样本中这些蛋白的变化。 A. 优点: · 多种复合---单一板条可同时测定8种肥胖症生物标记物 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA-1002为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 板条每个孔包被有针对肥胖症生物标记蛋白的特异抗体,8个孔包被有8不同抗体,一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应,肥胖症生物标记蛋白夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。 肥胖症生物标记蛋白的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。
CA19-9是最重要的和最基本的碳水化合物肿标志物。 CA19-9的免疫组织学分布与CA19-9浓度的定量测定是一致的。 最近报告表明CA19-9水平在各种消化道恶性肿患者血清中常常升高,如胰腺、结肠直肠、胃。 与CEA结合,CA19-9升高提示炎症性胆囊疾病引发的胆囊瘤。 研究显示出,血清CA19-9值可用于监测上述诊断性的恶性疾病。治疗后血清CA19-9持续升高表示有隐性转移和/或者残留病灶。 血清CA19-9持续升高与恶性疾病的进展和不良的治疗反应有关。 CA19-9水平下降表示对治疗反应良好,预后良好。美国Signosis CA19-9免疫测定法酶免试剂为CA19-9的定量测定提供一个快速,敏感和可靠的分析方法,该试剂的灵敏度为10 U/ml。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对CA19-9的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: CA19-9酶免试剂为固相酶免法。 方法采用CA19-9不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗CA19-9抗体做检测抗体, 待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,CA19-9夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。CA19-9的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
C反应蛋白(CRP)具有结合和沉淀肺炎球菌C多聚糖的能力。CRP在肝脏合成,血清或血浆中水平较低,小于0.3 mg/dl 。CRP生理作用多样, 主要是宿主防御。 CRP是急性期蛋白,在针对多种疾病的非特异反应时血清或血浆水平上升,疾病包括由革兰氏阳性和革兰氏阴性的细菌感染,风湿性关节炎急性期,胃肠脓肿和胆管炎症。 CRP也存在于巴利综合症和多发性硬化症、某些病毒感染、结核病、急性传染性肝炎,坏死和炎症疾病,烧伤和手术创伤的患者中。 前瞻性调查显示急性心肌梗塞CRP水平上升与梗塞后的不良反应和梗塞大小之间呈正相关。血清中CRP水平升高不是特定疾病所特有的,是炎症过程有用的指示物。 血清或血浆中的CRP水平在组织损伤时的24到48小时内上升,急性期到达峰值(约1000倍),炎症或创伤恢复后减少。 人血清或血浆中CRP浓度的增加在降至正常水平之前可持续数天。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对C反应蛋白的配对抗体 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 技术原理 C反应蛋白试剂为固相酶免法。 方法采用针对C反应蛋白不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗C反应蛋白抗体做检测抗体, 待测样品中的C反应蛋白可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。C反应蛋白的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
NFkB 是一种广泛存在的转录因子,在细胞对各种刺激的反应中起着重要作用,这些刺激包括:压力、细胞因子、自由基、紫外线照射、氧化的LDL、细菌和病毒的抗原。NFkB的异常调节与炎症、自身免疫性疾病、脓毒性休克、病毒感染和不适当的免疫进展相关联。NFkB激活时,与其抑制剂IkB解离,从细胞质移到细胞核,在此与靶DNA 结合,正调节基因的转录,参与免疫和炎症反应、细胞调节以及凋亡。通过结合CLTM cDNA合成试剂 (该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液进行反转录), 美国Signosis公司研发了一种基于微孔板杂交阵列直接检测细胞裂解液中20多种NFkB调节基因表达。 A. 优点: 细胞裂解液中人NFkB调控的cDNA检测试剂具有以下优点: ·操作简单---无需RNA制备,直接用细胞裂解液合成cDNA。此外试验ELISA一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 与常规的需要总RNA进行反转录不同,美国Signosis开发了一种基于CLTM cDNA合成的微孔板阵列试剂。该试剂无需RNA制备,直接用用细胞裂解液通过反转录合成cDNA,然后用合成的cDNA探针进行微孔板阵列的杂交。通过预包被在微孔板上特异的寡核苷酸,靶基因被特异的捕获,捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,发光程度用微孔板发光检测仪表示为RLUs,基因表达水平直接与发光强度成正比。
嗜酸细胞趋化因子-3(Eotaxin-3),现在也称趋化因子 (C-C基序)配基26 (CCL26)或巨噬细胞炎性蛋白4-a(MIP-4-alpha),属于CC 趋化因子家族的细胞因子。 它吸引并激活嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和Th2型T淋巴细胞。 它由一些组织和IL-4细胞因子刺激的内皮细胞表达,组织包括心脏、肺和卵巢。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人Eotaxin-3的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: Eotaxin-3试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗人Eotaxin-3抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-2抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品Eotaxin-3夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。Eotaxin-3的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
