背景介绍：白蛋白（Serum Albumin）是重要的血浆蛋白质，由于肾小球基膜的正常滤过作用，在健康人尿液中白蛋白一般不超过20mg/L。当发生肾炎等疾病时，肾小球基膜受到损害致使通透性发生改变，尿白蛋白浓度即可出现持续升高。当尿中的微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内，就属于微量白蛋白尿，见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期。尿微量白蛋白升高是提示肾小球滤过膜结构异常的早期敏感指标, 尿微量白蛋白测定可以反映早期肾病、肾损伤情况。在早期尿微量白蛋白阶段是肾病发生的早期信号和预兆，此时肾脏损害处在尚可逆转的时期，如能及时治疗，可以终止或逆转肾病的发展进程。尿微量白蛋白检测也可作为全身性或局部炎症反应的肾功能指标，如尿路感染等原因引起的肾脏早期病变；急性胰腺炎并发症的预测指标；服用对肾功能有影响的药物者也可检测尿微量白蛋白，便于早期观察肾功能情况及早采取措施。 本试剂盒用于体外定量测定人人尿液中白蛋白的含量。本试剂盒具有以下特点：1.线性范围5-240mg/L；2.灵敏度0.5mg/L；3.与日本品牌试剂盒对照，临床一致性95%；4.液体标准品，非冻干品，使用方便；5.主要原料自行研发生产，可保证稳定大量供货。   有需要请联系我们，可申请提供免费试用装，更多ALB抗体原料，试剂尽在武汉戴安生物

武汉戴安生物技术有限公司成立于2015年，位于武汉光谷生物城生物技术研究院，是一家由资深免疫学专家和海外留学人员创建的高科技生物技术企业。公司专注于诊断试剂及其核心原料的研发生产及技术服务工作。公司拥有完善的蛋白质表达体系，抗体制备体系，诊断试剂研发体系，研发人员拥有十余年从业经验，技术积累深厚，设备精良完善，在重组蛋白质表达纯化、天然蛋白质提取、抗体研发和生产方面达到行业顶尖水平，已建立了从诊断试剂抗原抗体原料开发，到诊断试剂制备的研发生产路线，拥有诊断用抗原抗体的研发及放大生产技术平台，生化试剂大包装研发生产平台，核心产品包括SAA，AFP，PCT，铁蛋白等项目的抗体、校准品和生化试剂。公司也为客户提供专业的抗体定制及相关技术服务，包括科研用多克隆抗体和单克隆抗体定制，药物阻断用抗体筛选，中和抗体制备等技术服务。单克隆抗体定制项目周期约5-6个月，具体价格请咨询公司。单克隆抗体是杂交瘤细胞产生的针对单一抗原决定簇的免疫球蛋白，其最大的优势是特异性强、灵敏度高及强大的批次稳定性。近年来单克隆抗体对蛋白质研究、药物筛选、疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等，均展示出重要的研究价值。武汉戴安生物凭借多年的抗体研发和生产经验，进一步对单克隆抗体生产、筛选、纯化、检测等服务流程进行全方位升级。尤其在诊断用单抗，药物筛选用单抗制备方面拥有行业领先核心技术。最新推出的保证型单克隆抗体定制服务，不成功不收费！ 服务特色●免费分析抗原序列，利用专业的抗原设计软件设计抗原，结合文献，综合选择免疫原序列；●可制备高质量的抗原（重组蛋白纯度>90%，浓度1mg/ml）；●采用自我研发新型佐剂免疫动物，可最大程度提高效价；●可提供5-10株阳性细胞株上清供客户筛选；●满足客户各种属KO验证，确保抗体特异性；●每株细胞可提供亲和纯化的单克隆抗体5-10mg；●除小鼠单克隆抗体外还推出了大鼠单克隆抗体，解决小鼠蛋白的抗体因抗原同源性而造成的免疫耐受的问题；具备pM级的亲和性和高特异性，可同时识别人类蛋白及其小鼠同源蛋白； 大鼠单抗细胞上清的产量可达70-120ug/ml，提供稳定分泌抗体功能的大鼠杂交瘤细胞株；● 小分子单克隆抗体成功率高：半抗原设计经验丰富，免疫半抗原设计的基本原则是免疫半抗原与载体连接后在结 合抗原中能最大程度保持和突出待测物的特征结构，特别是立体结构，且与载体蛋 白偶联效率高，时间短；偶联位点可选，偶联比根据客户要求可调整；小分子半抗原活化后分别偶联蛋白制备完全抗原（免疫抗原）与检测抗原，蛋白电泳测试。 