石榴皮鞣素操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。石榴皮鞣素标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。石榴皮鞣素试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法    1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。    3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。    4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。    5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。    6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。 温馨提示：不可用于临床治疗。 

牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒ELISA试剂盒常见问题解析：1.加样量不一致？解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒样品测定1． 移取xx微升 去干扰液（Reagent C）到上述待测样品或标准样品管里，混匀2． 加入xx微升 反应液（Reagent D）3． 加入xx微升 显色液（Reagent E），混匀4． 室温下孵育20分钟5． 放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g6． 移取1毫升上清液到比色皿7． 即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数牛白介素4(IL-4) ELISA 试剂盒标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PB（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

鸡前动力蛋白2(PK2) ELISA 试剂盒样品测定1． 移取xx微升 去干扰液（Reagent C）到上述待测样品或标准样品管里，混匀2． 加入xx微升 反应液（Reagent D）3． 加入xx微升 显色液（Reagent E），混匀4． 室温下孵育20分钟5． 放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g6． 移取1毫升上清液到比色皿7． 即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数鸡前动力蛋白2(PK2) ELISA 试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。   鸡前动力蛋白2(PK2) ELISA 试剂盒Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法    1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。    3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。    4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。    5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。    6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。

鸡肌球蛋白轻链9(MYL9) ELISA 试剂盒产品包装：盒装性状：瓶装液体规格：96T/48T保存条件：2-8℃保存期限：6个月运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者生物冰袋低温运输。上海笃玛生物科技有限公司现货国产/进口常温保存低温保存咨询客服待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等ELISA人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。鸡肌球蛋白轻链9(MYL9) ELISA 试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。公司秉承价格最低，品质第一，客户之上的原则努力将优秀的生命科学产品提供给广大的科研工作者。鸡肌球蛋白轻链9(MYL9) ELISA 试剂盒操作步骤1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒笃玛生物试剂盒操作注意事项：1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。豚鼠组织蛋白酶D(CTSD) ELISA 试剂盒ELISA 实验步骤：1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。5.显色：TMB显色A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液：2N硫酸A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。6.450nm 波长测OD值

绵羊白介素12(IL-12) ELISA 试剂盒试剂盒组成名称         96孔配置      48孔配置    备注微孔酶标板 12孔×8条     12孔×4条     无标准品         0.3mL*6管     0.3mL*6管     无样本稀释液 6mL       3mL     无检测抗体-HRP 10mL       5mL     无20×洗涤缓冲液 25mL       15mL     按说明书进行稀释底物A         6mL       3mL     无底物B         6mL       3mL     无终止液         6mL       3mL     无封板膜         2张       2张     无说明书         1份       1份     无自封袋         1个       1个     无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120 pg/mL绵羊白介素12(IL-12) ELISA 试剂盒酶联免疫吸附剂测定可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。绵羊白介素12(IL-12) ELISA 试剂盒笃玛生物试剂盒操作注意事项：1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒产品包装：盒装性状：瓶装液体规格：96T/48T保存条件：2-8℃保存期限：6个月运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者生物冰袋低温运输。上海笃玛生物科技有限公司现货国产/进口常温保存低温保存咨询客服待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等ELISA人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒试剂盒性能1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.  灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.  有效期：6个月绵羊P选择素(SELP) ELISA 试剂盒ELISA的样本实验准备在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。液体类标本:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。3. 尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。5. 培养细胞    检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6. 组织标本    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。                                     笃玛代测服务：技术服务内容： 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。寄标本时需注明以下情况：1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；4、联系方式；5、实验后标本是否寄回。

 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒实验原理   试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被生长因子受体结合蛋白14(Grb14)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长因子受体结合蛋白14(Grb14)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。保存条件及有效期本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中生长因子受体结合蛋白14(Grb14)的含量。有效期：6个月保存条件：2-8℃鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒一、标本的采集及保存 1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒二、标本的稀释原则   首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 1.标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。2.生物素标记抗体的稀释原则： 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。3.辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则： 临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 操作步骤 实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒三、操作步骤1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。 3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。 4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。 5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。 6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒四、试剂盒使用小技巧1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是**加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。 洗板方法 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 计算 以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒五、技术小提示1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。 3. 一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。 5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。 6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。 7. 底物请避光保存。 8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒六、注意事项1.收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本， 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。2.标本2 -8 ℃可保存48 小时，-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。3.部分激素类标本需添加抑肽酶。 4.计算方法：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒七、试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15% 鸡生长因子受体结合蛋白14(Grb14)ELISA试剂盒八、保存条件及有效期1.试剂盒保存：2-8℃。 2．有效期：6个

