要明确与特定启动子结合的转录因子(TFs)，或明确是通过上游的启动子调控特定基因表达的转录因子，常用二种方法。一种，启动子内电识别的转录因子DNA结合位点进行凝胶迁移试验。第二种，除去或移除某个转录因子的结合位点，以测定与启动子连接的报告体的表达是增加还是减少，通常，要构建一系列启动子缺失或突变的报告体，因为一个或一些转录因子在启动子上有多个结合位点。美国Signosis 公司开发了一种快速方法，通过一种变换的TF检测微孔板阵列方法便于启动子的定性，这种方法将检测48种TF是否与启动子结合。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的结合启动子的TF微孔板阵列检测试剂，具有下列优势： 　　· 多重复合---单一一次试验可明确48种TF与特定启动子的结合 　　· 步骤简单---探针孵育、柱离心、板杂交和HRP检测 　　B. 原理 　　启动子的TF微孔板阵列检测试剂是Signosis转录因子活性检测微孔板阵列试剂I的竞争法。在转录因子活性检测微孔板阵列试剂I，如果48种靶转录因子存在于待测样品中，就会形成48种类型的复合物，每种转录因子带有相应的生物素标记的oligo(与凝胶迁移试验中的复合物一样)，用柱离心从复合物中分离未结合的游离的生物素标记的oligo，柱洗脱转录因子结合的oligo，用于板杂交，杂交上的DNA有生物素标记oligo，捕获的oligo用链酶亲和素和化学发光底物检测。如果不存在转录因子，就不能形成复合物，在随后的生物素标记的oligo中检测不到TF。在结合启动子的TF微孔板阵列检测试剂中，含有感兴趣的启动子PCR片段，与一套48种生物素标记的oligo混合，48种oligo与待测标本中的48种TF对应。如果DNA片段含有TF结合序列，就与生物素标记的oligo竞争与样本中的TF结合，不形成或少形成复合物，也就检测不到或少检测到TF，通过竞争质粒或DNA片段的存在与否，启动子结合的TF可被识别。

　　干细胞因子(SCF)是多种类型细胞的生长因子，在神经胶质细胞内和各种脑损伤时表达。 导致的脑损伤以及脑细胞介导的SCF表达，通过营造支持血管形成的环境，造成肿生长。 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格。 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对人SCF的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. 　　B. 原理： 　　SCF试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人SCF抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗人SCF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测， 待测样品SCF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。SCF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　T细胞是一类在免疫反应中起着重要作用的淋巴细胞。T细胞受体是一种合成体蛋白，参与T细胞抗原应答时的激活，这种激活需要受体合成体亚单位和其它膜分子，使细胞外受配体反应与下游的信令通道结合，如肌酸磷酸的增加，细胞外钙水平和蛋白磷酸化增高。TCR激活促成许多信号级联反应，通过调节细胞因子的产生、细胞生存、增殖和分化，最终确定细胞的命运。美国Signosis公司人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种相关基因。 　　A. 优点： 　　美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点： 　　·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 　　·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 　　·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 　　B. 原理： 　　美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法，该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似，加入生物素-dUTP后，总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸，将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物，cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。

　　神经增长因子(NGF)是特定靶神经元(神经细胞)分化和存续的小分泌蛋白。 NGF最近被认为是新的血管生成分子，对心血管系统和内皮细胞有各种作用。 NGF通过自分泌和旁分泌机制对内皮细胞进行支持、存续和功能化。 bNGF结构上与BDNF、NT-3和NT-4有关。 NGF通过其受体bNGFR发信号，在感觉和交感神经系统的发育和维持上起重要作用，是强的神经营养性因子。 bNGF也作为B淋巴细胞的成长和分化因素，提高B细胞生存期。 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格。 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对人b-NGF的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. 　　B. 原理： 　　b-NGF试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人b-NGF抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗人b-NGF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测， 待测样品b-NGF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。b-NGF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　干细胞因子(SCF)是多种类型细胞的生长因子，在神经胶质瘤细胞内和各种脑损伤时表达。肿导致的脑损伤以及脑细胞介导的SCF表达，通过营造支持血管形成和肿进展的环境。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对小鼠SCF的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　小鼠SCF试剂为固相酶免法。方法采用兔抗鼠SCF抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗鼠SCF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测，待测样品SCF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。SCF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450nm处测定吸光值进行定量。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对小鼠SCF的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　小鼠SCF试剂为固相酶免法。方法采用兔抗鼠SCF抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗鼠SCF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测，待测样品SCF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。SCF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450nm处测定吸光值进行定量。