我们承诺（1） 客户进行Western Blot内源性或者IP过表达检测小样后能够检测到目的条带（说明抗体验证合格）；（2） Western Blot内源性或者IP过表达检测阴性无法满足实验需要，等于此抗体订单验证失败，则甲方无需再付此项目剩余尾款；（3） 间接ELISA检测抗血清效价，针对免疫原效价不低于1:160,000；（4） 客户有权随时了解服务项目进展情况，并对成果拥有全部所有权。 交付结果（1） 纯化的免疫原小样一份（100ug左右）；（2） 腹水纯化抗体5-10mg ；（3） 质粒小样一份；（4） 阳性细胞株3株（如需更多，可与公司沟通）（5） 20μL小鼠免疫前阴性血清（有需要请备注）；（6） 项目服务报告 。

武汉戴安生物技术有限公司成立于2015年，位于武汉光谷生物城生物技术研究院，是一家由资深免疫学专家和海外留学人员创建的高科技生物技术企业。公司专注于诊断试剂及其核心原料的研发生产及技术服务工作。公司拥有完善的蛋白质表达体系，抗体制备体系，诊断试剂研发体系，研发人员拥有十余年从业经验，技术积累深厚，设备精良完善，在重组蛋白质表达纯化、天然蛋白质提取、抗体研发和生产方面达到行业顶尖水平，已建立了从诊断试剂抗原抗体原料开发，到诊断试剂制备的研发生产路线，拥有诊断用抗原抗体的研发及放大生产技术平台，生化试剂大包装研发生产平台，核心产品包括SAA，AFP，PCT，铁蛋白等项目的抗体、校准品和生化试剂。公司也为客户提供专业的抗体定制及相关技术服务，包括科研用多克隆抗体和单克隆抗体定制，药物阻断用抗体筛选，中和抗体制备等技术服务。现货标签内参抗体均为自主研发，严格质检，质量优良。一． 背景信息Flag-Tag（DYKDDDDK）， 常用于真核蛋白质重组表达标记。 FLAG标签（DYKDDDDK）亲和凝胶，由高品质的Flag兔多克隆抗体与Sepharose 4B琼脂糖颗粒共价偶联制成，具有高载量（至少为1.2mg protein/ml凝胶），高特异性，性质稳定，可反复使用的特点，可用于Flag标签融合蛋白的亲和纯化及免疫（共）沉淀。二． 性能指标应用范围： 可用于Met修饰的N端Flag融合蛋白（Met-Flag–Protein），N端Flag融合蛋白（Flag–Protein）和C端Flag融合蛋白（Protein-Flag）的亲和纯化及免疫（共）沉淀。载量：    1ml Sepharose 4B琼脂糖颗粒，共价偶联800μg Anti-Flag兔多克隆抗体，可纯化或沉淀至少1.2mg Flag融合蛋白。强度：   重力柱纯化，可反复使用5次以上。成分：   共价偶联Anti-Flag抗体的Sepharose 4B琼脂糖颗粒,  1ml溶于2ml PBS+50%甘油中。保存方法： 在加入了50%甘油和0.2‰叠氮钠的PBS保存液中，-20℃可保存1年。三． 使用方法细胞裂解液制备1)   悬浮细胞和半贴壁细胞从细胞培养瓶上吹下来后放入离心管中，  1000rpm 离心5分钟。贴壁细胞用细胞刮子轻轻从瓶壁上刮下来，放入离心管中1000rpm离心5分钟。2)   预冷的PBS重悬细胞，1000rpm离心3min，弃上清。重复一次。3)   根据细胞的量加入相应体积的细胞裂解液， 反复吹打后冰上放置10-20min，让细胞充分裂解。4)   用超声破碎仪将细胞裂解液超声，直至细胞裂解液透明，不再粘稠。冰上放置30min之后，12000rpm，4℃离心10min。取上清，冷冻保存。应用一. 免疫（共）沉淀法检测FLAG标签蛋白质1)   重悬Anti-FLAG标签亲和凝胶至均一，转移30ul混合液(约含15ul凝胶)至离心管中，加入5倍凝胶体积PBS，5000rpm x 30sec，弃上清，重复该步骤清洗凝胶三次。2)   加入适量含有目标蛋白的真核细胞裂解液，室温孵育2hr或者4℃孵育过夜。3)   加入5倍凝胶体积PBS，用上述离心法清洗凝胶三次； 预冷的5倍凝胶体积pH 5.0酸性预洗液洗涤凝胶, 除去非特异性结合蛋白。离心，弃上清。4)   加入5x上样缓冲液，煮沸5min，冷却至室温并离心。5)   取上清进行SDS-PAGE或Western Blotting检测。应用二. 亲和纯化FLAG标签蛋白质1)   根据使用目的选用重力柱或离心管，移入适量亲和凝胶，10倍凝胶体积PBS清洗亲和凝胶。2)   加入适量含有目标蛋白的真核细胞裂解液，室温孵育2hr或者4℃孵育过夜。3)   5倍凝胶体积PBS洗凝胶三次； 用预冷的5倍凝胶体积pH 5.0酸性预洗液洗涤纯化凝胶, 除去非特异性结合蛋白。根据需要从以下两种洗脱液中选择a. 预冷的10倍柱体积pH 3.0的酸性洗脱液进行洗脱， 每次收集1ml, 收集管中预先放入中和液50μl。注意：酸性环境会缩短亲和纯化凝胶的使用寿命，应尽量缩短亲和纯化凝胶与酸性洗脱液的接触时间。b. 加入10倍凝胶体积 3×Flag peptide洗脱液进行洗脱， 每次收集1ml。4)   用紫外检测仪测定收集峰, 合并收集峰。5)   SDS-PAGE鉴定蛋白质纯度及浓度，并按照需求处理和保存蛋白质。                  四． 推荐缓冲液配方以下配方仅为本公司推荐，客户应根据具体情况进行调整。细胞裂解液：  150mM NaCl,  50 mM Tris-HCL(PH8.0)，1% Triton X-100，5 mM EDTA 3×Flag peptide洗脱液：     3xFlag peptide干粉，使用前溶于10 ml 1xPBS，工作浓度为100μg/ml酸性洗脱液：  0.15M Gly-HCl缓冲液，pH3.0中和液： 1M Tris HCl缓冲液，pH8.010xPBS： 1.5M PBS buffer， pH7.5，with 2‰ Azide （使用时须用双蒸水稀释10倍）酸性预洗液：  0.15M PBS buffer，pH5.0

FLAG-Tag mouse mAb Cat#: 2064Synonyms:DYKDDDDKAttribute:Mouse   Monoclonal Antibody Isotype:IgG2aPurity:Antigen Affinity PurificationApplication:ELISA, WB, IP,   IFCalculated MW:Observed MW:Reactivity：Human,Mouse,Rat,Zebra   fishImmunogen：Peptide DYKDDDDK    Buffer：PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol,  pH 7.2Storage:Store at -20℃.   Do not aliquotRecommended Dilution:WB: 1:5000-10000IP: 3ug/sampleIF: 1:100-200Background：FLAG-tag   is a polypeptide protein tag that can be added to a protein using recombinant   DNA technology, having the sequence motif DYKDDDDK. It has been used for   studying proteins in living cells and for protein purification by affinity   chromatography. This antibody detects FLAG tag in most applications..

at#:2112   Anti-DNA-RNA Hybrid [S9.6] Antibody                                                                                                           Synonyms:DNA-RNA hybrid; RNA/DNA   hybridAttribute:Mouse   Monoclonal   AntibodyIsotype:Mouse IgG2aPurity:Protein A/G PurificationApplication:ELISA, IP, IF, CHIP, Dot BlotImmunogen：ΦX174 bacteriophage-derived synthetic DNA/RNABuffer：PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol,   pH 7.2Storage:Store at -20℃.   Do not aliquotRecommended Dilution:WB: 1:1000-2000IP: 1:50-500ChIP:1:50-1:500IF: 1: 200Background：The DNA-RNA   hybrids are a natural occurrence within eukaryotic cells and their level are   high at sites of high transcriptional activity. They are non-canonical   nucleic acid structures with transcriptional regulatory functions. Their   presence is reported to predispose a locus to chromosomal breakage. The S9.6 monoclonal   antibody recognizes DNA-RNA hybrids (also known as R-loops) and does not bind   to single or double stranded DNA. The antibody has high affinity for DNA-RNA   hybrids but also binds RNA-RNA hybrids that are AU-rich. The specificity of   the antibody appears to be determined by a combination of sequence and   structural dependency since R-loop sequence affects binding affinity.Immunofluorescentanalysis of ( 4% PFA) fixed HeLa cells usingDNA-RNA hybrid Mouse Monoclonal   Antibody [S9.6]   at dilution of 1:500and Alexa Fluor 647- conjugatedAffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)Chromatin   immunoprecipitationanalysis of   HeLa cellsgenomic DNA(gDNA)using DNA-RNA hybrid Mouse Monoclonal   Antibody [S9.6]   at dilution of 1:200

武汉戴安生物是国内最高推出保证型鼠单克抗体定制的抗体制备公司之一，已为多所高校和研究机构提供优质单克隆抗体。鼠单克隆抗体制备技术自1984年Koler,Milstein & Jerne公布以来，已经发展了三十多年，相对成熟。有很多定制的老师咨询开发兔单克隆抗体制备的服务，戴安生物在原有的鼠单抗隆抗体技术平台基础上，学习和摸索，建立和完善了兔单抗隆抗体技术平台。兔单抗隆抗体比与鼠单克隆抗体相比，有以下优势：1）有更高的亲和力和特异性；2）可识别更多抗原表位；3）有更多的候选阳性克隆；4）更易于人源化；戴安生物以自有核心技术建设的兔单抗隆抗体技术平台，利用兔免疫系统自身的优势，获得高特异性、高亲和力的兔B淋巴细胞，培养B淋巴细胞获取抗体基因及序列，通过重组表达获得兔单抗，成功率高，品质出众。该平台尤其适用于针对各种难度靶点，如修饰性多肽、小分子化合物，细胞因子及膜蛋白等在小鼠体内免疫原性很弱的抗原，制备高质量的抗体。制备流程 服务特色●免费分析抗原序列及抗原处理方式，利用专业的抗原设计软件设计抗原，结合文献，综合选择免疫原序列；●可制备多种高质量抗原，包括蛋白质抗原，多肽抗原及小分子抗原活化偶联；●采用自我研发新型佐剂免疫动物，可最大程度提高效价；●可提供5-10株重组抗体小样供客户筛选；●大样表达可提供50mg的兔单抗隆抗体。服务承诺1)客户进行内源性Western Blot或者IP过表达检测小样后能够检测到目的条带；2)若内源性Western Blot或者IP过表达检测无法满足实验需要，说明此抗体订单验证失败，则客户无需付此项目剩余尾款；3)间接ELISA检测抗血清效价，针对免疫原效价不低于1:160,000；4)客户有权随时了解服务项目进展情况，并对成果拥有全部所有权。交付结果1）纯化的免疫原小样一份（100ug左右）；2）四只兔子的抗血清（30ml/只）；3）5-10个B细胞的可变区测序报告；4）5-10个小样表达的重组抗体（0.1mg/个）； 5）大体积重组抗体生产（0.1-50mg有需要请备注）。其他服务（1）多克隆抗体制备服务，可提供小鼠、大鼠和兔等多种动物来源的多克隆抗体制备服务；（2）保证型鼠单克隆抗体制备服务 ，保证内源性IHC、WB、 IF、FC等检测结果；（3）中和单克隆抗体制备服务，拿到有中和作用的阳性细胞株、抗体；（4）修饰性抗体制备服务，可提供磷酸化，乙酰化，琥珀酰化等修饰性抗体制备，保证与非修饰性多肽的交叉反应<10%；（5）重组蛋白表达与纯化服务，大肠杆菌系统，提供蛋白质表达，及活性蛋白鉴定等；（6）ELISA试剂盒开发服务，从基因、蛋白到下游抗体配对，试剂盒开发，天然样本检测完整的试剂盒开发服务。武汉戴安生物项目经验非常丰富，可提供各类抗体定制技术服务，已为多家研究所和高校成功定制可应用于WB、IHC、IF、CO-IP等实验的科研用抗体，有需要请联系我们。

抗体测序服务介绍杂交瘤细胞在培养过程中，会出现染色体不稳定导致抗体基因丢失、细胞状态不好影响抗体产生，甚至细胞死亡的情况，造成严重损失。可以通过杂交瘤测序获得相应的抗体基因序列，将优秀的抗体基因长期保存，并用重组蛋白的方式来稳定获得抗体。杂交瘤测序也为抗体的进一步修饰及人源化操作等奠定了基础。我司提供完善的杂交瘤测序服务，使用专业的引物和测序方案，在经济成本和时间成本都合理的前提下，为客户提供快速准确的杂交瘤测序服务。我们针对所有常见的宿主物种都有相应的特异引物，可对轻链、重链或全长进行测序。并根据客户需求提供相应的基因克隆，可接荧光蛋白等标签修饰。如客户有相应需求，也可以提供相应的重组抗体表达，乃至后续的大规模生产制备服务。武汉戴安生物技术有限公司提供两种抗体测序服务1）抗体可变区测序服务2）抗体全长cDNA测序服务抗体可变区测序服务抗体全长cDNA测序服务服务特色●使用专业的简并引物设计（degenerate primer）和测序方案，优化成本，减少时间，为客户提供快速准确的抗体可变区域以及全长基因测序服务；●随机挑选10个以上的克隆测序，确保序列的准确性； ●我们承诺提供快速、完整、准确、高可靠性的测序结果，并保证客户具有相关的完全知识产权，保证服务项目内容的保密性；●可进行其它重组抗体相关服务，包括重组抗体表达，及抗体人源化等。我们承诺 1)  快速高效准确完整高可靠性；2)  客户具有完全知识产权与信息安全；3)  完全的测序结果；4)  完整详实的实验报告和鉴定/验证报告；5)  其他相关服务（可选）。公司介绍武汉戴安生物技术有限公司座落于武汉光谷生物城生物技术研究院，是一家由资深免疫学专家和海外留学人员创建的高科技生物技术企业。公司专注于体外诊断（IVD）试剂及其核心原料的研发生产及技术服务工作, 已成功建立了从IVD核心原料到试剂生产的研发生产路线，完成了原料开发-诊断试剂研发-诊断试剂放大生产的整个技术流程构建，拥有独立自主的抗原抗体的研发、放大生产技术平台及生化试剂大包装研发生产平台。公司拥有完善的蛋白质表达体系，抗体制备体系，研发人员拥有十余年从业经验，技术积累深厚，设备精良完善，在重组蛋白质表达纯化、天然蛋白质提取、抗体研发和生产方面达到行业顶尖水平，也为客户提供专业的抗体定制及相关技术服务，包括科研用多克隆抗体和单克隆抗体定制，药物阻断用抗体筛选，中和抗体制备等技术服务。我们秉承“精益求精，至善至美”的使命，追求“便捷，精确，真实”的客户体验，以创新推动产业发展，以实干满足市场需求。其他服务（1） 多克隆抗体制备服务，可提供小鼠、大鼠和兔等多种动物来源的多克隆抗体制备服务；（2）保证型鼠单克隆抗体制备服务 ，保证内源性IHC、WB、 IF、FC等检测结果；（3）中和单克隆抗体制备服务，拿到有中和作用的阳性细胞株、抗体；（4）修饰性抗体制备服务，可提供磷酸化，乙酰化，琥珀酰化等修饰性抗体制备，保证与非修饰性多肽的交叉反应<10%；（5）重组蛋白表达与纯化服务，大肠杆菌系统，提供蛋白质表达，及活性蛋白鉴定等；（6）ELISA试剂盒开发服务，从基因、蛋白到下游抗体配对，试剂盒开发，天然样本检测完整的试剂盒开发服务。武汉戴安生物项目经验非常丰富，可提供各类抗体定制技术服务，已为多家研究所和高校成功定制可应用于WB、IHC、IF、CO-IP等实验的科研用抗体，有需要请联系我们

1背景信息Flag-Tag（DYKDDDDK）， 常用于真核蛋白质重组表达标记。 FLAG标签（DYKDDDDK）融合蛋白纯化试剂盒， 主要成分是Anti-Flag亲和纯化凝胶（Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel），由高品质的Flag抗体与Sepharose 4B琼脂糖颗粒共价偶联制成，具有高载量（至少为1.2mg protein/ml凝胶），高特异性，性质稳定，可反复使用的特点，可用于Flag标签融合蛋白的亲和纯化。2性能指标应用范围： 可用于Met修饰的N端Flag融合蛋白（Met-Flag–Protein），N端Flag融合蛋白（Flag–Protein）和C端Flag融合蛋白（Protein-Flag）的亲和纯化。载量： 1ml Sepharose 4B琼脂糖颗粒，共价偶联8mg Anti-Flag 抗体，可结合至少1.2mg Flag融合蛋白。强度：重力柱纯化，可反复使用5次以上。保存方法： 在加入了50%甘油和0.2‰叠氮钠的PBS保存液后，预装纯化柱可于-20℃可保存1年。3试剂盒组成4注意事项（开箱前必读）本试剂盒冷藏条件下运输，如果暂时不用，请将纯化柱（空柱）取出，室温保存。亲和凝胶于-20℃保存；试剂盒及其它成分保存于 4℃。3×Flag peptide溶解方法：该多肽为轻质粉末，开盖前应离心。多肽本身为酸性，建议将40ul 10xPBS溶液加至1mg多肽粉末中，彻底溶解后，加入160ul双蒸水，制成5mg/ml储存液，-20℃保存。使用时用1xPBS稀释至需要的浓度。按需求浓度稀释至工作浓度。有文献显示，与传统的Glycine-HCl洗脱液相比，本试剂盒提供的pH3.0的Arginine-HCl做为洗脱液，可以减少蛋白质变性，延长抗体亲和纯化柱的使用寿命。客户也可以根据实际情况自行选用配制。5使用方法（所有步骤尽可能在冰上进行，以避免目标蛋白质降解。）细胞裂解液制备悬浮细胞和半贴壁细胞从细胞培养瓶上吹下来后放入离心管中，   1000rpm离心5分钟。贴壁细胞用细胞刮子轻轻从瓶壁上刮下来，放入离心管中1000rpm离心5分钟。预冷的PBS工作液重悬细胞，1000rpm离心3min，弃上清。重复一次。根据细胞的量加入相应体积的细胞裂解液， 反复吹打后冰上放置10-20min，让细胞充分裂解。用超声破碎仪将细胞裂解液超声，直至细胞裂解液透明，不再粘稠。冰上放置30min之后，12000rpm，4℃离心10min。