笃玛 大豆苷元  产品简介1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48μmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液24μmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液12μmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液6μmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液3μmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。笃玛 大豆苷元  产品简介注意事项1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。7. 底物请避光保存。8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。笃玛 大豆苷元  产品简介标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。 

羊抗狗IgG血清常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目标蛋白；其纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸（His-His-His-His-His-His）组成的短肽，专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小，且较容易分离和纯化，是目前使用最广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高，表达产物纯化方便，利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达，以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签（序列为：EQKLISEEDL）已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但应用相对较少。羊抗狗IgG血清应用范围：酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中对应抗原，或封闭对应杂抗体，测定对应抗原浓度，或抗原夹芯法测定对应抗体，吸收杂抗原成分，层析纯化抗原，分析与鉴定对应抗原成分，封闭交叉抗原，测定对应抗原成分，测定抗原纯度等。 1.液体抗血清保存原则：避免反复冻融2.短期保存的抗血清：如几周内就会使用，收到后推荐在 2-8℃保存，2-8℃短暂保存数周对活性没有影响。3.长期保存的抗体：如抗体需超过 1 个月后才会使用，请酌情分装后于-20℃保存。羊抗狗IgG血清10270-106胎牛血清   血清的主要成分：血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。10270-106胎牛血清   其他血清产品推荐：Gibco  16000-044胎牛血清(澳洲）优级胎牛血清最受欢迎的FBS产品。高品质，高价值，适用于更娇贵的细胞培养和部分干细胞的培养。

羊抗人全血清应用范围：酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中对应抗原，或封闭对应杂抗体，测定对应抗原浓度，或抗原夹芯法测定对应抗体，吸收杂抗原成分，层析纯化抗原，分析与鉴定对应抗原成分，封闭交叉抗原，测定对应抗原成分，测定抗原纯度等。 1.液体抗血清保存原则：避免反复冻融2.短期保存的抗血清：如几周内就会使用，收到后推荐在 2-8℃保存，2-8℃短暂保存数周对活性没有影响。3.长期保存的抗体：如抗体需超过 1 个月后才会使用，请酌情分装后于-20℃保存。羊抗人全血清常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目标蛋白；其纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸（His-His-His-His-His-His）组成的短肽，专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小，且较容易分离和纯化，是目前使用最广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高，表达产物纯化方便，利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签（序列为：EQKLISEEDL）已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但应用相对较少。羊抗人全血清试剂及配制1、缓冲生理盐水：（ 1） 贮存液： Na2HPO4.12H2O 2.85g                KH2PO4 0.27g                NaCl 17.00g                蒸馏水定容至 100ml                4℃保存备用（ 2）应用液： 5ml 贮存液加 95ml 蒸馏水，再加 10%硫酸镁 0.1ml， 当日配制， 12 小时内使用。2、2%绵羊红细胞：无菌采取绵羊血液，于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以缓冲液洗 3次，并配成 2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。3、溶血素：将绵羊红细胞溶血素（效价 1:4000），用应用液做 1:2000 倍稀释（即 1ml 溶血素加 1999ml 应用液）。4、待测血清：新鲜血液室温放置 30min，再 4℃放置 60min，使血块收缩， 4℃离心（ 3000r/min）10min，取上清， -20℃保存。

羊抗人Tf血清操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。羊抗人Tf血清标本的采集及保存1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。最后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则：临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。羊抗人Tf血清免责声明1.   试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

鸡骨成型蛋白7 (BMP-7) ELISA 试剂盒注意事项1． 本产品为20次操作，包括标准样品2． 本产品检测范围在0.1毫克/升（10微摩尔/升）至8.5毫克/升（250微摩尔/升）3． 操作时，须戴手套4． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全5． 系统操作过程中，标准样品测定只需1次6． 试剂出现沉淀可以离心去除后检测7． 测定值由低到高变化8． 用户可以使用664nm至670nm波长范围的任一波长进行检测9． 比色测定后，比色皿须清洗彻底10． 如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品量11． 样品中碘（iodine）大于2毫克/升、硫代硫酸盐（thiosulfate）或亚硫酸盐（sulfite）大于10毫克/升、氰亚铁酸盐等可能干扰检测12． 硫化氢浓度换算：1毫克/升=29.4微摩尔/升13． 本公司提供系列生化学检测试剂产品鸡骨成型蛋白7 (BMP-7) ELISA 试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。   鸡骨成型蛋白7 (BMP-7) ELISA 试剂盒标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

