实验原理miRNA通过碱基配对结合到靶mRNA的3’UTR区，抑制靶基因的翻译或对靶基因mRNA的降解达到调控基因表达的目的。将靶mRNA的3’UTR区构建至萤火虫荧光素酶报告基因的3’端，与miRNA表达载体及海肾荧光素酶报告基因载体共转染细胞，先后加入两种底物荧光素，通过对荧光素酶报告基因的表达检测确认miRNA对靶基因的调控效果。实验流程

ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务技术流程1、把抗原或抗体包被在固相载体上2、加入受检标本反应3、加入酶标抗原或抗体4、加入底物催化酶显色5、加入终止液终止显色反应6、通过比色进行抗原或抗体的定性定量分析客户须知a.液体类标本（细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等）；b.样本量：每个样本收集体积=120ul*检测指标数；c.样本保存：请尽早检测，2-8℃保存一天；需更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集样本，请将样本及时分装标号后，置-20℃或-70℃保存；d.请提前告诉我们：您样本的种属（人、大鼠、小鼠、兔、猪等）、样本数量、待测指标。报告内容及标准a.ELISA标准曲线；b.详细的实验步骤；c.完整的实验报告（试剂耗材，实验方法，实验结果及结果说明）。收费标准及服务周期收费标准及服务周期因根据客户提供的样品不同而有所改变，详细请跟客服专员联系或参考所签署的合作合同。质量保证：适合检测包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织匀浆，细胞裂解液等标本灵敏度极高。

体外定点突变技术通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需变化，包括碱基的添加、删除、点突变等。此技术能迅速、高效的提高DNA所表1  基因定点突变体外定点突变技术通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需变化，包括碱基的添加、删除、点突变等。此技术能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是实验室中改造、优化基因常用的手段，也是研究蛋白质结构和功能之间复杂关系的有力工具。可根据不同的研究目的，为您量身定做不同的实验方案。1基因定点突变服务特色a.  可对任何位置的位点进行突变。b.  可对含有重复序列或高GC序列进行突变。  提供结果a.  高纯度质粒，总量约2μgb.  含有重组质粒的菌液c.  测序原始图谱和序列d.  实验报告（实验流程、质控点）2  PCR定点突变实验原理PCR定点突变是根据突变方案设计合成覆盖突变位点的双向引物，通过PCR向目的DNA片段中引入所需的变化，如碱基的插入、删除、替换等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。实验流程

实验原理基因的化学合成即人工合成寡核甘酸片段，通过PCR拼接的方法，获得所需要的基因表达序列或者启动子等功能性元件片段。基因化学合成使合成任何基因序列成为可能。实验流程

实验原理与化学合成的siRNA和shRNA质粒载体相比，利用慢病毒或腺病毒表达shRNA，一方面可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞，提高shRNA导入细胞的效率，另一方面病毒介导可延长RNAi的时间，尤其慢病毒感染后可以整合到宿主细胞基因组，进行稳转筛选。实验流程

实验原理miRNA是在真核生物中发现的具有调控功能的内源性非编码RNA，大小约20~25个核苷酸。我们根据成熟miRNA序列信息，合成含有茎环结构的前体miRNA连接至含侧翼序列的表达载体中，将其转染/病毒包装感染进入细胞后，由II型启动子（CMV）启动表达，经核酸酶的剪切加工，组装RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。实验流程

实验原理继植物中发现基因沉默现象后，动物细胞中的双链RNA诱导的基因沉默现象也被阐明，并于2006年获得诺贝尔医学奖的肯定，足以说明RNAi技术在医学领域即将发挥的开创性作用。siRNA（Small interfering RNA)是21-25核苷酸的小分子RNA，由Dicer酶加工双链RNA而成。siRNA与体内多种酶类结合形成RNA诱导的沉默复合物（RISC），从而激发与之互补的目标mRNA的降解。天然的RNAi现象存在于包括人类在内的动植物体内，在调节基因表达和预防病毒感染方面起到重要作用。实验流程