羊抗马IgG血清操作步骤试管法（改良 Mayer 法）1、致敏羊红细胞： 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（ 1:2000），混匀，置 37℃水浴 30min。2、稀释血清：待测血清 0.2ml，加应用液 3.8ml，稀释度为 1:20。3、配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水，混匀。                   50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。4、按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置 37℃水浴 30min， 第 10 管为非溶血对照：补体 CH50 测定试管法 5、结果测定：取出试管， 2000r/min 离心 10min，对照管应不溶血。肉眼比色，选与 50%溶血标准管相近二管，再用分光光度计测（波长 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，确定与标准管最接近者为终点管，然后按下公式计算 CH50 值：          血清补体 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀释度。如第 5 管为终点管，测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。羊抗马IgG血清胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体等很少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要新生牛和小牛要好。血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。羊抗马IgG血清相关热卖血清： 品牌：Serana 南美源胎牛血清（货号：S-FBS-SA-015）         规格：500ML                        品牌：BOVOGEN南美源胎牛血清（货号：SFBS）        规格：500ML                        品牌：BOVOGEN澳洲源胎牛血清（货号：SFBS）        规格：500ML                        品牌：Hyclone南美源胎牛血清（货号：SV30087.01）  规格：100ML                        品牌: Hyclone南美源胎牛血清（货号：SV30087.02）  规格：500ML                        品牌：Hyclone澳洲源胎牛血清（货号：SH30084.03）  规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30070.03）  规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30070.03E） 规格：500ML                        品牌：Hyclone美国源胎牛血清（货号：SH30068.03）  规格：500ML                        品牌：Gibco南美源胎牛血清（货号：10270106）      规格：500ML                        品牌：Gibco巴西源胎牛血清（货号：12657029）      规格：500ML                        品牌：Gibco南美源胎牛血清（货号：C20270）        规格：500ML                        品牌：Gibco墨西哥源胎牛血清（货号：10437028）    规格：500ML                        品牌：Gibco美国源胎牛血清（货号：16000044）      规格：500ML                        品牌：Gibco澳洲源胎牛血清（货号：160099133）     规格：100ML                        品牌：Gibco澳洲源胎牛血清（货号：160099141）     规格：500ML

羊抗人C3D血清胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体等很少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要新生牛和小牛比要好。血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。羊抗人C3D血清10270-106胎牛血清   血清的主要成分：血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。10270-106胎牛血清   其他血清产品推荐：Gibco  16000-044胎牛血清(澳洲）优级胎牛血清最受欢迎的FBS产品。高品质，高价值，适用于更娇贵的细胞培养和部分干细胞的培养。羊抗人C3D血清免责声明1.   试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。羊抗人C3D血清其他产品 DM50071无菌脱纤维绵羊血100ml上海500mlDM50072无菌脱纤维马血100ml上海500mlDM50073无菌脱纤维兔血100ml上海500mlDM50074无菌脱纤维牛血100ml上海500mlDM50075枸橼酸纳抗凝羊血100ml上海500mlDM50076草酸钾抗凝羊血100ml上海500mlDM50077EDTA抗凝羊血100ml上海500mlDM50078肝素钠抗凝羊血100ml上海500mlDM50079枸橼酸纳抗凝马血100ml上海500mlDM50080草酸钾抗凝马血100ml上海500mlDM50081EDTA抗凝马血100ml上海500mlDM50082肝素钠抗凝马血100ml上海500mlDM50083枸橼酸纳抗凝兔血100ml上海500mlDM50084草酸钾抗凝兔血100ml上海500mlDM50085EDTA抗凝兔血100ml上海500mlDM50086肝素钠抗凝兔血100ml上海500mlDM50087枸橼酸纳抗凝牛血100ml上海500mlDM50088草酸钾抗凝牛血100ml上海500mlDM50089EDTA抗凝牛血100ml上海500mlDM50090肝素钠抗凝牛血100ml上海500ml