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用户提供整体实验方案,吉玛通过评估客户需求,围绕公司特色,结合现有平台及扩展平台,利用分子细胞生物学技术,提供真实试验数据,完成客户外包试验。 1  下游靶基因表达量的鉴定 常规出示的结果同样包括:RT-PCR、Western,如果涉及分泌蛋白,可以进行Elisa实验,客户可指定检测方法 2    稳定株筛选实验 在药物压力下筛选稳定表达细胞株,常规出示结果包括:RT-PCR、Western,客户可指定筛选及检测方法。实验过程:1.抗生素筛选浓度确定(致死曲线):2. 细胞接种:转染实验前天接种细胞。转染时细胞密度达到60%~80%;3. 细胞转染(脂质体)或侵染(慢病毒)4. 利用质粒抗性筛选稳定干扰细胞株;5. 目的基因干扰效果验证。 周期2-3个月,提供T25稳筛细胞株一瓶,具体价格敬请来电咨询。 3   克 隆形成率实验 采用结晶紫或吉姆萨染色法,检测转入靶基因后细胞增殖情况,常规出示结果包括:克隆染色图及柱状分析图 4   细胞增殖实验 采用CCK8或MTT方法,检测细胞增殖的情况,使用CCK-8方法: 据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan,并可被酶标仪检测,间接反应活细胞数量。具体价格敬请来电咨询。(包括4组细胞,每个样品3-5个复孔,客户可以选择检测时间点。) 6   细胞凋亡的分析 采用Annexin V / PI ;   Annexin V-PE /7-AAD或客户自己提供合适的试剂盒,在流式细胞仪上对细胞样品进行细胞。 7   细胞迁移实验(Transwell) 8  细胞划痕实验     通过对划痕部位距离差异的计算,检测细胞迁移能力 9  Confocol实验: 通过融合荧光蛋白或荧光二抗,鉴定目标蛋白细胞内定位,利用抗原-抗体特异性结合的原理,用经荧光染料标记的抗体对细胞内的蛋白质进行定性或定量研究的方法。流程:细胞爬片 转染或药物处理 固定透化 封闭 一抗孵育 荧光二抗孵育 荧光显微镜观察拍照。客户需要提供荧光一抗及二抗,具体价格敬请来电咨询。 10  粘附实验部分 11  酶联吸附实验(ELISA) 4步骤帮您轻松检验各种蛋白大分子抗原: