英文名称：ANXN V FITC APOPTOSIS DTEC KIT I品  牌：BD货  号：556547规   格：100T供应商：北京博迈斯科技发展有限公司Annexin V-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒说明书一、概述        在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡最早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。二、试剂盒组份 (Product code Description) 货号名称规格公司556547Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I100TBDComponents:556547a Annexin V Binding Buffer10X conc (51-66121E)556547b Annexin V-FITC(51-65874X)556547cPropidium Iodide Staining Solution(51-66211E)三、步骤         贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时，注意必须彻底清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。四、保存：4℃保存，两个月内可保持稳定；避免反复冻融。五、注意事项（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。（5）在细胞洗涤的最后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首先进行Annexin V-FITC染色，最短可在上机前5分钟再加入PI染色。 

英文名称：Cell Counting Kit-8 （ CCK-8 试剂盒）中文名称：细胞增殖毒性检测试剂盒（CCK-8）货号：ck04规格：500T品牌：日本同仁（Dojindo ）Cell Counting Kit-8 （ CCK-8 试剂盒）是由同仁化学研究所（ Dojindo ）开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒，为 MTT 法的替代方法，试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐 -WST-8。 CCK-8 法与普通的 MTT 法相比，具有显著特点：★ 灵敏度高，数据可靠，重现性好★ 操作简便，省时省力★ 水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞★ 无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低★ 为 1 瓶溶液，毋需预制，即开即用★ 适合于高通量药物筛选CCK-8 用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK-8 试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用，国际认可度高，使用 CCK-8 发表的中外文献达 600 多篇，其中截止目前， SCI 影响因子 IF ＞ 10 分的论文有 40多 篇，最高 IF35 分[Exome sequencing of hepatitis B virus–associated hepatocellular carcinoma，Nature Genetics,2012,44, 1117–1121][LIN28B induces neuroblastoma and enhances MYCN levels via let-7 suppression,Nature Genetics, 2012,doi:10.1038/ng.2436] CCK-8 试剂与 MTT 等方法灵敏度比较

英文名称：Freund’s Adjuvant, Complete中文名称：弗氏完全佐剂品牌：sigma货号：F5881供应商：北京博迈斯General description每毫升含 1mg 热灭活的干燥结核分枝杆菌 (H37Ra, ATCC 25177)、0.85mL 石蜡油和 0.15mL 二缩甘露醇一油酸。ApplicationAntigens (preferably in saline) are typically mixed with an equal volume of the adjuvant to form an emulsion.1弗氏佐剂可用于制备免疫原的油包水乳液。由于抗原释放缓慢，油包水乳液中的抗原可刺激高效长期的抗体应答。Biochem/physiol Actions弗氏完全佐剂中的分枝杆菌可将巨噬细胞和其他细胞吸引到注射部位，从而增强免疫应答。鉴于此原因，将弗氏完全佐剂用于初始注射，而将弗氏不完全佐剂用于随后的加强注射。