动物:SD大鼠造模试剂:手术造模方法:大鼠采用3.5%水合氯醛(1ml/100g)腹腔注射麻醉,将大鼠固定于大鼠固定架上,剪掉右后肢鼠毛,碘伏消毒二次,铺孔巾,暴露右后肢,再消毒2次,于右侧后肢股后外侧处行纵行长约6-8mm切口,暴露股二头肌,经肌间钝性分离,游离出粗大的坐骨神经,距坐骨结节6mm处(定位),用小号持针器垂直钳夹坐骨神经,满扣2扣(定量),持续钳夹10秒,重复3次,每次间隔10秒(定时),钳夹操作由一人完成,分层缝合肌肉及皮肤,灌胃阿莫西林(100mg/100g)和腹腔注射庆大霉素(0.08万单位/100g)预防感染,连续3天。
动物:SD大鼠造模试剂:手术造模方法:造模前禁食不禁水24h称重,以10%水合氯醛腹腔注射麻醉。麻醉大鼠仰卧固定于手术台上,常规备皮消毒后,颈部正中切口,暴露右侧颈总动脉,分离出颈内动脉、颈外动脉、结扎游离颈外动脉主干,分离颈内动脉主干至翼腭动脉,并在其起始部置一动脉夹。颈外动脉残端剪0.2mm小口,将栓线插入。轻推尼龙线尾端经颈总动脉分叉部沿颈内动脉入颅,至大脑中动脉。尼龙线插入深度由颈总动脉交叉部计18mm,缝合切口,栓塞30min后勿须再次麻醉,室温下禁食不禁水12h。在手术结束麻醉清醒后,观察神经症状,只有神经功能障碍在一级以上的大鼠才能保留下来。模型构建24h后TTC染色确定模型是否构建成功。
动物:大鼠造模试剂:阳离子牛血清白蛋白cationic bovine serum albumin,C-BSA造模方法:试剂准备:(1)将60mg的C-BSA用30ml的PBS充分溶解,制成2mg/ml的C-BSA溶液,再与等体积的弗氏不完全佐剂充分混匀为乳白色悬液,使乳化完全。(2)称取C-BSA 1625mg,与650mlPBS充分混匀,制成2.5mg/mlC-BSA溶液。(3)将C-BSA冷冻干燥后测等电点,使PI=10(4)造模前将大鼠放入代谢笼中,每笼一只,收取大鼠24h尿液,进行24h尿蛋白定量测定。先取1ml(1)中乳白色悬液,分别1次性注射于每只大鼠的双侧腋下、腹股沟处作多点皮下注射,观察1周,之后每只大鼠隔日尾静脉注射1ml(2)中2.5mg/mlC-BSA4mg,共3周。当造模大鼠出现大量蛋白尿,肾小球系膜细胞、系膜基质增加,肾小管上皮细胞明显水肿、部分小管腔内可见蛋白管型,并可见间质炎细胞浸润,判断造模成功