取上清，冷冻保存。装柱及孵育温和重悬Anti-Flag亲和纯化凝胶，至均匀混合，用剪去末端的枪头吸取适量的凝胶至空纯化柱中。10ml（10倍柱体积）PBS清洗Anti-Flag亲和纯化柱。加入含有目标蛋白的真核细胞裂解液， 4℃旋转孵育过夜。根据蛋白质性质选择洗脱方法，具体可参见第5部分问题和建议5.1。3xFlag peptide洗脱液竞争洗脱用1xPBS配制3×Flag peptide洗脱液，终浓度为500μg/ml，也可根据具体情况自行调整工作浓度。加入2ml 3×Flag peptide洗脱液（10倍柱体积），轻柔混匀，浸泡0.5小时后，收集洗脱液，每次收集1ml。如有必要，再次加入2ml 3×Flag peptide洗脱液（10倍柱体积），重复洗脱一次。用紫外检测仪测定收集液, 合并收集液。SDS-PAGE鉴定蛋白质纯度及浓度，并按照需求处理和保存蛋白质。酸性洗脱液酸性洗脱5ml PBS（5倍柱体积）洗柱三次。预冷的5ml pH 5.0酸性预洗液（5倍柱体积）洗涤纯化柱，除去非特异性结合蛋白。预冷的10ml pH 3.0的酸性洗脱液（10倍柱体积）进行洗脱， 每次收集1ml, 收集管中预先放入中和液50μl。注意：酸性环境放置太久会缩短亲和纯化柱的使用寿命，应尽量缩短亲和纯化柱与酸性洗脱液的接触时间。用紫外检测仪测定收集峰, 合并收集峰。SDS-PAGE鉴定蛋白质纯度及浓度，并按照需求处理和保存蛋白质。纯化柱的清洗与再生（洗脱后须立即进行纯化柱的清洗与再生）10倍柱体积PBS清洗纯化柱。酸性洗脱液（pH3.0）洗涤纯化柱，每次三倍柱体积。中和液（pH8.0）洗涤柱子三次，每次三倍柱体积。检测流穿液pH，如为中性，则进行下一步；如仍为酸性，则重复4.5.2和4.5.3。用1xPBS（含50%甘油，0.2‰叠氮钠）清洗，再加入适量该保存溶液至填料中，保存在-20℃。6保存纯化产物加入50%甘油保存在-80度，用于后续功能性实验。   7问题与建议如何选择竞争性洗脱和酸性洗脱？3×Flag peptide洗脱液与蛋白质上的Flag标签竞争亲和纯化柱上的抗体，使蛋白质与抗体的结合被取代而脱离纯化柱，从而被洗脱下来。这种洗脱的特点有：洗脱条件温和，一般不会造成蛋白质变性；有利于亲和纯化柱的保存和反复使用。由于亲和吸附达到平衡比较慢，所以往往需要较长的时间和较大的洗脱体积。特异性强，可以进一步消除非特异性吸附的影响，从而得到较高的分辨率。基本上不会有anti-Flag的抗体被洗脱下来。酸性洗脱是通过改变环境pH，破坏抗原抗体的结合从而使蛋白质脱离纯化柱被洗脱下来，这种洗脱方式的特点有：成本低廉。纯化速度较快。酸性pH会造成部分蛋白质变性，引起目的蛋白质沉淀，降解或失活。有时会有少部分Anti-Flag抗体被洗脱，造成非特异性信号。反复使用酸性洗脱，会造成抗体脱落，也会破坏纯化柱的理化性质，减少纯化柱的反复使用次数。常见的蛋白质的后续处理方法有哪些？透析与超滤透析法是利用半膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心，强使水和其他小的溶质分子通过半透膜而蛋白留在超滤管内。两者都可以达到换液的目的。使用时需注意选择正确分子量的透析袋和超滤管。过滤除菌可采用微孔滤膜滤器操作，让蛋白质溶液通过0.22um滤膜，即可达到除菌的目的。蛋白质定量鉴定浓度。SDS-PAGE鉴定纯度。如何选择细胞/组织裂解液？本试剂盒提供的细胞裂解液成分如下：使用前可加入1%PMSF和0.5%原钒酸钠, 或其他蛋白酶抑制剂，避免蛋白质降解。客户可根据目的蛋白的性质和后继用途，自行配制细胞裂解液及选择是否加入蛋白酶抑制剂。 使用中的常见问题及解决方案