鸡肝配蛋白A受体1 (EPHA1) ELISA 试剂盒上海笃玛生物科技有限公司是一家国内合资集科研和生产为一体的专业化生物公司。专业提供各类进口品牌，研发生产ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基等产品，并提供实验外包，技术指导，操作指导，代做实验，代做课题等技术服务。公司拥有世界水平的研发团队、技术、研发平台及现代化的生产基地，生产各类科研用的产品。 我们由衷的感谢海内外科学家、感谢国内外广大科研工作者、学者予以我们鼎力的支持和理解，我们将在未来的工作中，百尺竿头，发挥优势，勇于开拓、自主创新、敢为人先、锲而不舍，在生命科学的道路上，不断进取，奋发努力，瞄准国际生命科学的前沿，不断创新研发新产品。为科研工作提供更好、更人性化的服务。上海笃玛生物技术有限公司拥有六大服务平台：生物样品分析平台、微阵列芯片平台、新一代测序平台、生物标志物平台、分子检测平台、生物信息平台，凭借高标准的技术平台和多样化的服务等竞争优势，公司向国内外企业和相关单位提供系统的生物学研究全面解决方案。目前正在为多达18家跨国制药企业（包括排名前10位的跨国制药企业）和超过3000家的国内科研机构、医院等提供基因表达谱、基因分型、比较基因组学、DNA甲基化miRNA、生物标志物筛选及确认、生物信息等技术服务。笃玛生物成立的初衷就定位于以人为本，以品质取胜的理念，为我们国家生命科学研究做一些力所能及的工作。公司主要经营的产品有测试盒、标准品、有机试剂以及常用的进口试剂品牌的代理，质量保证。多年来我们一直坚守着这个承诺，在工作中自始至终贯穿着为科研服务-这个一贯的宗旨。我们由衷的感谢海内外科学家、感谢国内外广大科研工作者、学者予以我们鼎力的支持和理解，我们将在未来的工作中，百尺竿头，发挥优势，勇于开拓、自主创新、敢为人先、锲而不舍，在生命科学的道路上，不断进取，奋发努力，瞄准国际生命科学的前沿，不断创新研发新产品。为科研工作提供更好、更人性化的服务。鸡肝配蛋白A受体1 (EPHA1) ELISA 试剂盒ELISA的样本实验准备在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。3. 尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。5. 培养细胞    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6. 组织标本    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。                                     笃玛代测服务：技术服务内容： 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。寄标本时需注明以下情况：1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；4、联系方式；5、实验后标本是否寄回。鸡肝配蛋白A受体1 (EPHA1) ELISA 试剂盒免责声明1.   试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

笃玛 鸡白介素1β(IL-1β) ELISA 试剂盒  产品信息ELISA 实验步骤：1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。5.显色：TMB显色A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液：2N硫酸A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。6.450nm 波长测OD值笃玛 鸡白介素1β(IL-1β) ELISA 试剂盒  产品信息常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目标蛋白；其纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸（His-His-His-His-His-His）组成的短肽，专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小，且较容易分离和纯化，是目前使用最广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高，表达产物纯化方便，利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签（序列为：EQKLISEEDL）已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但应用相对较少。笃玛 鸡白介素1β(IL-1β) ELISA 试剂盒  产品信息样品收集、处理及保存方法1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。                

笃玛 香蒲新苷  产品价格操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。笃玛 香蒲新苷  产品价格注意事项1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。7. 底物请避光保存。8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。笃玛 香蒲新苷  产品价格性能:1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2．灵敏度：最低检测浓度小于10 pg/ml。3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。上海笃玛生物科技有限公司包被抗体均使用进口抗体，质量稳定，性价比高优势：1.高效，灵敏，特异的抗体2.稳定的重复性和可靠性3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高和固相载体4.适用血清，血浆，组织匀浆液，细胞培养上清液，尿液等多种标本类型上海笃玛生物科技有限公司供应的经国家认证，以免疫学反应为基础，在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，并得到权威的确证方法和确证的样品进行检测。公司专业提供各种种属，供应的ELISA试剂盒统一价销售。

笃玛 高车前素  产品简介标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。 笃玛 高车前素  产品简介标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。笃玛 高车前素  产品简介样品收集、处理及保存方法1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 

笃玛 牛基质金属蛋白酶25(MMP-25) ELISA 试剂盒  产品价格Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法    1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。    3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。    4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。    5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。    6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。笃玛 牛基质金属蛋白酶25(MMP-25) ELISA 试剂盒  产品价格ELISA 实验步骤：1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。5.显色：TMB显色A液：四甲基10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液：5ul加蒸馏水12.5ml 。终止液：2NA液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。6.450nm 波长测OD值笃玛 牛基质金属蛋白酶25(MMP-25) ELISA 试剂盒  产品价格操作注意事项1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.  所有液体组分使用前充分摇匀。