快速生长的肿瘤会出现缺氧区,大部分细胞对缺氧的反应是(1)产生VEGF和其它缺氧诱导的血管生成因子以促进增加血管生成,从而增加组织的氧合(2)从有氧的磷酸化到缺氧的糖酵解的代谢转换。缺氧诱导因子-1(HIF-1)是在缺氧反应过程中有重要作用的一种氧调控转录激动剂。HIF-1a亚单位是氧依赖性泛素化和蛋白酶体降解。细胞因子如白介素-1和肿瘤坏死因子-a刺激HIF-1依赖的基因表达。HIF-1增加促进血流及炎症的数种基因的表达,如血管生成因子(VEGF)。通过结合CL(TM )cDNA合成试剂 (该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液进行反转录), 美国Signosis公司研发了一种基于微孔板杂交阵列直接检测细胞裂解液中20多种HIF调节基因表达。 A. 优点: 细胞裂解液中人HIF调控的cDNA检测试剂具有以下优点: ·操作简单---无需RNA制备,直接用细胞裂解液合成cDNA。此外试验ELISA一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 与常规的需要总RNA进行反转录不同,美国Signosis开发了一种基于CL(TM )cDNA合成的微孔板阵列试剂。该试剂无需RNA制备,直接用细胞裂解液通过反转录合成cDNA,然后用合成的cDNA探针进行微孔板阵列的杂交。通过预包被在微孔板上特异的寡核苷酸,靶基因被特异的捕获,捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,发光程度用微孔板发光检测仪表示为RLUs,基因表达水平直接与发光强度成正比。
白介素-2 (IL-2)是在微生物感染中发挥重要作用的细胞因子,主要由激活的T细胞产生。 IL-2通过与T细胞、 B细胞、NK细胞和抗原呈递细胞表达的IL-2受体结合发挥其功能。 IL-2和IL-2R之间相互作用, 通过活化特定基因的表达,刺激抗原选择的细胞毒T细胞的生长、分化和生存。 IL-2在胸腺T细胞发育期间也是独特的T细胞亚群成熟所必需的。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人IL-2的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. B. 原理: IL-2试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗人IL-2抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-2抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品IL-2夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。IL-2的浓度与待测样品的颜色呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
纤溶酶原激活抑制因子(PAI-1)是抑制纤溶酶原激活剂蛋白家族成员之一。PAI-1是47 kDa分子量的单链糖蛋白。PAI-1是tPA和血液中其它纤溶酶原激活剂的主要抑制剂。PAI-1主要是由内皮细胞产生,脂肪组织也合成。在胰岛素抵抗患者中可观察到血浆PAI-1水平升高的脂肪组织产生的PAI-1。PAI-1水平升高显示与一些动脉粥样硬化的风险因素相关。胰岛素和前胰岛素与PAI-1水平相关。胰岛素抵抗综合症状和糖尿病患者有增加PAI-1水平的倾向。减肥和降低甘油三酯和/或胆固醇的治疗也显示可降低PAI-1水平。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人PAI-1的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: PAI-1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人PAI-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人PAI-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品PAI-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。PAI-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。
肿瘤抑制蛋白P53是一种多功能分子,可调控细胞周期,DNA修复和凋亡,这种调控作用的发挥是通过与许多其它分子的相互作用来进行,这些分子包括TFIID、TFIIH、casein kinase 2、HIPK2、JNK1、HIF-1a、Ref-1、HDAC1、p300/CBP、MDM2、p63、p73 等等。这种相互作用通过转录激活活性和蛋白稳定性调控P53。美国Signosis 提供一种有效的P53免疫共沉淀试剂盒以系统研究P53相互作用。试剂盒包括Myc标签的P53表达载体,抗-Myc抗体结合的磁珠,以及免疫共沉淀P53和P53相关蛋白的全部试剂。 A. 优点: · P53免疫共沉淀试剂盒具有下列优势: · 快速---高亲和性的抗·C-Myc抗体交联的磁珠免疫沉淀带·C-Myc标签的蛋白或免疫共沉淀相互作用物,无需前分离步骤,缩短孵育时间。 · 噪音低--- 用于WB检测时,非特异信号低。 ·结果一致性高---磁珠易于通过磁架分离,少而快的洗涤无样品丢失。 ·简便---试剂盒包含全部试剂组份。 B. 原理: Myc标签的P53表达载体用于转染靶细胞。转染后,P53表达Myc抗原决定部位标签,与反应蛋白结合。复合物与P53可以快速高效的与包埋在磁珠上的抗Myc抗体免疫共沉淀,共沉淀复合物通过磁力架进一步与未结合的蛋白分开,洗涤后,复合物高效彻底的从磁珠上洗脱下来,用SDS-PAGE分离以进一步WB分析。磁珠上固相的Myc抗体在低PH洗脱条件下通过阻止轻链和重链的解离提供更好的WB检测。