多肽类药物质量研究（附USP合成多肽API的质量属性及杂质控制策略指南中文版下载）

一、多肽药物质量研究

自1920年发现胰岛素以来，多肽疗法越来越受到关注。1953年人工合成了第一个有生物活性的多肽。近年来多肽类药物的发展越来越受到医药界的关注，其具有毒副作用低，用量少，生物活性强，疗效好等特点，多肽药物已经广泛应用到心血管疾病、中枢神经疾病、呼吸、抗肿瘤与免疫调节以及抗感染等领域。随着时间的推移多肽上市种类越来越多，疾病覆盖面越来越广，因此多肽质量研究受到越来越多的重视。

本文从以下几个方面对药物肽质量研究做一下探讨：

多肽需要对起始物料、粗肽、成品进行质量研究，根据需要增加过程控制，这里重点放在成品的质量研究上。

1.1.有关物质、异构体

首先进行杂质谱分析，按照指导原则对工艺形进行分析成杂质谱，尽可能备全，多肽杂质往往要几十上百甚至更多，方法学研究前将杂质确定好备全，否则会出现一边研究一边增加杂质的情况，会成倍增加工作量。化学合成，可以参考工艺，重点放在缺失肽、插入肽、错结肽、差向肽 、氧化肽、聚合物、Asp/Asn 相关等杂质上；生物合成多肽重点考虑代谢流杂质，包括氨基酸缺失、氨基酸插入、保护基残留、氧化/还原、非对映异构体、侧链修饰、末端修饰和聚合物杂质等。

其次，杂质研究过程中不要试图一个方法就将有关物质敲定，杂质极性相近，会导致一种检测方法很难将所有杂质分开，甚至有的会跟主物质保留时间一致，因此将杂质合理分组分别研究会大大降低有关物质研究的难度。

再次，色谱柱、流动相的筛选。多肽一般水溶性较强，大多分子极性大，对一般条件的色谱体系没有保留，需要考虑添加相应的离子对试剂或者采用HILIC模式等非常规手段进行分析。有些结构对pH值敏感，有的对有机相敏感，类似情况需要重点确认方法的精密度。

1.2.含量

降低样品浓度，将峰形做好，做方法学研究时，流动相在有效期内尽可能多配制一些，以消除敏感因素。

1.3.残留溶剂

残留溶剂主要有合成工艺中的N,N-二甲基甲酰胺，制备纯化工艺中的乙腈、甲醇、乙醇、乙酸等，如果产品工业化，为降低成本可能会用到工业级试剂，需要考虑其中易带入的杂质。多肽高温下极易降解，采用顶空进样会有效控制降解程度，采取合适的溶剂能避免未知峰的产生。

1.4.聚合物

   半胱氨酸中含有巯基，在合成过程中极易缩聚形成二硫键，多个二硫键极易成环，甚至相互聚合最终形成聚合物，一般采取凝胶色谱柱进行研究。

1.5.反离子

如三氟乙酸、无机盐等采取离子色谱法。

1.6.其他项

醋酸按照药典（2020版）“0872合成多肽中的醋酸测定法”进行相应调整并做验证。多肽具有引湿性，水分测定需要称取的样品量较多，否则平行样品极易不平行；含量及水分均需要除湿后进行。元素杂质按照ICHQ3D指导原则采用ICP/MS进行研究。

1.7.稳定性

多肽含有多个手性中心，成品放置环境要求较高，温湿度对有关物质、异构体、含量、晶型等影响较大，因此稳定性应多方面考察。

二、多肽杂质控制策略  

在《美国药典委员会（USP）关于合成多肽API的质量属性及杂质控制策略指南》文献中详细描述了多肽杂质控制策略。

合成肽相关杂质可能来自原材料、制造过程、制造或储存过程中的降解以及 API 与赋形剂的相互作用。这些可能会影响药物的安全性和有效性，因此必须对其进行表征和控制。

想查阅更多关于多肽杂质控制策略，可以下载《美国药典委员会（USP）关于合成多肽API的质量属性及杂质控制策略指南》进一步的了解。