笃玛 冻干羊抗人a2M血清 产品价格小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。组份与比例不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。笃玛 冻干羊抗人a2M血清 产品价格标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。笃玛 冻干羊抗人a2M血清 产品价格新生牛血清,类标准胎牛血清是笃玛生物的优质产品,笃玛生物成立的初衷就定位于以人为本,以品质取胜的理念,为我们国家生命科学研究做一些力所能及的工作。公司主要经营的产品有测试盒、标准品、有机试剂以及常用的进口试剂品牌的代理,质量保证。新生牛血清,类标准胎牛血清血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。常温状态下短期融化并不会影响血清质量。产品有效期,检定合格之日起有效期5年。新生牛血清,类标准胎牛血清
山羊血清新生牛血清,类标准胎牛血清是笃玛生物的优质产品,笃玛生物成立的初衷就定位于以人为本,以品质取胜的理念,为我们国家生命科学研究做一些力所能及的工作。公司主要经营的产品有测试盒、标准品、有机试剂以及常用的进口试剂品牌的代理,质量保证。新生牛血清,类标准胎牛血清血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。常温状态下短期融化并不会影响血清质量。产品有效期,检定合格之日起有效期5年。新生牛血清,类标准胎牛血清山羊血清常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用最广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但应用相对较少。山羊血清小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?来源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。组份与比例不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
绵羊抵抗素(RETN) ELISA 试剂盒 笃玛生物关于试剂盒性能:1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度:最低检测浓度小于10 pg/ml。3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。上海笃玛生物科技有限公司包被抗体均使用进口抗体,质量稳定,性价比高笃玛生物关于试剂盒的优势:1.高效,灵敏,特异的抗体2.稳定的重复性和可靠性3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高和固相载体4.适用血清,血浆,组织匀浆液,细胞培养上清液,尿液等多种标本类型上海笃玛生物科技有限公司供应的经国家认证,以免疫学反应为基础,在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,并得到权威的确证方法和确证的样品进行检测。公司专业提供各种种属,供应的ELISA试剂盒统一价销售。绵羊抵抗素(RETN) ELISA 试剂盒 笃玛生物试剂盒操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。绵羊抵抗素(RETN) ELISA 试剂盒 标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。3. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低,品质第一,客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。
组织硫化氢含量比色法定量检测试剂盒主要用途 组织硫化氢含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过碱性与肌酐反应,产生蓝色产物所呈现的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中硫化氢含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良亚甲基蓝方法、成功实验证明的。其适用于各种人体、动物组织裂解样品等硫化氢水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。组织硫化氢含量比色法定量检测试剂盒技术背景 硫化氢(hydrogen sulfide;H2S)是一种自然发生的,具有腐蚀性和可燃性,不稳定的易被氧化的无色气体,为半胱氨酸脱硫(desulfuration)代谢产物,是第三个生理性气体信使分子(messenger molecule)或气体传导分子(gasotransmitter),存在于脑、心脏、肺、肝、小肠、胰腺以及海绵体(cavernosum)组织等,其中脑组织含量较低,肾组织含量较高。神经系统的胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)和心血管系统的胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase;CGL)是参与内源性硫化氢生成的主要成员。一旦机体缺氧,硫化氢含量即增高。硫化氢旨在调节组织内含硫氨基酸的水平,具有心血管系统的生理功能和病理生理调节作用,例如诱导血管平滑肌松弛,血管扩张(vasodilation),致血压下降,以及促炎性作用。同时硫化氢具有毒性作用,会造成嗅觉神经迅速瘫痪,抑制细胞色素C氧化酶,增加线粒体膜通道孔开放,引起心脏、小肠、生殖系统、泌尿系统和呼吸系统平滑肌过度松弛,而产生器官损伤、低血压、心动过缓(bradycardia)等症状。在自然环境中,硫化氢是硫循环(sulfur cycle)的主要中间产物,包括有机硫化物的矿物化或分解、微生物的同化作用,以及氧化还原。作为化学窒息性(asphyxiant)气体,硫化氢对于鱼类和其它水生动物具有毒性作用,同时也是细菌污染的标志。使用醋酸锌(zinc acetate)在碱性条件下,捕获硫化氢,形成稳定的硫化锌沉淀;在酸性条件下,溶解的硫化锌与催化剂对氨基二甲基苯胺(N,N-dimethyl-p-phenylenediamine)和氯化铁(ferric chloride)反应,产生蓝色的亚甲基蓝(methylene blue),通过其终点吸收峰值的变化(670nm波长),来定量分析硫化氢的含量。 组织硫化氢含量比色法定量检测试剂盒实验步骤一.样品准备1.手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量 2.(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次4.即刻用刀片切碎组织5.放进一个预冷的15毫升锥形离心管6.加入预冷的xx毫升 清理液(Reagent A)7.涡旋震荡5秒,充分混匀8.即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约40至80下)9.将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管10.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g11.移取500微升到新的1.5毫升离心管12.加入xx微升 稳定液(Reagent B),混匀13.放在冰槽里待测(注意:须1周内使用)二.样品测定1. 移取xx微升 去干扰液(Reagent C)到上述待测样品或标准样品管里,混匀2. 加入xx微升 反应液(Reagent D)3. 加入xx微升 显色液(Reagent E),混匀4. 室温下孵育20分钟5. 放进微型台式离心机离心3分钟,速度为5000g6. 移取1毫升上清液到比色皿7. 即刻放进分光光度仪检测,获得待测样品和标准样品读数组织硫化氢含量比色法定量检测试剂盒注意事项 1.本产品为20次操作,包括标准样品2.本产品检测范围在0.1毫克/升(10微摩尔/升)至8.5毫克/升(250微摩尔/升)3.操作时,须戴手套4.试剂具有腐蚀性,注意操作安全5.系统操作过程中,标准样品测定只需1次6.试剂出现沉淀可以离心去除后检测7.测定值由低到高变化8.用户可以使用664nm至670nm波长范围的任一波长进行检测9.比色测定后,比色皿须清洗彻底10.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品量11.样品中碘(iodine)大于2毫克/升、硫代硫酸盐(thiosulfate)或亚硫酸盐(sulfite)大于10毫克/升、氰亚铁酸盐等可能干扰检测12.硫化氢浓度换算:1毫克/升=29.4微摩尔/升13.本公司提供系列生化学检测试剂产品