　　转录因子(TF)的转录活性常常是通过报告载体测定的，载体含有TF的顺式因子(DNA结合序列)和荧光素酶样的报告基因。报告基因导入细胞，激活的TF与顺式因子结合，介导报告基因的启动。这种启动可以通过生化分析报告基因的产物进行测定。然而这是一种单项测定，一次测一个TF。由于细胞的变化会导致多种TF的激活，检测这些TF就需要多次转染和生化测定。此外，由于被导入到不同的细胞培养孔，还需要标准化规范转染。美国Signosis 公司基于自有专利开发一种多重转录因子(TF)报告基因实时PCR检测试剂以同时检测多种TF，检测试剂中所选24种TF代表了大多重要的信号转导通路。在多重转录因子报告基因实时PCR检测试剂I中，24种TF报告载体混合物是一次性转染入细胞。24种TF活性用实时PCR SYBR green同时检测，采用试剂盒内自带的CLTM细胞裂解液，直接用细胞裂解物，勿需进行RNA制备。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有专利技术研发的多重转录因子报告基因实时PCR检测试剂，具有下列优势： 　　· 基于细胞的方法---基于细胞的方法检测TF 的活性 　　· 多重复合---24种TF活性可一次转染，同时检测 　　· 无需RNA制备---细胞裂解物可直接用于cDNA合成 　　· 定量比较---二个或以上样本可同时用实时PCR定量分析 　　B. 原理 　　多重转录因子报告基因实时PCR检测试剂I是一种实时方法，可同时定量检测24种TF活性。该技术中，构建一系列报告载体，每一种含有一个顺序因子和针对一种特异TF的载体标识序列。当载体做为文库加入96孔板某一孔，TF的激活将使其与相应的载体结合，介导标示序列的表达。细胞裂解物制备后，转录成cDNA，再进行实时PCR，TF的差异通过二个样本的比较进行区别。

　　IL1a和IL-1ß 是介导炎症和免疫调节作用的强激动剂。 二者由巨噬细胞、单核细胞和树状突细胞产生，是针对感染后炎症反应的重要部分。 它们增加内皮细胞黏附因子的表达，转运白细胞到感染部位。周边组织产生IL-1 ß与痛觉过敏(对疼痛感增加)有关，痛觉过敏与发热相关。 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格。 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对鼠IL-1ß的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　鼠IL-1ß试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗鼠IL-1ß抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗鼠IL-1ß抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测， 待测样品鼠IL-1ß夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。鼠IL-1ß的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　miRNAs参与调解各种生物过程，如细胞死亡和细胞增殖。miRNA可以做为原癌基因和肿瘤抑制基因，在肿瘤形成中起着重要作用。miRNAs表达水平的变化是与其相应的蛋白编码的靶基因功能不正常有关，其中许多参与癌症的发生和发展。例如，BCL2原癌基因是miR-15a和miR-16的靶向基因，PTEN肿瘤抑制物是miR-21、HOXD10是miR-10b、Pak是miR-7、MYOD1和ER是miR-206、Her2是miR-125a的靶向基因。美国Signosis研发的肿瘤miRNA微孔板检测试剂I是定量检测7种有名的癌相关miRNAs的表达，分别是miR-15a、miR-16、miR-21、miR-21、miR-10b、miR-7、miR-125a和miR-206。RNU48用于试剂盒的标准化。 　　A.优点： 　　美国Signosis基于其自有专利技术的miRNA微孔板检测试剂具有下列优点： 　　·操作简单---做miRNA试验象做ELISA试验，无需用酶转换miRNA成cDNA，检测步骤只是孵育和洗涤。 　　·灵敏度高---较miRNA Northern blotting分析敏感100倍。 　　·分辨力强---在分辨同源miRNA 时，较Northern blot有更高的分辨力。 　　·差别定量---二个或二个以上样本的miRNA簇表达的差异可定量分析。 　　B.原理： 　　基于自有专利miRNA微孔板检测中，一个miRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接，一个连接oligo与捕获oligo和待测的miRNA部分杂交，另一个连接oligo与检测oligo和待测的miRNA另一部分杂交，杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固者在微孔板上，再由辣根酶标记链酶亲和素和发光底物检测，这种杂交体结构对miRNA分子序列非常敏感，一个核苷酸的差异即会阻止杂交体的形成，从而可分辨同源miRNA，而Northern blot则很难鉴别同源miRNA，此外该方法的敏感性较Northern blot高。捕获的miRNAs进一步用辣根酶标记的亲和素检测，发光信号的强度用发光仪检测，miRNAs表达水平直接与发光度值成正比。