简介：单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。实验步骤：1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性4. 抗体亚类鉴定5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务单抗制备标准流程：抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。客户需提供的材料及信息:a.客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白b.如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%结果提供：实验报告 免疫前血清（20μl） 免疫后血清（20μl）抗体上清（至少3株,1ml/株） 杂交瘤细胞（3株） 抗体亚型如需要纯化的客户增加如下结果：纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg） 免疫效价 抗体亲和力常数相关说明：A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。B、客户需要承诺外的细胞株。（联系我们老师）C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化。（联系我们老师）D、如客户需要非IgG类的其他细胞株。（联系我们老师）

短串联重复序列（short tandem repeat，STR），它广泛并均匀地存在于真核生物基因组中，一般由一个长2～6bp的核心序列经多次串联重复排列而成，重复次数大多在10～60次之间。个体间核心序列的重复次数呈高度变异性，构成了STR的遗传多态性。由于STR具有分布广泛均匀、多态性丰富、信息量大、检测简便等优点，已广泛应用于遗传图谱绘制、基因定位、法医鉴定、遗传病诊断等诸多领域。瑞金特生物可为您提供特定区域扫描、人致病基因定位（全基因组扫描）两种STR分型检测服务。特定区域扫描瑞金特生物可根据客户指定的染色体区域寻找微卫星标记，进行定点扫描技术路线优势：a.  可以提供荧光引物的合成。b.  实验周期短：正常情况下，3~4天就可以出结果。c.  结题报告数据明显，通过表格和峰图可以清楚的看到片段大小、丰度、纯合杂合等分型信息。送样要求a.  送样要求，PCR产物或基因组DNA：浓度≥50ng/μl，总体积≥20μl；新鲜组织样品：总量≥100mg的新鲜组织样品或1～2ml血液样品；b.   送样时，请注意避光保存，同时在订单上标注好是STR样本；c.  我们默认使用的内参为ROX500和LIZ500，如需使用其他内参，请自行提供；d.  建议使用Fam、Hex、Tamra三种荧光标记；为尽量避免多种荧光信号的相互干扰，不建议同管检测使用的荧光多于2种；多种荧光同管检测，PCR产物大小需相差50bp以上；常见问题（1）你们是怎么区分出我送的未知荧光呢？答：我们使用ROX500作为红色内标时，可以鉴别出蓝色荧光和绿色荧光；LIZ500作为橙色内标时，四种荧光都可以鉴别的出来。（2）STR 检测用的仪器是什么？名字与型号，厂家， 最多能测多少个 bp？答：我们使用的仪器是 ABI3730XL Analyzer (美国），最多能测 1500bp。（3）上样量（分子量内标、 甲酰胺及 PCR 产物各需要多少）？答：先对 PCR 产物进行纯化，随后取 1ulPCR 产物和 10ul 的内标[加入1000 ul HIDI 和5ul ROX500/LIZ500，震荡、混匀（ 96 个样品用量）]进行上样。（4）公司能否提供 Genemapper  软件？答：这个软件是正版软件，不能随意安装，不便提供。另外老师您可以在发送给您结果的邮件中下载分析软件 Genemarker（在英文操作环境下进行）。（5）其中 Allele， Size， Height， Peak Area, Data Point 分别代表什么？如何解释？答：Allele ： Displays the label of the allele according to the Label settings of the analysis methodSize ： Displays the calculated size (in bp) of the associated peak.Height ： Displays the height (in RFU) of the associated peak.Peak Area ： Displays the calculated area underneath the associated peak.Data Point ：Displays the data point that defines the center of the associated peak in the sample data

实验原理继植物中发现基因沉默现象后，动物细胞中的双链RNA诱导的基因沉默现象也被阐明，并于2006年获得诺贝尔医学奖的肯定，足以说明RNAi技术在医学领域即将发挥的开创性作用。siRNA（Small interfering RNA)是21-25核苷酸的小分子RNA，由Dicer酶加工双链RNA而成。siRNA与体内多种酶类结合形成RNA诱导的沉默复合物（RISC），从而激发与之互补的目标mRNA的降解。天然的RNAi现象存在于包括人类在内的动植物体内，在调节基因表达和预防病毒感染方面起到重要作用。实验流程