武汉戴安生物技术有限公司成立于2015年，位于武汉光谷生物城生物技术研究院，是一家由资深免疫学专家和海外留学人员创建的高科技生物技术企业。公司专注于诊断试剂及其核心原料的研发生产及技术服务工作。公司拥有完善的蛋白质表达体系，抗体制备体系，诊断试剂研发体系，研发人员拥有十余年从业经验，技术积累深厚，设备精良完善，在重组蛋白质表达纯化、天然蛋白质提取、抗体研发和生产方面达到行业顶尖水平，已建立了从诊断试剂抗原抗体原料开发，到诊断试剂制备的研发生产路线，拥有诊断用抗原抗体的研发及放大生产技术平台，生化试剂大包装研发生产平台，核心产品包括SAA，AFP，PCT，铁蛋白等项目的抗体、校准品和生化试剂。公司也为客户提供专业的抗体定制及相关技术服务，包括科研用多克隆抗体和单克隆抗体定制，药物阻断用抗体筛选，中和抗体制备等技术服务。中和抗体定制服务周期约3-5个月  中和抗体是一种特殊的抗体，可与细菌毒素、病原体(如病毒)及其产物特异性结合并发挥中和作用。现在也有人将能够与特定蛋白质结合，并阻断其功能的抗体称为中和抗体。 以病毒感染为例，病毒入侵细胞时需要依赖自身表达的特定分子（配体）与细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。病原微生物侵入机体时会产生相应的抗体，其中有一部分抗体，能够与病毒表面的抗原结合，并直接阻止病毒黏附靶细胞受体，防止病毒侵入细胞。这部分抗体就是中和抗体。 中和抗体与普通的结合抗体相比，有很大区别。在病毒感染过程中，大多数抗体是普通的结合抗体，这些抗体通过与抗原结合，向T-淋巴细胞发出该抗原已被锁定的信号，激发细胞免疫反应，并进摧毁一步病毒。而中和抗体与病毒结合后，可以直接阻断病毒的进一步感染，这一功能不需要通过激活T-淋巴细胞系统，就可以完成。由于具备以上特性，中和抗体在疫苗和抗体药研发中，起着非常重要的作用。近年来，以PD1/PDL1抗体为代表，针对蛋白质特殊功能的中和抗体也受到了广泛关注。 中和抗体的检测方法：病原体的中和抗体一般用感染抑制实验来确定中和抗体的功能。例如，病毒中和抗体最常用的检测方法是噬斑减少或者噬斑抑制实验。也可以用功能抑制实验来确定某蛋白质的中和抗体功能。 中和抗体制备方法：有多种技术应用于中和抗体制备，包括传统的免疫技术，杂交瘤技术，噬菌体展示，抗体人源化等。病原体的中和抗体，通常是用病原体做为抗原感染动物产生的。为了使研究更加深入清晰，具有可重复性，更多科学家倾向于制备单克隆抗体做为中和抗体，也为下一步抗体药物制备打好基础。在这种情况下，制备中和抗体成功的的前提之一是需要制备高效价高特异性的抗血清。成功制备案例 建立有效的抗体筛选机制，也在中和抗体制备过程中起着重要作用。武汉戴安生物技术有限公司采用自制特殊佐剂, 特殊免疫流程, 专用于中和抗体制备, 效价高于国际通用品牌佐剂的10-100倍, 特别适用于病毒, 支原体等病原体的中和抗体制备。有需要请联系我们！

6xHIS-Tag mouse mAb Cat#: 2088Synonyms:HHHHHHAttribute:Mouse   Monoclonal Antibody Isotype:IgG1Purity:Protein A/G  Affinity PurificationApplication:ELISA, WB, IPReactivity：Human,Mouse,Rat,Zebra   fishImmunogen：Peptide  HHHHHH     Buffer：PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol,  pH 7.2Storage:Store at -20℃.   Do not aliquotRecommended Dilution:WB: 1:2000-5000IP: 1:5000-10000 Background：The 6xHis   tag, also known as polyhistidine tag, His6 tag and/or hexa histidine tag, is   an amino acid motif consisting of at least 6 histidine residues fused to the   carboxyl (C-) or amino (N-) terminus of a target protein in transfected   cells.  It is one of the simplest and most   widely used purification tags in the world.