　　干细胞是重要细胞，其能够自我更新或者分化成多种类型的细胞，这种能力由细胞信号传导和转录调控所控制，因此转录调控在细胞识别和功能实现过程中起决定作用。干细胞逐步成熟成为终末分化细胞，需要由重要的转录因子适时的激活级联转录程序，多种转录因子和靶基因广泛报告与干细胞的自我更新和多能性有关，包括EGR1, OCT4, FOXD3, FOXO, Nanog, SOX2, SOX18, ETS, GLI, KLF4, MEF2, Myc, RNUX1, Pax6, TCF/LEF 和GATA。分析这些TF的活性可以为干细胞的研究和应用提供有价值的线索。美国Signosis 公司开发一种干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂，以同时分析哺乳动物样本中16种干细胞特异的TF，该方法可以用1000-10000个细胞的全细胞裂解物进行。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有技术研发的干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂，具有下列优势： 　　· 多重分析---一次分析可以检测16种干细胞相关的TF 　　· 定量比较---二个样本的差异可以定量分析和比较。 　　· 步骤简单---探针温育、柱分离、板杂交和HRP检测 　　· 无需贵重仪器---无需如luminex那样的贵重仪器 　　B. 原理 　　干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂用于同时检测多种TF活性。该技术中，基于TF DNA结合位点的一致性序列，制备一系列生物素标记的探针。当探针混合物与核提取物一起温育时，每个探针寻找相应的TF，形成TF/探针复合物，通过柱离心纯化可以很容易与游离探针分开。结合的探针从混合物中分离出来，通过板杂交分析。板孔中预包被上与探针互补的特异序列，捕获的DNA探针进一步用链酶亲和素-HRP检测，化学发光检测仪测定发光强度(RLUs)。

　　表皮生长因子(EGF)是许多细胞强的有丝分裂原，例如成纤维细胞。 EGF刺激胚胎细胞的增殖，有些细胞系的增殖显示受EGF抑制。 EGF作为一些类型细胞的分化因子进行活动。 在一定程度上，EGF也增加血管形成，因为它是内皮细胞的有丝分裂原。 EGF对内皮细胞的有丝分裂活动可以由凝血酶增强。 EGF是成纤维细胞和上皮细胞的强趋化物。 单独EGF或与其它细胞因子组合是介导创伤恢复过程的一个重要因素。 　　(详见：http://www.zhongzhibio.com/kysj/521.htm) 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格。 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对人EGF的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　EGF试剂为固相酶免法。 方法采用鼠抗人EGF抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的羊抗人EGF抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测， 待测样品EGF夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。EGF的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。