兔多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4) ELISA 试剂盒上海笃玛生物科技有限公司现货产品包装:盒装性状:瓶装液体规格:96T/48T保存条件:2-8℃保存期限:6个月运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者生物冰袋低温运输。国产/进口常温保存低温保存咨询客服待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等ELISA人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。兔多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4) ELISA 试剂盒笃玛生物试剂盒操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。兔多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4) ELISA 试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。3. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低,品质第一,客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者
安石榴苷操作注意事项:1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。安石榴苷操作步骤1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 安石榴苷样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。安石榴苷DM-0009澳洲茄边碱Solamargine20318-30-320mgDM-0010澳洲茄胺 Solasodine126-17-020mgDM-0011阿多尼弗林碱Adonifoline甲酸溶液10mgDM-0012 安格洛苷C Angoroside C 115909-22-320mgDM-0013阿马碱Raubasine483-04-520mgDM-0014补骨脂甲素Coryfolin19879-32-420
鸡多配体聚糖4(SDC4) ELISA 试剂盒计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。鸡多配体聚糖4(SDC4) ELISA 试剂盒酶联免疫试验步骤 将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 加样反应:加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。 显 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。 终 止:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,终止反应。 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。鸡多配体聚糖4(SDC4) ELISA 试剂盒常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用最广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但应用相对较少。
Hoechst33342染色液Hoechst 33342也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O· 3HCl·3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也用于普通的细胞核染色、DNA染色。 Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm,Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm, 最大发射波长为461nm。Hoechst33342染色液(含封片剂)可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色,无需封片操作。 Hoechst33342染色液操作步骤(仅供参考): (一)固定的组织细胞染色 1、对于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst33342染色液(含封片剂),覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst33342染色液(含封片剂),充分混匀。2、室温放置5~8min。 3、轻轻吸除Hoechst33342染色液(含封片剂)。 4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次。 5、无需封片,直接在荧光显微镜下观察。 (二)活细胞染色 1、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态,按96孔板加入100ul、24孔板加入500ul、6孔板加入1ml的比例,加入适当的Hoechst 33342染色液,染液必须充分覆盖住细胞。 2、在适宜于细胞培养的条件下培养20~30min。 3、轻轻吸取Hoechst 33342染色液(含封片剂)。4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次,每次3~5min。 5、无需封片,直接在荧光显微镜下观察。 Hoechst33342染色液注意事项: Hoechst33342染色液(含封片剂)的浓度适用于各种常规染色的需要。 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。 避免反复冻融,否则容易失效。 Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。Hoechst33342染色液染色结果:细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
牛白介素2(IL-2) ELISA 试剂盒ELISA试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。ELISA试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。上海笃玛生物科技有限公司主要经营生产ELISA试剂盒,抗体,原料药,植物提取物,品质保证,价格优势。牛白介素2(IL-2) ELISA 试剂盒标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。3. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低,品质第一,客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。牛白介素2(IL-2) ELISA 试剂盒Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。 2 加样 可能原因: 1)血清或血浆标本分离不好即进行加样; 2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法: 1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时,请分批操作。 3 孵育 可能原因: 1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。解决办法: 1) 贴封片或加盖; 2) 按说明步骤严格控制操作时间。 4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法: 1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干; 2) 合理安排,或多用几台洗板机。 5 显色 可能原因: 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法: 1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流; 3) A、B液应避免接触金属器械。 6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时做好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。
鸡趋化因子C-C-基元配体14(CCL14) ELISA 试剂盒操作说明一、实验原理本试剂盒采用间接酶联免疫吸附法(ELISA),利用鸡趋化因子C-C-基元配体14(CCL14)特异性抗体包被酶标板,加入标准品和待测样本,经过孵育、洗涤、加入酶标二抗,再经过孵育、洗涤、加入底物,最后通过酶标仪测量各孔的光密度值,计算样品中CCL14的浓度。二、操作步骤1. 包被:将特异性抗体包被酶标板,加入标准品和待测样本,封板,置于37℃孵育1小时。2. 洗涤:用洗涤液充分洗涤酶标板,去除未结合的抗体和杂质。3. 加入酶标二抗:加入酶标二抗,封板,置于37℃孵育1小时。4. 洗涤:用洗涤液充分洗涤酶标板,去除未结合的酶标二抗和杂质。5. 加入底物:加入底物溶液,封板,置于37℃孵育15-30分钟。6. 终止反应:加入终止液,停止反应。7. 检测:用酶标仪测量各孔的光密度值,记录数据。三、注意事项1. 试剂盒应存放于2-8℃,避免反复冻融。2. 实验操作过程中应保持清洁卫生,避免交叉污染。3. 包被抗体时应使用适量的包被缓冲液稀释抗体,以保持最佳的抗体浓度。4. 加入酶标二抗时应使用适量的酶标二抗缓冲液稀释酶标二抗,以保持最佳的酶标二抗浓度。5. 加入底物时应使用适量的底物缓冲液稀释底物,以保持最佳的底物浓度。6. 终止反应时应使用适量的终止液停止反应,以保持最佳的终止效果。7. 检测时应使用酶标仪测量各孔的光密度值,并记录数据。